科技部科研院所社会公益研究专项(2004DIB45147)
- 作品数：3 被引量：114H指数：3
- 相关作者：陈善春彭爱红吴鑫何永睿雷天刚更多>>
- 相关机构：国家柑桔品种改良中心中国农业科学院柑桔研究所西南大学更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划科技部科研院所社会公益研究专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 柑橘栽培品种(系)DNA指纹图谱库的构建被引量：64
- 2009年
- 【目的】构建柑橘栽培品种(系)的DNA指纹图谱数据库,为建立柑橘种苗纯度及真实性鉴定技术体系和技术规范奠定基础。【方法】利用SSR标记和ISSR标记对102个柑橘栽培品种(系)进行DNA指纹分析,筛选适合的特征引物,构建柑橘栽培品种(系)的指纹图谱数据库。【结果】从200对SSR引物中筛选到重复性好、多态性丰富的12对引物作为柑橘品种(系)鉴定的特征引物,12对SSR特征引物组合可鉴别42个品种(系);在此基础上,对未出现SSR特征指纹的60个品种(系)进行ISSR指纹分析,从40个ISSR引物中筛选到2个可用于品种鉴定的特征引物,结合SSR标记,可快速、准确地鉴别70个柑橘的品种(系)。并利用这12对SSR特征引物和2个ISSR特征引物构建了70个柑橘栽培品种(系)的DNA特征指纹图谱数据库。【结论】SSR和ISSR标记适于构建柑橘栽培品种DNA指纹图谱库;指纹图谱库的建立为柑橘种苗纯度及真实性鉴定奠定了基础。
- 雷天刚何永睿吴鑫姚利晓彭爱红许兰珍刘小丰陈善春
- 关键词：柑橘SSRISSR
- 柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系的建立与优化被引量：42
- 2008年
- 通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化,建立了柑桔SRAP-PCR和ISSR-PCR体系;以此进行大规模引物筛选,从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.2mmol/L,dNTP120μmol/L,Taq酶1.5U,引物0.4μmol/L,反应程序为94℃预变性5min,35个循环(94℃30s,47℃1min,72℃1min),72℃延伸10min;ISSR-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.6mmol/L,dNTP200μmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L。筛选出稳定性好、多态性高的24对SRAP引物和13条ISSR引物。
- 吴鑫雷天刚何永睿刘小丰许兰珍彭爱红陈善春
- 关键词：柑桔SRAPISSR
- 利用SSR标记鉴定柚和杂柑品种被引量：16
- 2007年
- 采用SSR技术,从105对柑桔SSR引物中,筛选出10对在柑桔大类品种间多态性位点丰富、带型清晰、重复性好的SSR引物。利用其中5对SSR引物对5个柚和7个杂柑品种DNA进行PCR分析,共扩增出35条谱带,其中27条谱带呈现多态性,引物多态性带纹比例均在60%以上。扩增片断的大小集中在100bp～500bp之间。分别针对柚和杂柑品种筛选出两个高效的引物组合(SSR17、SSR15、SSR16、SSR12与SSR17、SSR18、SSR16),利用这两组引物成功构建出了我国主推的5个柚和7个杂柑品种的特征指纹图谱。并应用指纹图谱自动识别软件Gel2.0对各品种指纹图谱进行识别,建立了相应品种的指纹模式图谱库。
- 雷天刚何永睿吴鑫刘小丰许兰珍彭爱红陈善春
- 关键词：杂柑SSR指纹图谱
