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异烟肼敏感与耐药结核杆菌临床分离株培养滤液蛋白比较分析被引量：1: 2014年; 目的：寻找异烟肼耐药结核杆菌特异性分泌蛋白。方法应用弱阳离子交换蛋白质芯片（ WCX2）捕获并应用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱（ SELDI-TOF-MS）技术对1株异烟肼单耐药结核杆菌和1株异烟肼敏感结核杆菌临床分离株7天及14天Middlebrook 7H9培养滤液蛋白进行比较，描述性分析其差异。结果在异烟肼敏感和异烟肼单耐药结核杆菌株7天及14天Middlebrook 7H9培养滤液中分别检测到164、175、133、147种蛋白质/多肽，其相对分子量（依质荷比m/z而得）范围分别为982～9328、997～9327、1050～8903、996～9369，表达丰度（通过质谱峰面积计算）分别为17～2100、21～1943、60～5355、41～3267；异烟肼单耐药结核杆菌株与异烟肼敏感结核杆菌株相比较，7和14天培养滤液分别存在47与58种差异蛋白质/多肽，这些差异蛋白质相对分子量在1083～8812、1012～9327之间，表达丰度在76～1811、25～3010之间。结论异烟肼敏感结核杆菌和耐药结核杆菌液体培养早中期滤液蛋白质存在差异，但是否为异烟肼耐药结核杆菌特异性分泌蛋白则有待进一步证实。; 曹翌明孟繁荣谢贝蔡杏珊黄业伦牛群雷杰高俊文谭耀驹刘志辉; 关键词：结核杆菌异烟肼

结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌培养滤液、胸腔积液和血清蛋白质组分析被引量：15: 2014年; 目的:寻找结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物,以开发新型结核性胸膜炎实验诊断方法。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测5例结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌分离株Middlebrook 7H9液体培养早中期(7 d与14 d)培养滤液及其血清、胸腔积液蛋白质组,并进行描述性比较分析,寻找其共有蛋白质组分。结果:培养滤液蛋白质组蛋白质种类数量远多于胸腔积液和血清蛋白质组,4例患者胸腔积液蛋白质组蛋白质种类数量多于血清蛋白质组;5例患者3类样本蛋白质组中,存在种类数量各不相同的培养滤液-胸腔积液、培养滤液-血清、血清-胸腔积液和培养滤液-胸腔积液-血清共有蛋白质,但在所有患者培养滤液、胸腔积液、血清中均存在相对分子质量为2 660的蛋白质。结论:相对分子质量为2 660的蛋白质具备结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物的表征,但尚需进一步大样本量研究予以证实。; 刘志辉彭德虎孟繁荣谢贝牛群雷杰高俊文张言斌谭守勇; 关键词：结核分枝杆菌蛋白质组表面增强激光解析电离飞行时间质谱

一线抗结核药物不同耐药表型的利福平耐药结核杆菌rpoB基因突变分析被引量：4: 2014年; 目的了解rpoB基因突变与对一线抗结核药物(异烟肼—H、链霉素—S、乙胺丁醇—E)不同耐药表型利福平耐药结核杆菌株间的相关性。方法在Pubmed数据库搜索我国结核杆菌rpoB基因突变研究的相关文献进行循证分析。结果在符合纳入标准的6项研究中,包括50株耐R、78株耐HR、15株耐RS、16株耐RE、58株耐HRS、14株耐HRE、8株耐RSE和77株耐HRSE等表型的316株利福平耐药结核杆菌的rpoB基因利福平耐药决定区(Rifampin Resistance-Determining Region,RRDR)序列得以分析,对于不同表型菌株,其主要突变均发生在526和531位点(总发生频率分别为24.68%和51.27%)。按耐R、耐HR、耐RS、耐RE、耐HRS、耐HRE、耐SRE和耐HRSE表型菌株顺序,526位点与531位点发生突变的频率分别为24.00%、39.74%、13.33%、31.25%、17.24%、42.86%、0、15.58%和50.00%、38.46%、46.67%、50.00%、48.28%、35.71%、87.50、67.52%;未见突变的发生频率则相应为20.00%、8.97%、13.33%、12.50%、8.62%、0、0、1.30%,总计为8.54%。结论利福平耐药结核杆菌对其它一线抗结核药物耐药的不同表型与rpoB基因突变位点不表现直接相关,但也提示随着耐药种类的增多其rpoB基因不发生突变的频率逐渐降低。; 卓文基刘志辉钱明陈涛王树智周琳钟球; 关键词：RPOB基因结核杆菌利福平基因突变

结核分枝杆菌和4种缓慢生长非结核分枝杆菌早期培养滤液蛋白分析: 2014年; 目的了解结核分枝杆菌、鸟-胞内分枝杆菌复合群、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌液体培养早期的蛋白质代谢与分泌活动,以进一步加深对它们致病性的理解,并初步分析由此途径寻找准确、快速鉴定这些菌种的新型标志物的可能性.方法采用Middlebrook 7H9液体培养基对目的细菌临床分离株进行培养,应用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术对7天培养滤液和Middlebrook 7H9液体培养基蛋白质组进行检测,描述性分析其蛋白质组.结果在Middlebrook 7H9液体培养基与结核分枝杆菌、鸟-胞内分枝杆菌复合群、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌7天培养滤液中分别检测到106、164、118、124、109、210种蛋白质/多肽,依据质荷比（m/z）其相对分子量范围分别为1045～3938、982 ～ 9329、1035～4579、1052 ～ 9109、1035 ～ 3940、998 ～ 9329,其表达丰度分别为86 ～ 7838、7～ 210、63 ～ 5730、58 ～ 5559、74～6866、6～190;与Middlebrook 7H9液体培养基蛋白相比,结核分枝杆菌、鸟-胞内分枝杆菌复合群、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌7天培养滤液中分别存在157、106、114、99、205种差异蛋白质.结论结核分枝杆菌、鸟-胞内分枝杆菌复合群、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌在繁殖生长早期即存在活跃的蛋白质代谢与分泌活动,而且此5种不同分枝杆菌早期培养滤液中蛋白质种类与表达丰度差异明显.; 曹翌明孟繁荣谢贝蔡杏珊黄业伦牛群雷杰高俊文谭耀驹; 关键词：结核分枝杆菌分枝杆菌

结核杆菌临床分离菌早期培养滤液蛋白质组的比较被引量：1: 2013年; 目的：初步了解结核杆菌体外液培养条件下的早期蛋白质代谢和分泌活动状况。方法：将2株对抗结核一线药物敏感的结核杆菌临床分离茵接种Middlebrook7H9液体培养基进行培养，并于培养第7天用0．22μm滤纸过滤培养液制备早期培养滤液，应用与弱阳离子交换蛋白质芯片（WCX2）捕获滤液蛋白行表面增强激光解吸一电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-Ms）检测，描述性分析比较其蛋白质组。结果：在2株结核杆菌7d培养滤液中分别检测到相对分子质量为982～9329与941。9331、丰度为7～210与11-368（通过质谱峰面积计算相对强度值表示）的164与194种蛋白质；与Middlebrook7H9液体培养基本身蛋白质组比较，在2株结核杆菌7d培养滤液中分别有153和183种蛋白质新产生（其中10种在2份滤液中均有存在）、92和90种蛋白质消失、10和13种蛋白质丰度变小。结论：在体外液体培养条件下，结核杆菌蛋白质代谢和分泌活动活跃。且不同菌株间有较大差异。; 黄业伦孟繁荣谢贝曹翌明牛群雷杰谭守勇张言斌吴玲邓晓华刘志辉; 关键词：结核杆菌

我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区序列循证分析被引量：12: 2013年; 目的:了解我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistancedetermining region,RRDR)序列的多态性特征。方法:采用"rpoB AND Mycobacterium tuberculosis AND(China OR Hong Kong OR Macon OR Taiwan)"检索策略在Pubmed数据库中检索文献,循证分析Pubmed数据库中截止至2013年4月30日有关我国结核杆菌rpoB基因突变分子特征的研究文献。结果:36篇文献纳入研究,5 136株利福平敏感结核杆菌rpoB基因RRDR序列信息得以分析,38株(0.74%)rpoB基因RRDR序列呈现基因突变,涉及8个位点,分别为511(11株)、533(7株)、531(6株)、526(5株)、516(4株)、518(2株)、519(2株)、521(2株)等,其中1株涉及511/526双位点。结论:我国结核杆菌rpoB基因RRDR序列存在沉默突变现象,并非所有RRDR序列改变均与结核杆菌利福平药物敏感性有关。; 孟繁荣刘志辉谢贝张言斌谭守勇; 关键词：分枝杆菌结核利福平 RPOB基因

结核分枝杆菌和4种缓慢生长非结核分枝杆菌早期培养滤液蛋白分析: 目的了解结核分枝杆菌、鸟-胞内分枝杆菌复合群、堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌液体培养早期的蛋白质代谢与分泌活动,以进一步加深对它们致病性的理解,并初步分析由此途径寻找准确、快速鉴定这些菌种的新型标志物的可能性...; 曹翌明孟繁荣谢贝蔡杏珊黄业伦牛群雷杰高俊文谭耀驹刘志辉; 关键词：结核分枝杆菌; 文献传递

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广东省科技计划工业攻关项目(2011B31800377)

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