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公益性行业科研专项(200803014)
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
相关作者:
唐青
黄莹
扈荣良
严家新
陶小燕
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相关机构:
中国疾病预防控制中心
武汉生物制品研究所
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发文基金:
公益性行业科研专项
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相关领域:
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狂犬病毒街毒株全长基因cDNA克隆的构建及鉴定
被引量:4
2009年
利用分子克隆的方法,将狂犬病毒街毒株的全基因组分为4个片段按照它们基因组上的顺序克隆到真核表达载体pVAX1上,并将G-L间隔区的非编码区替换为表达绿色荧光蛋白(GFP)的核苷酸,构建出表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组狂犬病毒HN10株全长基因组cDNA真核表达质粒,同时,在全长cDNA的两侧嵌入锤头状核酶(HamRz)和丁型肝炎病毒核酶(HdvRz)的序列,并置于CMV启动子的控制下,为下一步拯救出该嵌合病毒提供了可直接使用的全长cDNA真核表达质粒。
明平刚
黄莹
唐青
杜加亮
陶小燕
严家新
扈荣良
关键词:
狂犬病毒
全长CDNA
克隆
冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位
2010年
目的冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位。方法将本实验室构建并拯救成功的人用狂犬病疫苗株重组病毒(CTN—GFP)脑内接种1日龄乳鼠和4周龄成年鼠,待感染乳鼠发病后至濒死期,通过心内灌流方法固定并制作脑组织冰冻切片,观察重组病毒在感染鼠的大脑海马组织中的绿色荧光蛋白的表达及分布。结果DAPI将所制作的冰冻切片中脑组织内细胞的胞核染成蓝色,在共聚焦显微镜下观察到受感染乳鼠的脑组织海马回位置有大量绿色荧光蛋白的表达。结论通过制作脑组织冰冻切片的方法可以清楚的观察到病毒的感染及其在海马回中的位置,同时为追踪病毒在体内的移行过程提供了一种新方法。
黄莹
龚锴
唐青
关键词:
冷冻
狂犬病病毒
动物替代试验
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