国家重点基础研究发展计划(2009CB522205)
- 作品数：6 被引量：48H指数：4
- 相关作者：杜杰王绿娅刘飒崔巍王颖更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所北京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种快捷小鼠心肌梗死模型的建立被引量：23
- 2012年
- 目的建立一种快速高效不需要通气辅助呼吸的小鼠心肌梗死模型制作方法,并对制作过程中的技巧细节进行分析。方法 40只C57/B6雄性小鼠,随机分成手术组(25只)和对照组(15只),于麻醉状态下在左侧第3,4肋间隙挤出心脏,手术组结扎冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型;对照组不结扎冠状动脉,其余操作与手术组相同。28天后,心脏超声系统进行心功能测定对比,解剖进行形态对比和病理染色对比心肌梗死和纤维化。结果至术后第28天,手术组心肌梗死小鼠的生存率80%,对照组的小鼠生存率100%。超声检测显示28天后手术组小鼠心功能明显降低,与对照组相比,手术组心室明显扩大,左心室舒张期末内径由3.52±0.10 mm扩大到4.65±0.08 mm(P<0.0001),左心室收缩期末内径由2.60±0.19 mm扩大到4.36±0.13 mm(P<0.0001);左心室射血分数由66.70%±1.41%下降到29.70%±1.64%(P<0.0001),左心室缩短分数由35.90%±1.01%下降到14.20%±0.80%(P<0.0001)。肉眼可见手术组小鼠心脏左心室心腔变大,心室壁明显变薄,梗死面积可达45.10%±1.53%;HE、免疫组织化学、Masson病理染色可见有明显纤维瘢痕形成,有大量炎细胞浸润。结论此种方法制备心肌梗死模型高效快捷,动物死亡率低,结果明显,是一种较好的方法。
- 石洪涛王颖张俊蒙王绿娅杜杰
- 关键词：小鼠动物模型心肌梗死
- 小鼠结直肠癌肝转移模型的建立及其炎症微环境分析被引量：5
- 2012年
- 背景与目的:肝转移是结直肠癌死亡率上升的主要原因,建立稳定而模拟性好的结直肠癌肝转移模型,对研究其发病机制及转移特性意义重大。本研究以建立小鼠结直肠癌肝转移模型为基础,对肿瘤微环境进行分析,旨在探索炎症微环境在肿瘤发生、发展与转移中的作用。方法:应用保脾法通过脾脏原位注射SL4细胞建立模型,显微镜下观察肝脾组织病理形态学改变;用流式细胞术分析外周血和脾脏免疫表型及肿瘤炎症微环境变化。结果:造模成功率100%;显微镜下模型组肝脾组织有大量肿瘤细胞浸润,炎症细胞增多。流式细胞术分析显示,模型组外周血B淋巴细胞(CD3-B220+)减少,由62.6%降至30.2%,脾脏B细胞(CD3-B220+)增多,由33.6%升至42.4%,提示B细胞从外周血动员到脾脏以产生抗肿瘤抗体;模型组外周血单核粒细胞(Gr1+CD11b+)增多,由9.6%升至54.1%,在体内循环和炎症微环境作用下,转化为肿瘤组织中的肿瘤相关巨噬细胞TAM(Gr1+F4/80+),表达量49.5%,提示TAM可能对肿瘤生长和转移起关键作用。结论:采用保脾法经脾脏原位注射SL4细胞建立的小鼠结直肠癌肝转移模型可成为研究肿瘤转移的理想模型,为探索结直肠癌肝转移机制及炎症微环境对肿瘤生长和转移的影响奠定基础。
- 崔巍杜杰杨敏郑娇苗艳菊韩雅蕾刘飒赵莉敏林筝
- 关键词：结直肠癌肝转移小鼠模型
- 重组融合蛋白TNFR2-Fc-IL-1ra抑制血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠心肌肥厚被引量：3
- 2014年
- 目的探讨新型重组融合蛋白TNFR2-Fc-IL-1ra(TFI)对高血压心肌肥厚的抑制作用及可能机制。方法8周龄雄性C57BL/6J健康小鼠24只随机分为3组:对照组(生理盐水)、模型组[血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1500ng/(kg·min),灌注7d]、治疗组[AngⅡ1500ng/(kg·min)+TFI 5mg/(kg·2d)],每组8只。第7天时采用鼠尾套法检测尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;即刻处死并取其心脏进行组织切片,行苏木素-伊红(HE)染色观察大体形态;麦胚凝集素(WGA)染色观察心肌细胞肥大;免疫组化染色检测各组心肌中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β);实时定量PCR检测TNF-α、IL-1β和心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA水平。结果与对照组相比,模型组1、3、7d的血压明显升高;左心室舒张、收缩末期前壁厚度增厚;心肌细胞横截面面积[(322.2±11.6)比(199.7±12.4)μm2]明显升高;TNF-α[(1.33±0.26)%比(0.03±0.01)%]和IL-1β[(1.84±0.33)%比(0.08±0.03)%]阳性面积增加;TNF-α、IL-1β、ANP和β-MHC mRNA表达升高(均P<0.05)。与模型组相比,治疗组小鼠血压无明显变化;心室壁厚度减轻;心肌细胞横截面面积减小;TNF-α、IL-1β表达降低;ANP和β-MHC mRNA表达降低(均P<0.05)。结论 TFI通过抑制炎症反应改善心肌肥厚。
- 王月丽李玉琳吴依娜王绿娅杜杰
- 关键词：心肌肥厚小鼠重组融合蛋白炎症因子
- 巨噬细胞的免疫重塑:防治肿瘤转移的新靶点被引量：4
- 2016年
- 动态变化的炎性环境是肿瘤不断恶变并发生转移的重要原因。巨噬细胞作为肿瘤间质中主要的炎症细胞,在肿瘤微环境的刺激下,发生了表型和功能的改变,促进肿瘤的恶性进展。因此,研发选择性的调控巨噬细胞免疫重塑的药物,可能成为肿瘤靶向治疗的新策略。但是,肿瘤微环境中调控巨噬细胞表型转化的关键事件及分子网络目前尚未明确。我们的研究发现,先天性免疫机制中重要的衔接蛋白CARD9(caspase recruitment domain-containing protein 9),通过促进骨髓来源的巨噬细胞向转移相关的表型分化,进而在结肠癌肝转移中起关键作用。组织蛋白酶Cat S(cathepsin S)通过介导巨噬细胞自噬过程,促进巨噬细胞向M2型分化,加重肿瘤转移。相反,结肠癌中黏附分子1(ICAM-1)通过调控巨噬细胞的吞噬功能,抑制肿瘤相关巨噬细胞向M2型分化,阻滞肿瘤转移。我们新近的研究发现,在转移微环境中M2型巨噬细胞促进肿瘤细胞由上皮型向间质型转化,加重转移灶形成;相反,M1型巨噬细胞导致肿瘤细胞由间质型向上皮型转分化,导致转移灶中存活的肿瘤细胞处于休眠状态。综上,我们以肿瘤微环境中巨噬细胞的分化、自噬、吞噬及调控肿瘤细胞表型为切入点,以期发现调节肿瘤转移的分子靶点,为肿瘤免疫治疗提供更多的依据,并且提供新的防治肿瘤转移的药物靶点。
- 杨敏杜杰Alan WELLS
- 关键词：巨噬细胞肿瘤微环境肿瘤转移
- 流式细胞术检测细胞周期分析软件的比较被引量：8
- 2012年
- 目的探讨流式细胞术中不同细胞周期分析软件在细胞周期分析中的特点和差异。方法采用碘化丙啶染色,在Epics XL流式细胞仪上检测细胞周期,分别应用MultiCycle和Modfit LT软件对检测数据进行分析,并比较分析结果。结果 MultiCycle和Modfit LT软件分析细胞周期各时相比例、DNA倍体分析、细胞增殖及细胞凋亡数值,比较其结果基本一致。仅人肺癌细胞系A549细胞G2/G1值应用2种不同软件分析其数据差异有统计学意义(P<0.01);Jurkat T细胞聚集体的比例应用2种不同软件分析其数据差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MultiCycle和Modfit LT软件分析同一样本所得拟合结果有较高的一致性;对G2/G1值进行限制的操作可能更适用于组成成分较复杂的样本;虽然不同采集软件区分粘连细胞和细胞集落的方法不同,导致聚集体的比例差异显著,但并未对细胞周期分析结果的判定产生影响。
- 刘飒崔巍王晓波吴珺辛毅
- 关键词：流式细胞术细胞周期
- 细胞间粘附因子-1在高血压致炎症和心脏纤维化中作用的研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨细胞间粘附因子-1(Intercellular Adhesion Molecular-1,ICAM-1)在高血压致炎症与心脏纤维化中的作用。方法将12只野生小鼠和12只ICAM-1敲除小鼠随机分成四组:野生对照组,野生血管紧张素Ⅱ灌泵组,ICAM-1敲除对照组,ICAM-1敲除血管紧张素Ⅱ灌泵组,给予血管紧张素Ⅱ(1500ng/kg*min,7d)及乙酸溶液(对照组)微量泵灌注,在灌注后第7天通过小鼠尾动脉套法测定各组血压,超声心动图检查以观察小鼠心脏结构和功能改变,马松染色、天狼星红染色观察心脏纤维化,免疫组化α-SMA染色观察肌成纤维细胞的形成,HE染色和免疫组化Mac-2、IL-1β、TGF-β染色观察炎症细胞浸润及炎症因子分泌。结果血管紧张素Ⅱ灌注第7天,灌泵组较对照组血压升高,说明造模成功。ICAM-1敲除灌泵组较野生灌泵组炎症细胞浸润增多(p<0.05n=6),尤其是Mac-2+巨噬细胞(p<0.05n=6),炎症因子TGF-β、IL-1β分泌增多(p<0.05n=6),α-SMA+肌成纤维细胞增多(p<0.05n=6)。结论在高血压致心脏纤维化过程中,ICAM-1敲除后,加重以Mac-2+巨噬细胞为主的炎症细胞浸润、增加炎症因子(TGF-β、IL-1β)分泌,导致心脏组织中α-SMA+的肌成纤维细胞形成,最终加重心脏纤维化。
- 张文美贾立昕李涛涛赵伟杜杰肖传实边云飞
- 关键词：细胞间粘附因子-1高血压炎症纤维化
