卫生部科学研究基金(WKJ2006-2-026)
- 作品数：12 被引量：31H指数：4
- 相关作者：郑金旭许姣宋萍吴立艳许清更多>>
- 相关机构：江苏大学附属医院江苏大学上海市第八人民医院更多>>
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- 柴胡皂甙d干预肺纤维化VEGF/PEDF表达的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的:观察柴胡皂甙(SS)d对博来霉素(BLM)致肺纤维化小鼠的肺组织血管内皮生长因子(VEGF)/色素上皮衍生因子(PEDF)在不同时间表达变化的调节作用,并探讨其与抗肺纤维化作用的关系。方法:将80只小鼠随机均分为对照组,BLM组,SSd大、小剂量组。治疗组分别每天腹腔注射不同剂量SSd(2.0mg/kg,1.0mg/kg),分别于3、7、14及28d时观察纤维化程度,样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,免疫荧光观察PEDF、VEGF蛋白在肺内表达的规律,RT-PCR观察各时间点PEDF、VEGFmRNA表达的强度。结果:BLM组和SSd大、小剂量组均呈纤维化逐渐进展的动态变化,28d时,SSd大、小剂量组纤维化程度较BLM组轻(P<0.01);BLM组和SSd大、小剂量组HYP含量随时间增加逐渐增加,7、14及28d时SSd大、小剂量组HYP含量均低于BLM组(P<0.001);BLM组及SSd大、小剂量组VEGF表达从3d时开始升高,第7天达高峰,后呈下降趋势,28d达低点,PEDF表达总体呈逐渐增高趋势;SSd大、小剂量组VEGF表达比BLM组降低,PEDF表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论:SSd能够抑制肺纤维化进展,机制可能与下调VEGF的表达,上调PEDF的表达有关。
- 郑金旭许清管淑红刘继柱宋萍汤燕吴立艳
- 关键词：柴胡皂甙肺纤维化血管内皮生长因子类博来霉素
- 白细胞介素32在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化组织中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨白细胞介素32(IL-32)在博来霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化过程中各期的表达和意义。方法将72只雄性小鼠随机分为三组,每组24只。分别给予0.9%氯化钠注射液0.04ml(C组)和等量的BLM(5mg/kg)(B、A组),一次性气管内灌注。A组在BLM灌注后每天给予地塞米松5mg/kg腹腔注射。然后各组分别于第3、7、14和28天各处死6只小鼠,取肺组织,做病理切片、免疫组织化学染色,应用Westernblot法测定IL-32表达。结果B组肺组织病理切片按时间顺序呈现由肺泡炎至纤维化动态改变。B组肺组织中IL-32蛋白表达水平高于C组(P<0.01)和A组。结论IL-32在肺纤维化形成过程中高表达,可能在肺纤维化形成的早中期发挥重要作用。
- 郑金旭夏德刚田高润卢坤琴丁明钱海
- 关键词：肺纤维化博来霉素白细胞介素32
- IL-33参与促进A549细胞上皮-间质转化及作用机制被引量：3
- 2013年
- 目的探讨在上皮来源的A549细胞上皮-间质转化进程中,IL-33/ST2L信号传导系统的作用及其机制。方法培养A549细胞,RT-PCR检测受体ST2L mRNA;不同浓度白细胞介素-33(IL-33)刺激细胞,在不同时间点以MTT方法检测IL-33对A549细胞增殖的影响;以Real-time PCR法检测不同时间点A549细胞标志性基因E-cad mRNA、α-SMA mRNA以及Vimentin mRNA等的变化和IL-33/ST2L信号通路中关键因子TRAF-6 mRNA的表达改变;Western blot法检测细胞标志性蛋白E-cad、collagenI、Vimentin以及TRAF-6的改变。结果 IL-33对A549细胞的增殖没有影响;不同浓度(5、10及50 ng/mL)IL-33刺激A549细胞24 h,E-cad的表达随浓度的升高逐渐下降、α-SMA的表达随浓度的升高逐渐上调,选择10 ng/mLIL-33作为A549细胞的刺激浓度;随着IL-33刺激时间的逐渐延长,E-cad的表达先降低后升高,α-SMA、Vimentin、collagenI以及TRAF-6的表达呈现先升高后降低的趋势。结论 IL-33/ST2L信号通路的激活能促进A549细胞间质变,尤其是在早期炎症反应阶段作用最为明显。
- 吴立艳郑金旭宋萍许姣刘继柱许清
- 关键词：A549细胞增殖上皮-间质转化
- 气管内移植人脐血间充质干细胞对博来霉素致小鼠肺纤维化的作用
- 2015年
- 目的:探讨气管内移植人脐血间充质干细胞(HUCBMSCs)对于博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用,比较气管内及尾静脉移植HUCBMSCs对肺纤维化的治疗效果。方法:取第2代HUCBMSCs培养至4代;60只无特定病原体的雄性昆明小鼠随机分成4组:阴性对照组(Cont组)、博来霉素组(BLM组)、HUCBMSCs移植Ⅰ组(MⅠ组)和HUCBMSCs移植Ⅱ组(MⅡ组),每组15只;后3组小鼠采用气管内插管灌注博来霉素制造肺纤维化模型,24 h后,MⅠ组各小鼠气管内灌注5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记的HUCBMSCs,MⅡ组各小鼠尾静脉内注射Brdu标记的HUCBMSCs,分别于模型建造后的第7、14、28天每组各处死5只小鼠取材。采用HE染色和Masson染色观察肺组织形态学变化;免疫组织化学法检测间充质干细胞在肺组织的定位和分布;碱水解法测定羟脯氨酸的水平;免疫印迹法检测TGF-β1、α-SMA的蛋白表达量。结果:两组间充质干细胞移植组第7、14、28天均可见Brdu标记的细胞;3个时间点的MⅠ组、Ⅱ组的肺泡炎症和肺纤维化程度均分别较博来霉素组轻,差异有统计学意义(P<0.05)。肺组织中TGF-β1、α-SMA的表达情况:BLM组>MⅠ组、MⅡ组>Cont组(P<0.05);MⅠ组和Ⅱ组表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:气管内移植HUCBMSCs可以定植于受损的肺组织中,能够减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。
- 郑金旭王阳宋萍蒋婷濮荔端礼荣
- 关键词：气管内人脐血间充质干细胞肺纤维化
- Rho激酶-1在肺纤维化小鼠肺组织中的表达变化与上皮-间充质转化被引量：4
- 2010年
- 目的观察Rho激酶-1(Rock-1)在博莱霉素(BLM)致小鼠肺纤维化中的表达变化,探讨其在肺纤维化中与上皮-间充质细胞转化(EMT)的关系。方法将60只小鼠随机分成正常对照组(Cont组),BLM致肺纤维化模型组,地塞米松(DXM)治疗组。BLM组给予0.04ml BLM(5mg/kg)一次性气管内灌注,治疗组在BLM一次性气管内灌注后每天给予DXM 5mg/kg腹腔注射。各组分别于第3、7、14和28天各处死5只小鼠,取肺组织,做病理切片,HE染色观察小鼠肺炎症和纤维化的程度,以样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,免疫组织化学检测不同实验组小鼠间充质细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和上皮细胞标记物上皮钙黏素(E-Cad)的表达,应用Western blotting法测定不同实验组小鼠rock-1的表达水平。结果 BLM组肺组织病理切片按时间顺序呈现由肺泡炎至纤维化的动态改变,肺组织胶原含量在第7天明显增加,第28天达高峰,HYP含量测定动态增高。与Cont组比较、BLM组、DXM组E-Cad的蛋白表达降低,α-SMA蛋白表达增高。Western blotting结果显示,BLM组Rock-1的表达与正常对照组比较显著增高(P<0.05),第14天时达到高峰。DXM组Rock-1的表达逐步下降。结论 Rock-1在小鼠肺纤维化中表达增高,表明其可能是肺纤维化形成的促进因子,且随着Rock-1的增高,α-SMA逐步增高E-Cad逐步降低,推测Rock-1在肺纤维化形成中的机制可能与促进EMT有关。
- 郑金旭田高润夏德刚卢坤琴吕晓婷
- 关键词：RHO激酶肺纤维化博莱霉素小鼠
- 氨基胍对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制
- 2014年
- 目的探讨氨基胍(AG)对博莱霉素(BLM)诱导SD大鼠肺纤维化中的干预作用。方法将116只SD大鼠随机分成5组:正常对照组、BLM组、AG组、激素组和AG+激素组。经气道给予BLM或生理盐水后,每天给不同组别相应的药物或生理盐水连续28 d。分别在第7,14,21,28天随机处死各组老鼠5只。处死前,取肺泡灌洗液用硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)的表达。用碱水解法测肺组织中羟脯氨酸的含量及用RTPCR检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1 mRNA的相对表达量。结果①与BLM组比较,AG组、激素组和AG+激素组支气管肺泡灌洗液(BALF)中NO的表达在第7,14天下降(P<0.05),肺组织羟脯氨酸含量减少(P<0.05)。②各治疗组肺组织TGF-β1 mRNA的相对表达量和BLM组比较在7,14,21 d明显增加(P<0.05)。结论 AG可以降低BLM诱导的肺纤维化程度,作用机制可能是通过抑制TGF-β1的基因表达。
- 张可可连晓怡郑金旭端礼荣
- 关键词：氨基胍肺纤维化一氧化氮转化生长因子Β1
- Th细胞亚群在肺纤维化小鼠中的动态表达被引量：2
- 2015年
- 目的研究辅助性T细胞亚群(Th17、Th1和Th2)在肺纤维化模型小鼠的动态表达。方法 40只雄性C57/BL6小鼠随机均分为两组,分别经气管一次性注入生理盐水(A组)或博来霉素溶液0.04ml(5mg/kg,B组),于第3、7、14和28天处死。采用HE和Masson染色评价小鼠肺组织病理形态变化;检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;应用流式细胞术分析脾脏中Th1、Th2和Th17细胞的动态变化。结果 A组小鼠肺泡形态正常,肺组织HYP含量无明显变化。B组小鼠第7天时即有部分肺泡结构破坏,肺组织可见大量炎性细胞及红细胞浸润,伴细束状胶原纤维增生;第7、14、28天肺组织HYP含量高于A组(P<0.05);与A组比较,B组4个时间点的Th17和Th2细胞数增加,Th1细胞数减少(P<0.05)。结论 Th17、Th2和Th1细胞与特发性肺纤维化密切相关,可能参与其发病机制。
- 蒋婷郑金旭王阳濮荔连小怡
- 关键词：肺纤维化辅助性T细胞
- IL-33/TLR4信号通路在A549细胞上皮-间质转化中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨IL-33/TLR4信号通路在上皮来源的A549细胞上皮-间质转化中的作用。方法:培养A549细胞,用5 ng/mL的转化生长因子β1(TGF-β1)刺激A549细胞;在不同时间点(0,12,24,48 h)MTT法检测TGF-β1对A549细胞增殖的影响;荧光定量PCR方法检测IL-33信号通路中关键因子IL-33,Toll样受体4(TLR4)基因的表达改变;蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cad)、磷酸化蛋白激酶(p-AKT)的动态表达。结果:TGF-β1刺激A549细胞后,细胞增殖无明显变化(P>0.05),IL-33表达量先升高,后下降(P<0.05);E-钙黏蛋白表达量逐渐下降,α-SMA表达量逐渐升高,TLR4先升高后下降(P<0.05);p-AKT表达量逐渐升高(P<0.05)。结论:IL-33/TLR4信号通路在A549细胞的上皮-间质转化中发挥了重要作用。
- 刘超郑金旭许姣朱勤杜传冲
- 关键词：白细胞介素-33上皮-间充质转化
- β-连环蛋白在肺纤维化小鼠肺组织中的表达被引量：1
- 2012年
- 目的观察β-连环蛋白在肺纤维化模型小鼠肺组织中的表达。方法昆明小鼠40只随机均分成实验组和对照组,气管内分别一次性注入博来霉素5mg/kg(0.04ml)和生理盐水0.04ml。给药后第3、7、14、28天,每组处死小鼠5只,取肺组织做病理切片和HE染色;用碱水解法检测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组化法及Western blot检测肺组织中β-连环蛋白表达。结果实验组肺泡炎和肺纤维化程度均明显高于对照组(P<0.05),羟脯氨酸的含量在第7-28天明显高于对照组(P<0.01)。实验组在各时间点肺组织中的β-连环蛋白表达高于对照组(P<0.05);其表达高峰在第14天。结论β-连环蛋白在模型小鼠肺纤维化发生过程中存在高表达。
- 刘继柱郑金旭许清宋萍钱海许姣
- 关键词：Β-连环蛋白博来霉素肺纤维化羟脯氨酸
- Th17细胞在肺纤维化小鼠中的动态变化及作用机制被引量：1
- 2015年
- 目的:研究Th17细胞在博来霉素致肺纤维化小鼠中的动态变化及作用机制.方法:小鼠随机分为对照组、博来霉素组和全反式维甲酸组.博来霉素组和维甲酸组利用博来霉素建立小鼠肺纤维化模型,维甲酸组在造模第0天每只腹腔注射全反式维甲酸.评价小鼠肺组织病理形态变化;检测肺组织中羟脯氨酸含量和维甲酸相关孤儿受体(RORγt) mRNA的表达;应用流式细胞术分析脾中Th1、Th2、Th17细胞的动态变化.结果:博来霉素组和维甲酸组羟脯氨酸(HYP)含量逐渐升高,博来霉素组第7、14、28天高于对照组和维甲酸组,第28天时达最高;博来霉素组、维甲酸组在4个时间点与对照组比较,Th17、Th2细胞均明显增高,Th1细胞低于对照组,RORγt mRNA表达水平上调.其中维甲酸组Th17、Th2细胞及RORγt mRNA表达水平低于博来霉素组,Th1细胞高于博来霉素组.结论:Th17细胞可能参与特发性肺纤维化的发病机制,并通过调节Th1、Th2细胞分化来发挥作用.
- 郑金旭蒋婷宋萍王阳濮荔连晓怡
- 关键词：肺纤维化TH17细胞TH1细胞TH2细胞小鼠
