新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目(201011109)
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
- 相关作者：高文伟耿洪伟于月华王莉萍陈全家更多>>
- 相关机构：新疆农业大学新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小麦转录因子TaSIM的原核表达分析被引量：3
- 2013年
- 为了进一步研究TaSIM基因的功能,以pJET1.2-TaSIM质粒为模板,PCR扩增TaSIM基因的cDNA编码区,构建了该基因的原核表达载体pET-28a-TaSIM,经菌液PCR和测序鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。结果表明,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达了与标签蛋白融合的TaSIM蛋白,大小约为33 kDa。SDS-PAGE电泳分析表明,最佳诱导表达条件为0.5 mmol/L IPTG在37℃下诱导2 h。
- 于月华耿洪伟陈全家高文伟王莉萍曲延英
- 关键词：小麦原核表达
- 玉米高光效基因ppdk的克隆及其生物信息学分析被引量：3
- 2010年
- 【目的】获得玉米(Zea mays)的丙酮酸磷酸双激酶基因(以下简称ppdk),并对其进行生物信息学分析。【方法】使用Trizol提取玉米SC704的总RNA,并用特异引物对其进行RT-PCR扩增,将得到的cDNA片段连接到pGEM-T载体后转化大肠杆菌DH5α,然后对阳性克隆进行测序,并对序列进行生物信息学分析。【结果】获得的玉米PPDK基因CDS全长2 781 bp,与玉米z561ppdk基因同源性为99%;其编码的多肽链包含926个氨基酸,与玉米PPDK同源性为97%。【结论】克隆了玉米C4型丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)基因,它所编码的氨基酸序列具备PPDK蛋白的保守序列和催化活性中心区域。该基因的成功克隆为今后利用其改造C3植物的光合效率以提高粮食单产奠定了良好的基础。
- 王重张跃强樊哲儒李剑峰赵奇王子霞海热古丽.阿不力孜张宏芝
- 关键词：玉米C4植物光合作用效率PPDK生物信息学
- 小麦TaSIM基因结构及表达分析
- 2012年
- 根据小麦TaSIM基因的cDNA序列设计引物,采用PCR技术从小麦中克隆TaSIM基因的DNA序列,采用半定量RT-PCR方法研究TaSIM基因在不同组织中的表达。结果表明:TaSIM编码区DNA序列长度为2 355bp,包含2个外显子和1个内含子。分析发现内含子富含AT,在内含子中发现2个MYB转录因子结合位点。半定量RT-PCR检测表明,TaSIM基因在不同组织中均有表达,在雄蕊中的表达量最高。TaSIM表达量依次为雄蕊>雌蕊>根>茎>叶。
- 于月华耿洪伟王莉萍高文伟陈全家张巨松曲延英
- 关键词：小麦MYB转录因子
- 干旱胁迫下小麦幼苗基因表达谱的cDNA-AFLP分析被引量：2
- 2012年
- 为了分离和识别小麦抗旱相关基因,给小麦抗旱节水育种提供依据,以既抗旱又具备高水分利用效率的新疆春小麦主栽品种新春6号为材料,采用cDNA-AFLP技术,分析了小麦在两叶一心期干旱胁迫条件下的诱导表达基因。通过253对引物组合的筛选,共得到748个干旱胁迫特异上调表达的转录衍生片段(TDF)。对其中22条片段进行克隆、测序、Blastx比对和功能分类分析的结果表明,有18个TDFs所推导的蛋白质序列与NCBI已有序列同源,功能涉及逆境胁迫反应、发育、信号转导、抗病蛋白、跨膜转运、能量代谢等方面;有4个TDFs在NCBI找到同源序列,但功能未知。
- 张跃强李剑峰王重樊哲儒王浩张宏芝
- 关键词：小麦干旱胁迫基因表达
- 小麦抗干旱和抗干热风育种中几个问题的探讨被引量：4
- 2011年
- 为给小麦抗干旱、抗干热风育种工作者提供参考,对我们从事40多年小麦育种、育成新疆1986年以来20多年种植面积最大的春小麦品种的体会进行总结,从9个方面介绍了小麦抗干旱、抗干热风育种的基本思路。
- 樊哲儒张跃强吴振录李剑峰
- 关键词：小麦抗干旱育种
- 小麦盐胁迫相关基因的克隆与表达分析被引量：8
- 2012年
- 采用RT-PCR方法,从小麦中克隆获得1个盐诱导小麦MYB类转录因子基因TaSIM(Triticum aestivum salt-induced MYB),该基因cDNA全长1 213bp,具有1个831bp的开放阅读框,编码276个氨基酸,预测分子量约为29.903kD,等电点为10.12,推测的氨基酸序列中含有2个高度保守的SANT结构域。系统发生树分析表明,TaSIM与二穗短柄草XP_003576185亲缘关系最近。半定量RT-PCR检测结果显示,TaSIM基因受盐胁迫诱导表达。亚细胞定位结果显示,TaSIM-hGFP融合蛋白定位于细胞核中。研究结果表明,小麦TaSIM基因编码的蛋白可能在细胞核内参与小麦对盐胁迫的应答反应。
- 于月华王莉萍高文伟陈全家耿洪伟张巨松曲延英
- 关键词：小麦基因克隆
- 玉米ZmCPK12基因真核表达载体的构建及转化
- 2012年
- [目的]CDPK是一类依赖于Ca^(2+)而不依赖CaM及磷脂的蛋白激酶,或类钙调素结构域的蛋白激酶,是植物和低等动物所特有。研究为玉米CDPK基因家族在抗逆中的作用提供基础。[方法]构建玉米ZmCPK12基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一。实验利用RT-PCR技术扩增得到大小为1 533 bp的玉米ZmCPK12基因,经限制性内切酶SdI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒ZmCPK12-5N。[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmCPK12-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。[结论]成功构建了玉米ZmCPK12基因真核表达载体,并且成功转化了酵母。
- 张毓露郝晓燕足木热木刘小利陈果陈勋基黄全生
- 关键词：玉米基因真核表达载体
