教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-08-0940)
- 作品数：21 被引量：60H指数：4
- 相关作者：王劲代其林杨娟谢琳田霞更多>>
- 相关机构：西南科技大学中国农业科学院生物技术研究所绵阳师范学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 农杆菌介导的棉花遗传转化过程中诸因素对出愈率的影响被引量：1
- 2012年
- 研究了农杆菌介导的棉花遗传转化过程中影响外植体出愈率的一些相关因素.结果表明:卡那霉素(Kan)的浓度以50 mg/L或75 mg/L为最好,农杆菌菌株EHA105的浸染能力较强,7 d苗龄的棉花无菌苗下胚轴为最佳的遗传转化外植体材料,下胚轴外植体经预培养后再经农杆菌菌液浸染更有利于胚性愈伤组织的形成,同时农杆菌菌液浸染时间以3 min为最佳.
- 孙英坤代其林龚元亚田霞谢琳杨娟王劲
- 关键词：棉花外植体农杆菌出愈率
- GAPB基因原核表达载体的构建
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。
- 田霞代其林龚元亚孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：融合蛋白
- PRK基因原核表达质粒的构建被引量：1
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,扩增出PRK基因,构建重组质粒pET-28a(+)-PRK转化大肠杆菌DH5α。经PCR鉴定和酶切鉴定筛选出阳性克隆,将阳性克隆的质粒转化到大肠杆菌表达载体BL21中,构建PRK基因原核表达载体。测序结果表明pET-28a(+)-PRK载体构建成功。
- 龚元亚代其林田霞孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：PCR
- 农杆菌介导DR1172基因转化拟南芥被引量：2
- 2012年
- 耐辐射奇球菌(D.radiodurans,DR)能在极端胁迫条件下生存,并且拥有一个独特的极端环境抗性基因组而被广泛用于研究。其中DR1172是在耐辐射球菌中分离出的一段基因,与LEA76家族同源,参与植物的抗旱机制。本研究利用基因工程手段以载体pBI121为基础构建植物DR1172-GV3103表达载体,然后利用花序浸染法将目的基因DR1172转入模式植物拟南芥中,T2代得到50株植物,阳性为15棵,转化率为30%。该研究为探讨DR1172基因的功能以及植物抗逆机制提供了丰富的拟南芥材料,而且对利用基因工程技术手段改良植物性状,培育出抗逆性强的植物优良品种有重要的指导价值。
- 张新崔广艳陈翠娜张思维代其林王劲
- 关键词：拟南芥抗旱
- 利用酵母双杂交系统筛选IrrE相互作用蛋白
- 2012年
- 本研究通过酵母双杂交技术,构建了IrrE蛋白为诱饵载体,从拟南芥cDNA文库中筛选与IrrE诱饵蛋白相互作用的功能蛋白.研究结果表明,在所获得的阳性克隆中,发现了一个与拟南芥基因Atlg01470所编码的蛋白有较高同源性的蛋白,即LEA14蛋白(晚期胚胎发育富集蛋白),同源性高达98%.推测IrrE转录因子在提高植物耐盐性的过程中起了重要作用.
- 田霞代其林龚元亚孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：酵母双杂交功能蛋白耐盐性
- 乙酰丁香酮及共培养基pH对棉花遗传转化的影响被引量：3
- 2013年
- 以陆地棉种质系珂字棉312为材料,探讨了在共培养基添加乙酰丁香酮(AS)同时调节pH值对抗性愈伤组织诱导率、正常体细胞胚数以及Kan抗性苗获得率的影响。结果表明,在共培养阶段的乙酰丁香酮浓度与pH均对棉花遗传转化有明显的影响。当乙酰丁香酮的浓度为100μmol/L、pH值为5.6时,棉花的遗传转化率最高。其抗性愈伤组织的诱导率达到72.96%,Kan抗性苗获得率可达到8.96%;对转化再生植株进行PCR检测,约52.07%的Kan抗性苗呈阳性。
- 陈翠娜冯德玉张新张思维代其林王劲
- 关键词：乙酰丁香酮PH根癌农杆菌棉花
- 转IrrE基因甘蓝型油菜对NaCl胁迫的耐受性应答被引量：6
- 2011年
- 以转IrrE基因甘蓝型油菜为材料,研究了转IrrE基因甘蓝型油菜幼苗对NaCl胁迫的耐受性应答情况.在200 mmol/L NaCl胁迫下,随着胁迫时间的延长,转IrrE基因和野生型油菜的POD、SOD和CAT三种抗氧化酶活性均增加,其中野生型油菜的三种抗氧化酶在24h后达到峰值,随后逐渐下降,而转IrrE基因油菜的三种抗氧化酶活性却持续增加,并在相同的胁迫时间内均高于野生型油菜的酶活性;同时转IrrE基因油菜的脯氨酸和可溶性蛋白质含量均比野生型油菜的高,但其丙二醛(MDA)的含量比野生型油菜的低.结果表明,IrrE基因作为一种转录因子可能广泛参与了油菜幼苗对NaCl胁迫的耐受性应答过程,从而提高了植物对NaCl胁迫的耐受能力.
- 奉斌代其林刘婷婷田霞龚元亚孙英坤杜世章王劲
- 关键词：NACL胁迫抗氧化酶甘蓝型油菜
- 辐照对烟草抗氧化酶活性的影响被引量：4
- 2012年
- 以K326烟草植株为材料,研究了60Co-γ射线辐照对烟草叶片抗氧化酶活性及其基因转录水平的影响。结果表明,经300Gy60Co-γ射线辐照后0～48 h期间,烟草叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)三种抗氧酶活性以及其相应酶基因转录水平都逐渐提高,SOD、POD和CAT酶活性及其基因转录水平在12 h均达最大值,三者的活性及其基因转录水平随后都逐渐降低。我们的实验结果表明烟草叶片的抗氧化酶活性在其耐辐射能力起了重要作用。
- 杜世章刘婷婷代其林奉斌杨娟谢琳鲜先毅王劲
- 关键词：烟草抗氧化酶
- 干旱胁迫对转IrrE基因甘蓝型油菜生理生化指标的影响被引量：6
- 2012年
- 以转IrrE基因与非转基因甘蓝型油菜为材料,用10%(W/V)PEG6000(聚乙二醇)进行了干旱胁迫实验,比较研究了转IrrE基因与非转基因甘蓝型油菜幼苗的耐受性应答情况。结果表明:转基因油菜植株含水量下降趋势小于非转基因油菜植株;转基因油菜植株叶绿素含量和荧光参数F0的上升趋势均明显大于非转基因油菜植株;转基因油菜植株的Fv/Fm值和可溶性蛋白含量均大于非转基因油菜植株,但丙二醛(MDA)含量小于非转基因油菜植株。以上结果从侧面证实了:在干旱胁迫下,转IrrE基因油菜植株较非转基因植株有更强的耐受能力;IrrE基因作为一种转录调节因子,广泛参与了油菜幼苗对干旱胁迫的耐受性应答过程,增强了植株的耐旱能力。
- 杨娟谢琳张新奉斌代其林王劲
- 关键词：干旱胁迫叶绿素荧光生理生化指标
- 转IrrE基因甘蓝型油菜农艺性状的分析
- 2010年
- 文章主要研究了转IrrE基因T1代甘蓝型油菜在自然条件与Nacl盐胁迫条件下的农艺性状,结果表明:以自然条件下的野生型油菜为对照,自然条件下的转IrrE基因油菜在株高、主花序长度、全株有效角果数差异极显著,而分枝部位高度和分枝个数差异不显著。300mMNaCl高盐胁迫条件下的转IrrE基因油菜,株高、主花序长度、全株有效角果数差异极显著,分枝数差异不显著。
- 奉斌代其林刘婷婷田霞龚元亚孙英坤王劲
- 关键词：甘蓝型油菜NACL胁迫
