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广东省科技计划工业攻关项目(2012B031800123)

作品数：7 被引量：37H指数：4
相关作者：何援利付霞霏蔡慧华张冬梅陈夏珠更多>>
相关机构：南方医科大学更多>>
发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 5篇卵巢
  • 5篇卵巢早衰
  • 4篇细胞
  • 4篇干细胞
  • 3篇免疫
  • 3篇免疫性
  • 3篇免疫性卵巢早...
  • 3篇间充质干细胞
  • 3篇充质干细胞
  • 2篇鼠模型
  • 2篇脐带
  • 2篇脐带间充质干...
  • 2篇小鼠
  • 2篇小鼠模型
  • 2篇卵巢功能
  • 2篇慢病毒
  • 2篇间充质
  • 2篇骨髓间充质
  • 2篇MIR-21
  • 1篇蛋白

机构

  • 7篇南方医科大学

作者

  • 7篇何援利
  • 6篇付霞霏
  • 3篇蔡慧华
  • 1篇陈夏珠
  • 1篇王雪峰
  • 1篇王显
  • 1篇张冬梅
  • 1篇苏少敏
  • 1篇陈小莹

传媒

  • 2篇广东医学
  • 1篇实用妇产科杂...
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇南方医科大学...
  • 1篇临床医学工程
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 3篇2015
  • 2篇2013
共 7 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
大鼠miR-21慢病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达被引量：2
2015年
目的采用分子生物学方法构建miR-21慢病毒载体,并感染骨髓间充质干细胞（MSCs）,建立稳定表达miR-21的MSCs细胞系。方法合成大鼠miR-21基因序列,进行PCR扩增后,连接到慢病毒表达质粒p LVX-shRNA2中。对其进行双酶切及基因测序鉴定,证实载体p LVX-shRNA2-rno-miR-21-5p的成功构建。对载体进行包装、测定病毒滴度。分4组：MSCs组不转染病毒液,空载组转染空载病毒液,miR-21组1用miR-21慢病毒载体以MOI 20转染MSCs,miR-21组2用miR-21慢病毒载体以MOI 40转染MSCs。将慢病毒颗粒以不同感染复数（MOI）感染MSCs,检测感染效率,使用实时定量PCR法检测MSCs中miR-21的表达。结果目的基因与慢病毒载体成功连接。病毒滴度约为6×10～8CFU/m L。载体成功感染MSCs,转染效率达90%以上。实时定量PCR检测结果证实miR-21组1（MOI为20）、miR-21组2（MOI为40）miR-21表达量分别为4.05±0.07、4.06±0.04,与MSCs组（1.07±0.05）及空载组（1.12±0.05）相比差异有统计学意义（F=3 014.962,P=0.000）。结论采用分子生物学方法成功构建了大鼠miR-21慢病毒载体系统p LVX-shRNA2-rno-miR-21-5p,并成功转染MSCs,得到稳定表达miR-21的MSCs细胞系,从而为进一步研究miR-21的生物学特性提供实验基础。
付霞霏何援利纪露露苏少敏阮晓珍
关键词：MIR-21慢病毒骨髓间充质干细胞
透明带3多肽诱导的免疫性卵巢早衰小鼠模型子宫组织中Ki-67、ER的表达被引量：6
2015年
目的：以透明带3多肽（pZP3）诱导的免疫性卵巢早衰（POF）小鼠为研究对象，观察其子宫Ki-67、雌激素受体（ER）的表达，以进一步探讨免疫性卵巢早衰患者辅助生殖相关的子宫预处理方案。方法取7~8周龄的健康雌性BALB/c小鼠40只，随机分为对照组和模型组。通过阴道脱落细胞涂片、血清性激素、卵巢组织形态及抗卵巢ZP3抗体鉴定建模成功。检测两组小鼠子宫组织形态变化及子宫Ki-67、雌激素受体α亚型（ERα）及雌激素受体β亚型（ERβ）的表达。结果8周后80%小鼠建模成功。与对照组相比，模型组子宫萎缩，内膜变薄，单位面积内腺体数量减少。模型组子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞中Ki-67的表达较对照组减弱，且有胞核转位至胞浆现象。对照组小鼠子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞的胞浆强表达ERα，而模型组呈阴性表达。两组小鼠子宫内膜ERβ均呈阴性表达。结论 pZP3可以诱导小鼠成功构建免疫性卵巢早衰疾病模型，同时引起子宫内膜上皮细胞及间质细胞的增殖降低和ERα表达减弱。
蔡慧华付霞霏任旭雯陈夏珠张冬梅何援利
关键词：免疫性卵巢早衰KI-67
脐带间充质干细胞移植对免疫性卵巢早衰的影响被引量：8
2013年
目的探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)移植对自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢结构、功能的影响。方法以透明带3(ZP3)作为免疫原建立小鼠自身免疫性卵巢早衰动物模型。实验分为4组:空白对照组、模型组、实验对照组及移植组。空白对照组不注射ZP3及UCMSCs;模型组建立动物模型,不予移植;实验对照组建模后,双卵巢内注射生理盐水;移植组在建模成功即予每侧卵巢约注射1×106个UCMSCs。于移植后15、30、45及60 d分批处死小鼠,收集血标本检测性激素[雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)]浓度;留取卵巢标本,荧光显微镜下观察有无绿色荧光及其分布,计数卵泡数目。结果 UCMSCs移植后15 d,移植组卵巢组织内可见到绿色荧光,且持续至移植后2个月。绿色荧光主要分布在卵巢的间质组织,而卵泡内则见不到绿色荧光的分布。移植组部分小鼠恢复正常的动情周期。移植后各个时间点内,移植组E2浓度高于模型组及实验对照组,FSH浓度则降低。移植45、60 d时,移植组的各级卵泡数目均高于模型组及实验对照组,但低于空白对照组。结论 UCMSCs可以在透明带抗原免疫损伤的小鼠卵巢组织内存活并迁移,但其分化为卵泡组分的可能性较小。UCMSCs移植可修复透明带免疫损伤的卵巢组织,从而部分改善其内分泌功能。
付霞霏何援利
关键词：免疫性卵巢早衰卵巢功能
免疫性卵巢早衰小鼠卵巢组织中Cx43、Bcl-2表达的研究被引量：4
2016年
目的:检测免疫性卵巢早衰(POF)小鼠卵巢组织中缝隙链接蛋白43(Cx43)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的m RNA及蛋白水平,以探讨其在免疫性POF发病中的作用。方法:建立免疫性POF小鼠模型并选择同期佐剂对照组及正常对照组,分别于2周、4周、6周观察各组小鼠双侧卵巢组织学变化。ELISA法测定各组小鼠血清FSH水平。免疫组化法检测各组小鼠卵巢组织中Cx43和Bcl-2蛋白相对表达量,PCR法检测Cx43和Bcl-2 m RNA水平。结果:POF组4周及6周Cx43蛋白、Bcl-2蛋白相对表达量显著低于正常对照组和佐剂对照组(P<0.05);POF组4周及6周Cx43蛋白、Bcl-2蛋白相对表达量较POF组2周降低(P<0.05)。POF组4周及6周Cx43 m RNA、Bcl-2 m RNA表达水平显著低于正常对照组佐剂对照组(P<0.05);POF组4周及6周Cx43 m RNA、Bcl-2 m RNA表达水平较POF组2周降低(P<0.05)。结论:在免疫性POF小鼠卵巢组织中Cx43和Bcl-2蛋白及m RNA表达均下调,可能与在免疫性POF的发生发展有关。
任旭雯何援利蔡慧华王显
关键词：连接蛋白43B细胞淋巴瘤-2免疫性卵巢早衰小鼠模型
miR-21慢病毒载体构建及对骨髓间充质干细胞凋亡的影响被引量：2
2017年
背景:骨髓间充质干细胞移植后凋亡成为治疗化疗性卵巢早衰效果欠佳的主要原因。miR-21参与细胞增殖与凋亡的调控,有重要的抗凋亡作用。目的:构建miR-21慢病毒载体并感染骨髓间充质干细胞,观察其对化疗药物磷酰胺氮芥诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的影响。方法:构建携带miR-21基因慢病毒表达载体LVX-shRNA2-rno-miR-21-5p,双酶切及基因测序鉴定证实载体构建成功。对载体进行包装、测定病毒滴度。将慢病毒颗粒以不同感染复数(20和40)感染骨髓间充质干细胞,检测感染效率,使用real-time PCR法检测骨髓间充质干细胞中miR-21的表达。流式细胞仪、Hoechst33342染色检测骨髓间充质干细胞在磷酰胺氮芥模拟的化疗微环境中的凋亡率。结果与结论:(1)成功构建miR-21慢病毒载体,病毒滴度约为6×10^(11) CFU/L;(2)载体转染骨髓间充质干细胞效率达90%以上;(3)miR-21组1(感染复数为20)、miR-21组2(感染复数为40)miR-21表达量明显高于骨髓间充质干细胞组及空载组(P=0.000);(4)转染组骨髓间充质干细胞的凋亡率、凋亡指数均低于空载组及骨髓间充质干细胞组(P=0.001);(5)实验成功构建大鼠miR-21慢病毒载体系统,miR-21上调能抑制骨髓间充质干细胞凋亡,促进细胞增殖。
付霞霏何援利王雪峰陈小莹
关键词：干细胞骨髓干细胞MIR-21慢病毒细胞凋亡
卵巢早衰及卵巢功能减退患者血清IL-21的水平变化被引量：13
2015年
目的探讨人外周血白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)与卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)及卵巢功能减退(decreased ovarian reserve,DOR)的发病是否相关。方法收集POF患者25例、DOR患者14例以及健康体检的育龄女性18例作为对照,采用放射免疫法检测血清IL-21水平,并与其他实验室指标进行相关性分析。结果 POF组和DOR组患者的血清IL-21水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(F=4.971,P=0.010),POF组和DOR组患者的血清IL-21水平近似,差异无统计学意义(P>0.05)。IL-21分别与促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、抗苗勒管激素(anti-miillerian hormone,AMH)呈正相关(r=0.389,P=0.003;r=0.275,P=0.040),IL-21分别与雌二醇(estradiol,E2)、平均卵巢体积(mena ovarian volume,MOV)呈负相关(r=-0.377,P=0.004;r=-0.271,P=0.042)。结论血清IL-21在POF患者中升高,而且在DOR患者中明显升高,并与卵巢储备功能相关,提示IL-21可能参与早期POF的发病过程,可望成为防治POF的新途径。
蔡慧华何援利付霞霏任旭雯
关键词：IL-21卵巢储备功能卵巢早衰
脐带间充质干细胞卵巢局部移植在卵巢早衰大鼠体内的分布被引量：4
2013年
目的观察脐带间充质干细胞(UCMSCs)卵巢局部移植在卵巢早衰大鼠体内的分布。方法建立模型移植标记UCMSCs,观察各脏器绿色荧光细胞分布情况。结果卵巢内发现移植细胞,肺、脾可见到较多移植细胞,心、肝、肾可见到散在分布移植细胞。结论 UCMSCs能在卵巢组织内存活,部分滞留在肺、脾等组织。
付霞霏何援利
关键词：脐带间充质干细胞干细胞移植卵巢早衰
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