国家高技术研究发展计划(2006AA10A113)
- 作品数：25 被引量：169H指数：8
- 相关作者：刘胜毅黄军艳董彩华陈锦清官春云更多>>
- 相关机构：中国农业科学院油料作物研究所湖南农业大学浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学哲学宗教更多>>
- 白菜型油菜BrDAD1基因的克隆及其植物反义载体的构建被引量：1
- 2010年
- 应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了白菜型油菜BrDAD1基因及自身的启动子基因Pro-DAD1,并将其分别克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因及启动子全序列。结果表明,该基因及启动子全长分别为1 270 bp与1 335 bp。将白菜型油菜BrDAD1基因反向克隆到植物表达载体pCambia 1300的自身启动子基因Pro-DAD1启动子下游,构建了该基因的植物反义表达载体pCamDAD1。
- 吴晓梅朴学成陈明训王中
- 关键词：油菜启动子反义表达载体
- 优化反向PCR法分离转基因油菜外源T-DNA侧翼序列的研究(英文)被引量：2
- 2010年
- [目的]优化反向PCR(IPCR)条件分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。[方法]以单拷贝的转基因油菜FS4为研究材料,用SDS法和改良CTAB法(包括低温操作、增加酚氯仿的抽提次数以及延长低温沉淀时间等)提取转基因油菜总DNA,并进行酶切、纯化、自连接,再使用普通聚合酶与热启动高保真的ExTaqHS聚合酶进行两轮巢式PCR扩增,进行序列对比。油菜数据库比对搜索采用BBSRCBrassicaDB上WU-BLAST2.0工具,拟南芥数据库比对分析采用TAIR数据库中WU-BLAST2.0工具。为验证FS4转基因中T-DNA插入位点的真实性,根据序列比对分析结果在T-DNA插入位点的左右两端分别设计引物FS4-L与FS4-R。分别采用3对引物pS2/FS4-L、pA2/FS4-R、FS4-L/FS4-R同时对T1代转基因FS4杂合体和非转基因对照植株的基因组进行PCR验证。[结果]两轮巢式PCR扩增得到1个大小为4.0kb的片段,其序列与油菜数据库中BH652424和BZ044084两序列同源性分别高达97.8%和63.4%。根据序列比对结果设计特异引物对进行PCR验证的结果,也证明了FS4转基因油菜中T-DNA的确插入在该位点。[结论]优化后的IPCR条件能成功分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。
- 杨坤吴学龙朗春秀陈锦清
- 关键词：反向PCR侧翼序列改良CTAB法转基因油菜
- 甘蓝型油菜Bn19070的表达与同源基因At2g19070的amiRNAi研究被引量：6
- 2011年
- 基于原芯片杂交结果,油菜杂合双显性雄性核不育系差异表达基因Bn19070与拟南芥At2g19070基因高度同源,在油菜可育株雄蕊中高量表达,不育株雄蕊中表达量极低。从雄性不育基因At2g19070入手,利用amiR-NAi(人工微RNA干扰)技术对其两个RNA区段分别设计靶标,转化拟南芥。在多个转基因拟南芥植株和后代中普遍观察到小孢子数量减少、成熟花粉萎缩失去活力、不结实或者少结实的不育表型。两个靶标的干扰使转基因拟南芥出现了类似的表型,基因表达抑制率都在90%以上,干扰效果好,暗示amiRNAi技术在靶标选择上具有一定的灵活性。At2g19070基因的干扰对Bn19070的功能研究有借鉴作用。
- 李振波王琢玉刘学群覃瑞黄军艳董彩华刘胜毅
- 关键词：雄性不育拟南芥
- 甘蓝型油菜温敏核不育材料104S的发现及遗传特性分析被引量：6
- 2009年
- 104S是一个从自交系99104植株群体中发现的油菜新型温敏核不育材料.育性调查表明,104S的育性变化与现有已育成的温敏核不育系湘油402S具有相似的规律性,但其花器形态与后者有所不同,为一种较大花瓣的温敏核不育材料.遗传分析结果表明,104S的育性受1对隐性不育基因和1对主效及若干微效温敏基因共同控制.104S的不育基因与湘油402S中的不育基因为非等位基因,而且两者的温敏基因只对其相对应的不育基因起调控作用,而对其他不育基因不起作用.
- 邬贤梦肖钢官春云
- 关键词：甘蓝型油菜温敏核不育花器形态
- 利用基因芯片技术研究甘蓝型油菜油酸合成中差异表达基因被引量：7
- 2010年
- 采用基因芯片技术对甘蓝型油菜高油酸(71.71%)和低油酸(55.6%)材料进行分析,探索油酸的差异表达基因。结果检测到差异表达基因562个,其中上调表达基因194个,下调表达基因368个。以基因芯片中油菜上调基因NM_100489和下调基因NM_130183为材料,用实时荧光定量方法验证基因芯片的结果,二者完全相符。根据基因芯片的实验结果,采用Go注释系统和数据库查询对562个差异表达基因进行功能注释表明,主要为各种酶类、结合功能、转录调控、代谢等,还有的功能未知或与糖代谢及脂肪酸合成相关,其中丙酮酸激酶、果糖二磷酸、酰基传递/酰基ACP硫脂酶、作用于酯键的水解酶、Δ9硬脂酰-乙酰载体蛋白去饱和酶(ADS1)、Δ9酰基-油脂减饱和酶2(ADS2)、ω-3脂肪酸减饱和酶(fad3)等被鉴定为差异表达基因。
- 官梅李栒官春云
- 关键词：基因芯片油菜油酸差异表达基因
- 油菜抗菌肽基因的生物信息学分析
- 本研究利用生物信息学方法对油菜ESTs(expressed sequence tags,ESTs)数据库中596,361条EST序列进行了分析。经过对EST序列的预处理、拼接和对抗菌肽数据库比对,我们已经初步鉴定了油菜中...
- 柯涛毛晗董彩华郭学兰黄思良刘胜毅
- 关键词：油菜抗菌肽生物信息学
- 文献传递
- 油菜(Brassica napus)油酸性状的遗传规律研究被引量：6
- 2009年
- 以高油酸油菜品系04—863（油酸含量80．5％）与低油酸油菜品系湘油15号自交系04-1020（油酸含量62．7％）为材料，通过杂交获E、R代和回交一代，研究了油菜油酸性状的遗传规律．结果表明：1）油菜油酸性状属数量性状．呈连续变异．很难明确分组；2）杂种一代表现为两亲本的中间类型，但受母本的影响较大，当以高油酸品系04—863为母本时，E代的油酸含量（X^-=73．41）分布倾向高油酸亲本，相反，若以低油酸湘油15号自交系04—1020为母本，E代油酸含量（X=67．75）分布则倾向低油酸亲本；3）对环境条件变化比较敏感，亲代（P1、P2）或一代都存在着由于环境条件差异而引起的表型差异．F2代广泛分离既有基因型分离的差异，又有环境引起的表型差异．度量这种差异分别以方差和标准差来表示离开平均数的变异程度，在各世代中以F2的方差和标准差最大．分别为V=52．81，S=7-28；4）各代变异的次数分布大体上符合正态分布，即极端类型个体少，中间类型多：5）支配油菜油酸性状的基因数为一对主基因符合孟德尔的3：1分离规律，其回交比例为1：1，油酸性状的遗传力为69％～71％，是由于遗传差异引起的，另31％～29％则是由于环境差异引起的．说明数量性状与质量性状的区分是相对的．
- 官梅李栒
- 关键词：油酸
- 甘蓝型油菜BnERF50的超表达增强了转基因拟南芥对核盘菌的抗性被引量：2
- 2011年
- 从接种核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)后的甘蓝型油菜品种中双9号cDNA芯片中筛选出一个新的抗性相关基因BnERF50。序列分析表明该基因产物BnERF50蛋白含有一个典型的ERF(乙烯相应转录因子)保守结构域,属于ERF家族成员。接种核盘菌24h后,该基因的表达量被诱导显著上调。在它的超表达转基因拟南芥中,病原相关蛋白(PR)防御素基因PDF1.2和几丁质酶基因ChiB的表达量升高,对腐生营养型真菌核盘菌的抗性显著增强。
- 汪承刚李丹许李明董彩华黄军艳方菊萍刘胜毅
- 关键词：核盘菌
- 油菜抗菌肽基因的生物信息学分析
- 究利用生物信息学方法对油菜ESTs(expressed sequence tags,ESTs)数据库中596,361条EST序列进行了分析.经过对EST序列的预处理、拼接和对抗菌肽数据库比对,我们已经初步鉴定了油菜中近1...
- 柯涛毛晗董彩华郭学兰黄思良刘胜毅
- 关键词：油菜抗菌肽生物信息学
- 特殊脂肪酸生物合成的基因工程研究进展
- 2007年
- 脂肪酸是生物体的重要组成成分,对维持生物体的正常生命活动具有重要功能。在一些动植物或微生物中存在一些特殊脂肪酸,主要包括以下两类:一是通常在鱼油和海底微生物中发现的长链多不饱和脂肪酸,在医药保健业有重要应用价值;二是通常包含有羟基、环氧基或炔键等功能基团的脂肪酸,为重要的工业原料。本文综述了近年来几种特殊脂肪酸生物合成的基因工程研究进展。
- 陈亮宋丽英徐香玲李集临胡赞民
- 关键词：长链多不饱和脂肪酸
