转基因生物新品种培育专项(2009ZX08002-008B)
- 作品数：12 被引量：55H指数：5
- 相关作者：闵东红张小红徐兆师马有志李连城更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学中国农业科学院作物科学研究所首都师范大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项西北农林科技大学唐仲英育种基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 提高冬小麦花药愈伤组织诱导效率的研究被引量：5
- 2012年
- 为了进一步提高小麦花药愈伤组织的诱导效率,以12个黄淮麦区冬小麦杂交F1代为供试材料,比较了不同诱导培养基、培养方式和花药接种密度与共培养子房数等因素对花药愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:CHB培养基诱导效果最好,C17次之,而N6和W14效果较差,不同基因型对不同培养基的反应不同,但大多数材料在CHB和C17培养基上反应较好;培养基附加较低浓度的2,4-D(0.5 mg/L)时有利于形成胚状体并在诱导培养基上一步成苗;液体培养时愈伤组织诱导率最高但对愈伤的进一步分化不利,固体和双层培养时的诱导率最低,而半固体培养时不仅有利于愈伤组织诱导而且对其分化较好,是小麦花药培养的较好方式;花药与子房共培养可以显著提高愈伤组织诱导率,花药接种密度较低(2～2.4枚/mL)时较多的子房(20个)可以起到显著的促进作用,花药接种在高密度(6～7.2枚/mL)或中密度时(4～4.8枚/mL)10个或10个以上的子房诱导效果较好。
- 张小红许鹏博薛飞洋闵东红
- 关键词：小麦花药培养愈伤组织诱导
- 转TaEBP基因小麦的回交转育研究被引量：2
- 2012年
- 本研究以转TaEBP基因的新春9号小麦T 4代株系为供体,通过回交育种的方法将与抗逆相关的TaEBP转录因子基因导入黄淮麦区的7个主栽或主推小麦品种中,利用温室快速加代和目的基因PCR分子跟踪检测技术,实现了一年四代的快速繁育,在一年内获得了转基因回交三代株系群。PCR分析结果显示,TaEBP基因在杂交F1代植株中阳性率平均在72.3%以上,在6个轮回亲本的回交后代中基本符合1∶1分离比率,在刑麦六号的BC3F2代中呈3∶1分离,外源TaEBP基因的分布符合一对显性等位基因扩增结果的遗传分离比例;PEG-6000胁迫条件下,对3个来自刑麦6号BC3F2代的回交导入系苗期抗性鉴定显示,3个转基因回交导入系的抗旱性明显提高。表明利用转基因材料通过回交转育、快速加代和分子跟踪检测是快速定向改良小麦品种的性状、获得新的转基因小麦的一条有效途径。
- 闵东红吴平张小红徐兆师陈明李连城马有志
- 关键词：生理抗性
- 快速定向育种技术体系的建立及其在转基因小麦育种中的应用被引量：4
- 2011年
- 以转抗旱相关TaEBP基因新春9号的T4代5个株系为供体材料,黄淮冬麦区金禾9123等10个主栽(推)小麦品种为受体材料进行杂交,结合小麦幼胚培养直接成苗、绿体快速春化、温室快速发育及分子跟踪检测技术建立快速定向育种体系;利用这一体系将抗旱相关TaEBP基因通过回交转育方法导入黄淮冬麦区小麦品种中,获得一批回交3代的转基因小麦新种质,使小麦的生育期缩短至90 d左右,可提高小麦育种速度和效率,实现1年4代快速繁育。
- 朱祥芬闵东红张小红赵洁岚周永斌彭琳何莎陈丹丹
- 关键词：小麦幼胚培养
- TaERFL1基因过表达提高转基因烟草耐盐性
- 2011年
- 将转录因子ERF IV家族基因TaERFL1构建在由组成型CaMV35S强启动子控制的双子叶转化载体pBI121上,通过农杆菌介导法将其转入烟草新华1号。以转TaERFL1基因烟草为材料,研究ERF基因对烟草耐盐性的影响,并测定盐胁迫下转基因烟草的叶绿素含量。结果显示,在高盐胁迫下,TaERFL1基因的过表达促进了转基因烟草根系的发育和植株的生长,提高了转基因烟草的叶绿素含量,提高了转基因植株的耐盐性。
- 郭恒新徐兆师李连城陈明刘丽陈学平马有志
- 关键词：ERF转基因耐盐性烟草
- 小麦成熟胚高频再生基因型筛选及再生体系研究被引量：9
- 2012年
- 以目前生产上主栽或主推的、具有优良农艺性状的18个黄淮麦区冬小麦品种(系)和2个西北春麦区春小麦品种为材料,对它们成熟胚再生能力进行比较,从中筛选出再生频率高的基因型,并探讨不同接种方法、麦草畏质量浓度、细胞分裂素和干燥处理等对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化频率的影响。结果表明,小麦成熟胚愈伤组织诱导率普遍较高,为66.7%～100.0%,而分化率普遍较低,为3.6%～35.8%。基因型间差异显著,其中愈伤组织分化率较高的基因型有泛麦8号、周麦27和邢麦6号,绿苗分化率超过30%;采用胚十字形切割法接种小麦成熟胚愈伤组织分化率较高,达到54.5%～73.3%;诱导培养基中麦草畏的诱导效果显著优于2,4-D。在麦草畏质量浓度为2～4mg/L时有利于愈伤组织诱导和分化;成熟胚愈伤组织转入不含激素或含有2mg/L 6-BA或KT的分化培养基中时,分化率分别达到38.5%,45.8%和37.0%,较其他细胞分裂素和质量浓度处理分化率高,而愈伤组织分化前干燥处理6h和未干燥处理的差异不显著,干燥12h分化率明显降低。
- 彭琳张小红闵东红赵雪晶许鹏博薛飞洋陈阳周永斌
- 关键词：小麦成熟胚愈伤组织诱导分化
- 不同水分胁迫下转TaEBP基因小麦株系拔节期抗旱性研究被引量：14
- 2011年
- 以两个转TaEBP基因小麦株系及相应受体对照品种为材料,采用盆栽控水法研究了水分胁迫对转基因小麦拔节期抗旱相关生理生化指标的影响,并结合隶属函数法对转基因株系的抗旱性进行了综合评价。结果显示:随着水分胁迫加剧,各参试品种(系)的相对含水量、叶绿素含量、光合速率、气孔导度呈下降趋势,转基因小麦下降幅度较小;胞间CO2、丙二醛含量、质膜相对透性呈上升趋势,受体对照品种上升幅度更大;转基因小麦的脯氨酸含量显著高于对照品种。应用隶属函数法综合评价结果表明,转TaEBP基因小麦株系G221、G258比其受体对照具有较高的抗旱能力。
- 南炳东陈耀锋闵东红张小红赵洁岚薛飞洋
- 关键词：水分胁迫转基因小麦生理生化指标抗旱性
- 小麦转录因子TaDREB6基因启动子的克隆及活性分析被引量：3
- 2011年
- 启动子的分析有助于解析植物抵御不良环境的机制。植物DREB转录因子参与对干旱、低温和高盐等胁迫的响应,在抗逆中起着重要作用。本研究利用反向PCR方法从小麦中克隆获得DREB转录因子TaDREB6基因启动子,长度为1 705 bp。PLACE和PlantCARE分析发现,TaDREB6基因启动子包含多种胁迫相关元件。构建由TaDREB6基因启动子驱动的GUS植物表达载体,转化小麦成熟胚愈伤组织,组织化学染色结果表明,TaDREB6基因启动子是诱导型启动子,受干旱、低温、盐、脱落酸和水杨酸等胁迫诱导。Real-time PCR显示,TaDREB6基因受多种胁迫诱导表达,与TaDREB6启动子活性分析结果一致,这些结果为进一步分析DREB转录因子的功能提供了依据。
- 李凤艳徐兆师李雅轩晏月明李连城陈明马有志
- 关键词：小麦反向PCR
- 小麦TaDREB6转录因子互作蛋白的筛选被引量：3
- 2011年
- 【目的】利用酵母双杂交技术从小麦cDNA文库中筛选TaDREB6互作蛋白,进一步研究DREB介导的小麦抗逆机制。【方法】以小麦的cDNA为模板扩增得到TaDREB6,构建小麦cDNA文库和pGBKT7-TaDREB6诱饵载体,将诱饵载体pGBKT7-TaDREB6以及pGADT7和cDNA文库混匀转入AH109酵母感受态细胞,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp营养缺陷型培养基上,30℃培养3—5 d,挑取平板上直径大于2 mm的菌落,进行显蓝筛选。【结果】对筛选到的102个候选阳性克隆进行测序,在NCBI上进行BLAST比对分析,获得与能量代谢、抗逆和防御、转运、转录和翻译、信号转导以及生长发育等相关的候选蛋白。【结论】筛选得到候选蛋白的功能预测表明TaDREB6可能参与了多条信号转导途径,在抗逆境调控中具有重要作用。
- 孙海桃徐兆师侯建华于卓赵月李连城陈明马有志
- 关键词：普通小麦酵母双杂交DREB抗逆机制
- 小麦成熟胚离体培养及植株再生技术优化被引量：8
- 2013年
- 本实验利用冬小麦品种周麦27成熟胚进行了愈伤组织诱导和植株再生技术的优化,以提高小麦成熟胚离体再生频率,为以成熟胚进行遗传转化奠定基础。探讨了外植体不同接种方法、Dicamba浓度和细胞分裂素种类、转分化时间和愈伤组织干燥处理等因素对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,1)小麦成熟胚十字形切割法接种愈伤组织分化率较高,达到66.7%,分别是刮胚法和整胚接种的2.1和4.3倍;2)附加2,4-D和Dicam-ba均可以高频率诱导成熟胚愈伤组织的形成,但Dicamba诱导形成的愈伤组织分化率高于2,4-D的达4倍之多,在Dicamba浓度为2.0～4.0mg/L时愈伤组织诱导和分化效果较好;3)愈伤组织在附加2.0mg/L 6-BA的分化培养基上分化率最高为45.8%,其次为在不含激素或含KT 2.0mg/L时分化率分别达到38.5%和37.0%,而在附加TDZ和ZT时分化率较低;4)成熟胚外植体在诱导培养2～3周后进行分化培养,绿苗分化率最高;5)愈伤组织分化前干燥处理6h愈伤组织分化率略有提高,但与未干燥处理的相比差异不显著,而干燥12h后分化率却明显降低。
- 张小红赵雪晶李波黎飞飞闵东红
- 关键词：小麦成熟胚愈伤组织诱导
- W16转济麦19小麦株系抽穗期抗旱性研究被引量：4
- 2012年
- 以两个转W16基因小麦株系及相应的受体对照品种为材料,在大田控水的条件下研究了水分胁迫对转基因小麦抽穗期相关生理特性的影响,利用方差分析方法对转基因株系的抗旱性进行了综合评价。结果表明:转基因株系和对照及受体有着较大的差异,随着水分胁迫的加剧,参试品种的相对含水量、气孔导度、光合速率、叶绿素含量呈下降趋势,转基因小麦的下降幅度较小;丙二醛含量、胞间CO2浓度、质膜相对透性呈上升趋势。受体对照品种的上升幅度大于转基因小麦;转基因小麦的脯氨酸含量显著高于对照品种。方差分析表明,转基因小麦株系G19-X51、G19-X61具有较好的抗旱性。
- 王刚刘曙东闽东红王竹林杨兴圣李华徐兆师陈明李连城马有志
- 关键词：小麦水分胁迫抗旱性
