辽宁省科技厅科技攻关项目(2006208001)
- 作品数：7 被引量：33H指数：4
- 相关作者：王林美赵振军苏乔李树英叶博更多>>
- 相关机构：辽宁省农业科学院大连理工大学铁岭市农业科学院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 柞蚕蛹卵巢原代细胞培养方法及培养基的选择试验被引量：4
- 2010年
- 采用机械分散法和胰酶消化法,分别选取MGM-448、Grace、TC-100等3种培养基进行柞蚕蛹卵巢组织细胞的体外培养。在2个月的原代细胞培养期间,机械分散法获得的培养物在MGM-448培养基中贴壁效果好,细胞健康且生长旺盛;而在Grace和TC-100培养基中,细胞虽能贴壁,但生长较缓慢。胰酶消化法分散细胞的效果好,但在3种培养基中的细胞会出现轻微损伤而影响活力。综上认为,柞蚕蛹卵巢原代细胞的最佳培养方法为机械分散法,最佳培养基为MGM-448。
- 王林美范琦张波叶博赵振军李树英
- 关键词：柞蚕卵巢细胞原代培养
- 柞蚕蛹卵巢原代细胞培养方法的研究
- 研究柞蚕蛹卵巢原代细胞制作、培养。以卵巢组织为材料,采用机械分散法、胰酶消化法及螯合剂分散法,选取Grace、TC-100、MGM-448三种培养基体外培养2个月观察细胞生长变化。机械分散法对细胞无损伤;胰酶消化法有轻微...
- 王林美范琦张波叶博赵振军李树英
- 关键词：柞蚕卵巢原代培养
- 文献传递
- 子房滴注法将GUS基因表达框转入大豆的研究
- 2009年
- 为了验证大豆子房滴注转化方法的可重复性与遗传稳定性,将由报告基因GUS、表达调控序列(35S启动子,NOS终止子)和T-DNA边界序列3部分组成的基因表达框转入大豆。对T0代转化材料进行GUS组织化学染色分析和PCR检测。结果表明:在检测的340个幼胚中有12个呈GUS阳性,且在180个转化植株中有6个呈PCR阳性同时其叶片也呈GUS阳性,转化率分别为3.53%和3.33%。Southern杂交表明外源GUS基因表达框以低拷贝的形式整合到大豆基因组中。对转基因后代叶片GUS染色、PCR分析及Northern blot检测结果表明外源基因已遗传给了后代,其中S2株系符合孟德尔分离规律。
- 刘建凤苏乔安利佳冉学忠
- 关键词：大豆无选择标记
- 宾王菇母种培养基的筛选被引量：5
- 2009年
- 对宾王菇[Lyophyllum fumosurn(Pers.:Fr)Kummer]母种培养基的筛选试验,结果表明,在培养基d上宾王菇菌丝生长最好,培养基j、c次之,因此适于母种的生产;培养基m上菌丝生长整齐,但没有出菇和老化现象,适于母种的保存。
- 张敏李红苏君伟
- 关键词：母种培养基
- 栗蚕蛹卵巢细胞的初代培养
- 2009年
- 分别采用TC-100加20%胎牛血清做为细胞原代培养基,在27℃,pH6.2-6.4的条件下,对栗蚕(Dicty-opoeajaponica)蛹卵巢组织进行体外培养,细胞贴壁较好,原代培养细胞能够存活两个月之久。细胞形态不一,培养20d后,细胞产生聚集分化现象,每隔7d换液1次。结果表明:TC-100培养基对栗蚕蛹卵巢原代培养细胞来说是比较理想的培养基。
- 赵振军王林美
- 关键词：卵巢细胞培养
- 獐茅AlHAK1 Real-time PCR定量方法的建立被引量：1
- 2009年
- 以β-actin为内参基因,根据已克隆的AlHAK1及β-actin碱基序列,分别设计了实时定量特异性引物,优化了反应的退火温度与引物浓度,并以优化的条件建立了相对定量标准曲线,同时对该方法的稳定性进行了评价。结果表明AlHAK1及β-actin基因的real-time PCR扩增效率分别为1.09和1.04,线性相关系数分别为0.996和0.997,批内及批间变异系数<5%。所建立的AlHAK1real-time PCR定量方法操作简便、定量准确、重复性好,为进一步探索AlHAK1的功能、mRNA表达水平的变化及转AlHAK1农作物的检测奠定了方法学基础。
- 王兰苏乔
- 关键词：獐茅REAL-TIMEPCRMRNA
- 利用子房滴注法获得无载体骨架序列和选择标记的转基因玉米被引量：8
- 2009年
- 转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因。本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法,其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在完全去除花柱的子房上。利用子房滴注法将无载体骨架序列和选择标记的线性GFP基因表达框转化玉米。PCR结果表明:适合子房滴注法转化的玉米品种为9818,最佳转化时间为授粉后18～20 h,在此条件下得到最高的PCR阳性率,为3.01%;Southern blotting结果表明外源基因的整合方式简单(1～2条杂交带);RT-PCR结果表明转基因植株中GFP基因能够在RNA水平上正常表达;在转基因植株的根和幼胚中观察到GFP表达。
- 杨爱馥苏乔安利佳
- 关键词：GFP无选择标记转基因玉米
- 独角莲抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和诱导凋亡的作用研究被引量：15
- 2009年
- 为探讨独角莲对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的作用,将不同浓度的独角莲根茎水提物(The aqueous extract from dried powdered rhizomes of Typhonium giganteum Engl.,AEoTGE)处理MCF-7细胞24,48,72h后,应用四甲基偶唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色试验、倒置光学显微镜观察、流式细胞术(Flow cytometry,FCM)及琼脂糖凝胶电泳法检测细胞增殖和凋亡情况。结果表明:AEoTGE能够显著抑制MCF-7细胞增殖,且在一定的浓度范围内呈时间和浓度依赖性,并可诱导其细胞凋亡。30g·L-1AEoTGE处理24,48,72h后,MCF-7细胞凋亡率分别为8.34%、12.1%和12.6%,其凋亡程度与时间呈正相关,S期(DNA合成期)的细胞在处理72h后分布显著增加。可见,独角莲对MCF-7细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用,其抗肿瘤机制与诱导凋亡有关。
- 王林美叶博赵振军李树英
- 关键词：独角莲乳腺癌细胞凋亡细胞周期
