国家自然科学基金(81070511) 作品数:16 被引量:81 H指数:5 相关作者: 孙丽洲 邹艳芬 姜子燕 范明松 周雪 更多>> 相关机构: 江苏省人民医院 南京医科大学 菏泽市立医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 上海市教育委员会重点学科基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 环境科学与工程 更多>>
miR-101通过调控内质网蛋白44调节子痫前期内质网应激诱导的滋养细胞凋亡 被引量:7 2014年 目的:探讨人类子痫前期(PE)中miR-101介导的内质网蛋白44(ERp44)对滋养细胞凋亡和内质网应激过程的调控。方法:采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测25例PE和25例正常孕妇胎盘组织中miR-101的表达水平,分析ERp44与miR-101表达的相关性。分别过表达和封闭miR-101表达后,采用Western blot法检测ERp44的表达,采用流式细胞技术检测滋养细胞的凋亡数量改变,采用Western blot法检测内质网应激相关的凋亡蛋白的表达情况。结果:(1)PE胎盘中miR-101表达下调,低于正常妊娠组的25%(P<0.05);miR-101表达与ERp44呈显著负相关(Pearson相关系数=-0.826,P<0.01);(2)滋养细胞HTR-8/SVneo中过表达miR-101后,ERp44表达下调约50%(P<0.01);封闭miR-101表达后,ERp44表达升高2.39倍(P<0.01);(3)过表达miR-101,细胞凋亡数量减少,同时通过靶向结合ERp44而抑制内质网应激诱导的凋亡蛋白反应;封闭miR-101表达,细胞凋亡数量增加,内质网应激诱导的凋亡蛋白反应增加。结论:PE中miR-101通过靶向调节ERp44参与内质网应激诱导的滋养细胞凋亡过程。 邹艳芬 姜子燕 左青 孙丽洲关键词:子痫前期 凋亡 子痫前期内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153的表达及其意义 被引量:1 2011年 目的:研究内质网应激相关蛋白CHOP/GADD153在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义。方法:选择2009年6月~2010年6月在南京医科大学第一附属医院产科住院分娩的子痫前期患者30例(子痫前期组),以同期正常孕妇35例为对照组。采用RT-PCR技术、蛋白印迹(western-blot)法和免疫组化检测两组孕妇胎盘组织中CHOP/GADD153的mRNA与蛋白表达水平差异。结果:子痫前期组患者胎盘组织中CHOP/GADD153的mRNA与蛋白表达水平均显著高于相应孕周正常妊娠组。结论:CHOP/GADD153表达的增高与子痫前期的发病相关。 马孝甜 葛志平 孙丽洲关键词:子痫前期 内质网应激 凋亡 内皮蛋白C受体在重度子痫前期孕妇胎盘组织和血浆中表达及意义 被引量:5 2020年 目的探讨重度子痫前期孕妇血浆及胎盘组织中内皮蛋白C受体(endothelial protein C receptor, EPCR)表达变化及临床意义。方法重度子痫前期孕妇78例,其中40例早发型为早发型组,38例晚发型为晚发型组;同孕周接受产检的健康孕妇40例为对照组。采用ELISA法检测3组血浆游离EPCR水平;取3组孕妇分娩胎盘组织,采用免疫组织化学SP法检测结合型EPCR蛋白阳性表达率,实时荧光定量PCR法检测结合型EPCR mRNA相对表达量。结果早发型组胎盘组织结合型EPCR蛋白阳性表达率(57.50%)、结合型EPCR mRNA相对表达量(0.39±0.10)低于晚发型组(92.11%、0.90±0.08)和对照组(97.50%、0.93±0.07)(P<0.05),晚发型组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。早发型组血浆游离EPCR水平[(230.56±10.68)μg/L]高于晚发型组[(125.48±7.62)μg/L]和对照组[(122.25±5.65)μg/L],晚发型组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论晚发型重度子痫前期患者胎盘组织及血浆EPCR无明显变化,早发型重度子痫前期患者胎盘组织结合型EPCR表达减少、血浆游离型EPCR水平升高,可能与其发病有关。 马田君 赵秀真 房振亚关键词:重度子痫前期 内皮蛋白C受体 胎盘组织 宫颈癌组织及血清血管内皮生长因子C表达及其与淋巴转移的相关性分析 被引量:9 2016年 目的探讨血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在宫颈癌组织和血清中的表达水平,及其与淋巴转移的相关性。方法宫颈癌患者28例为宫颈癌组,其中有淋巴结转移20例,无淋巴结转移8例;颈上皮内瘤变Ⅲ(cervical intraepithelial neoplasiaⅢ,CINⅢ)期患者18例为CINⅢ组;因子宫肌瘤切除子宫患者28例为正常宫颈组。采用ELISA法检测各组血清VEGF-C、VEGF受体-3(VEGF receptor-3,VEGFR-3)水平;免疫组织化学SP法测定组织中VEGF-C、淋巴管内皮透明质酸受体-1(lymphatic endothelial hyaluronic acid receptor-1,LYVE-1)表达情况及微血管密度(microvessel density,MVD)、淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD);Western blot法检测组织中VEGFR-3、LYVE-1蛋白表达情况。结果宫颈癌组血清VEGF-C[(62.19±16.67)ng/L]、VEGFR-3[(6.03±1.00)ng/L]高于正常宫颈组[(30.23±8.97)、(1.12±0.47)ng/L)和CINⅢ组[(33.76±9.41)、(1.81±0.33)ng/L](P<0.05),有淋巴结转移者VEGF-C[(76.54±15.62)ng/L]、VEGFR-3[(8.11±1.68)ng/L]高于无淋巴结转移者[(45.88±12.79)、(4.43±1.05)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组组织中MVD(14.68±2.56)、LVD(13.09±3.01)及VEGF-C、LYVE-1蛋白阳性表达率(67.86%、75.00%)高于正常宫颈组(6.04±1.15、9.58±1.47、28.57%、32.14%)和CINⅢ组(7.15±1.08、10.01±1.34、33.33%、55.56%)(P<0.05),有淋巴结转移者组织中MVD(17.67±2.11)、LVD(15.32±2.07)及VEGF-C、LYVE-1蛋白阳性表达率(87.50%、100.00%)高于无淋巴结转移者(10.83±1.59、11.12±1.98、60.00%、65.00%)(P<0.05);宫颈癌组组织中VEGFR-3(0.732±0.104)、LYVE-1蛋白表达(0.653±0.089)高于正常宫颈组(0.112±0.001、0.395±0.013)和CINⅢ组(0.467±0.045、0.505±0.033)(P<0.01),有淋巴结转移者VEGFR-3、LYVE-1蛋白表达(0.885±0.071、0.756±0.065)高于无淋巴结转移者(0.675±0.064、0.598±0.053)(P<0.05)。结论 VEGF-C在宫颈癌组织及血清中均存在表达升高,与淋巴结转移及淋巴管生成相关,可� 栗美荣 孙丽洲关键词:宫颈癌 血管内皮生长因子C 淋巴转移 表皮生长因子对人滋养细胞中基质金属蛋白酶9表达的影响及其调控机制的研究 被引量:2 2011年 目的探讨表皮生长因子(EGF)对人滋养细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其调控MMP-9的机制。方法(1)在JEG-3滋养细胞中分别加入不同浓度的EGF(0、1、10、20ng/ml),培养24h后收集细胞待测。(2)JEG-3滋养细胞中加入含10ng/ml的EGF,分别培养0、4、12、24h后收集细胞待测。(3)根据JEG-3滋养细胞中所加成分不同分组,即无EGF组、EGF刺激组、EGF+抑制剂干预[分别加入p38丝裂原活化激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580(EGF+SB203580组)或细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)特异性抑制剂U0126(EGF+U0126组)]、抑制剂干预(分为SB203580干预组和U0126干预组)。于1%的血清DMEM培养基中培养24h,收集各组细胞待测。逆转录(RT)PCR技术检测JEG-3滋养细胞中MMP-9 mRNA的表达,蛋白印迹法检测JEG-3滋养细胞中MMP-9、NF—κB、p38MAPK、p—p38MAPK、ERK及p-ERK蛋白表达。结果(1)JEG-3滋养细胞中MMP-9mRNA的表达:经不同浓度EGF处理后,JEC-3滋养细胞中MMP-9mRNA表达水平随着EGF浓度的升高而增加,其中1、10、20ng/ml浓度EGF处理的细胞中MMP-9mRNA表达水平(分别为0.567±0.056、1.392±0.133、1.971±0.067)与0ng/ml(0.166±0.015)分别比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。经10ng/mlEGF处理细胞不同时间后,细胞中MMP-9mRNA表达水平随着培养时间的延长而增加,其中培养4、12、24h的细胞中MMP-9mRNA表达水平(分别为0.470±0.026、1.061±0.115、1.453±0.180)与0h(0.253±0.044)分别比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。(2)JEG一3滋养细胞中MMP-9蛋白的表达:经不同浓度EGF处理后,JEG-3滋养细胞中MMP-9蛋白表达水平随着EGF浓度的升高而增加,其中1、10、20ng/ml浓度EGF处理的细胞中MMP-9蛋白表达水平(分别为0.043±0.012、0.085±0.008、0.142±0.015)与0ng/ml(0.004±0.001� 任怀彬 姜子燕 孙丽洲 范明松 邹艳芬关键词:滋养层 基质金属蛋白酶9 表皮生长因子 P38丝裂原活化蛋白激酶类 先兆子痫 不同来源的脱氧核糖核酸酶在基因表达量分析中应用效果的比较研究 被引量:1 2013年 目的:比较在基因表达量分析中使用不同来源的脱氧核糖核酸酶(DNase)去除样本中残留DNA的应用效果差异,为研究者根据自己的实验需求选择合适的DNase提供依据。方法:选择国内外广泛使用的3种DNase,分别为Invitrogen DNase,TaKaRa DNase和Tiandz DNase。按照各种DNase的说明书对Trizol法提取的胎盘总RNA中残留DNA进行降解,定量方法采用实时荧光PCR测定反转录后的cDNA量。比较各种DNase对不同浓度RNA样本中残留DNA的处理效率、RNA损失量、操作时间及成本等。结果:三种DNase酶均能够完全降解不同残留量的DNA(10 ng、100 ng及1μg),实时荧光定量PCR均未检测到残留DNA。Invitrogen DNase对DNA的处理过程耗时最短,操作过程造成各种浓度RNA模板的损失量均最低,但成本最高;TaKaRa DNase处理的耗时居中,成本居中,RNA损失量最高,尤其对低浓度(<100 ng/μL)RNA样本;Tiandz DNase处理的耗时最长,成本最低,RNA损失量居中,当模板浓度较高(>500 ng/μL)时,损失量相对减少。结论:不同来源的DNase在基因表达量分析中对样本处理的应用效果各不相同,在不同样本分析中可参考以下原则正确使用合适的DNase,以保证分析的顺利和结果的准确:对于RNA提取量较多的样本,三种DNase均可选择,但如考虑成本,首选Tiandz DNase,如考虑耗时或RNA损失量,首选Invitrogen DNase,如既考虑耗时又考虑成本,可选TaKaRa DNase;对RNA提取量较少的血液或少量细胞(如单细胞)样本,应选择Invitrogen DNase。 李小燕 黄欢 王珏 卢守莲 孙丽洲关键词:DNASE 基因表达量 RNA提取 热休克蛋白27和热休克因子1在子痫前期胎盘表达及意义 被引量:4 2013年 目的:研究热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)与热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)在子痫前期孕妇胎盘中的表达情况。方法:选择2011年6月-2012年6月在南京医科大学第一附属医院产科住院分娩的子痫前期患者21例(子痫前期组),以同期分娩的正常孕妇21例(正常妊娠组)作为对照组,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化(Immunohistoche-mistry)、蛋白印迹法(Western Blotting)检测两组孕妇胎盘HSP27mRNA和蛋白的表达以及HSF1蛋白表达水平,分析其是否存在组间差异。结果:子痫前期组胎盘中HSP27mRNA表达(3.28±0.34)高于正常妊娠组(1.87±0.22)和蛋白的表达明显增高,HSF1蛋白表达增高,差异具有统计学意义;HSF1与HSP27呈正相关关系(r=0.73,P<0.05)。结论:胎盘中HSF1是HSP27表达的主要调控因子。 戚婷婷 邹艳芬 张媛媛 王文琦 孙丽洲关键词:子痫前期 热休克因子1 热休克蛋白27 外生型剖宫产术后子宫瘢痕妊娠应用子宫动脉栓塞术联合宫腔镜手术治疗的安全性及应用价值 被引量:11 2017年 目的 探讨外生型剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)应用子宫动脉栓塞术(UAE)联合宫腔镜手术治疗的临床价值及安全性.方法 收集2015年1月至2016年1月在菏泽市妇幼保健院手术治疗的84例外生型剖宫产术后CSP患者临床资料,随机分为观察组和对照组两组,每组42例.两组患者均接受宫腔镜手术,对照组采用肌注甲氨蝶呤治疗,观察组采用双侧子宫动脉栓塞术治疗;对比两组患者的手术时间、术中出血量、术后肛门首次排气时间、术后血人绒毛膜促性腺激素(HCG)转阴时间、总住院时间、病灶消失时间、月经恢复时间以及不良反应发生率.结果 对照组患者手术时间、术后肛门首次排气时间及住院时间均较观察组长,且术中出血量也较观察组多,差异有统计学意义(P〈0.05).观察组患者术后血HCG转阴时间、病灶消失时间、月经恢复时间均较对照组要短,差异有统计学意义(P〈0.05).不良反应以出血、腹痛、发热、臀部疼痛为主,对照组不良反应发生率为9.52%(4/42),观察组不良反应发生率为7.14%(3/42),差异无统计学意义(P〉0.05).结论 外生型剖宫产术后CSP的患者,宫腔镜手术同时联合子宫动脉栓塞术能够有效提高手术效率,减轻患者的损伤,帮助患者术后尽早恢复病情,同时不良反应率低,手术安全可靠,值得临床推广. 任冉关键词:剖宫产 子宫瘢痕妊娠 动脉栓塞术 宫腔镜 Interaction between curcumin and mimetic biomembrane 被引量:2 2012年 Curcumin, a major bioactive compound in turmeric, has a broad spectrum of antioxidant, anticarcinogenic, antimutagenic and anti-inflammatory properties. At the molecular level, curcumin modulates many structurally unrelated membrane proteins through several signaling pathways. Curcumin has been suggested to change the properties of cell membranes and affect the membrane-bound proteins indirectly; however, the detailed mechanism has yet to be investigated. In this paper, self-assembled bilayer lipid membranes are artificially constructed on the surface of a gold electrode to miinic biomembranes, and interaction between the supported membranes and curcumin is studied electrochemically. Results show that curcumin interacts with the membranes strongly, in a concentration-dependent manner. At low concentrations, curcumin tends to insert into the outer monolayer only, while at high concentrations, it may also begin to penetrate the inner monolayer. The results obtained in this work may enhance our understanding of the effect of curcumin, and possibly flavonoids, on ceU membranes and membrane proteins. CHEN GuiFang CHEN YangYang YANG NaNa ZHU XueJun SUN LiZhou LI GenXi关键词:CURCUMIN BIOMEMBRANE INTERACTION ELECTROCHEMISTRY 姜黄素与模拟生物膜相互作用的电化学研究 被引量:5 2012年 姜黄素是姜黄根茎提取物中的主要活性成分,具有广泛的抗氧化、抗癌、抗菌、抗炎症等特性.有研究表明,姜黄素能够在一个大致相似的浓度,作用于多种结构上互不相关、横跨多个信号通路的膜蛋白,并且推测姜黄素可能是通过对细胞膜产生直接作用,从而间接影响细胞膜蛋白.本文通过在金电极表面共价连接1,2-二棕榈酰-sn-甘油磷脂酰硫代乙醇(DPPTE)/1,2-二棕榈酰-sn-甘油磷脂酰胆碱(DPPC)磷脂双层膜来构建模拟生物膜,运用电化学交流阻抗和循环伏安等技术手段,研究不同浓度的姜黄素与模拟生物膜的相互作用结果表明,姜黄素对模拟生物膜的影响呈浓度依赖关系:在较低浓度时,姜黄素能够嵌入外层膜中,改变膜的结构使膜变薄;在较高浓度时,姜黄素能够以寡聚体的形式贯穿双层膜引起膜阻抗的大幅减小.本研究有助于进一步理解姜黄素的生理活性及其对细胞膜及膜蛋白可能产生的影响. 陈桂芳 陈阳阳 杨娜娜 朱雪珺 孙丽洲 李根喜关键词:姜黄素 模拟生物膜 分子间相互作用 电化学