国家自然科学基金(30671318)
- 作品数：5 被引量：32H指数：3
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大豆短日照诱导下新ESTs序列的筛选和功能推测
- 2009年
- 对大豆短日照诱导的基因表达差异进行了比较基因组分析,在细胞分子水平上从基因差异表达的角度研究短日照诱导衰老过程中基因转录物丰度的变化,探索大豆衰老的复杂机制。利用本实验室已经获得的抑制性消减杂交第二次PCR扩增产物重新构建新的cDNA文库,继续筛选差异表达的ESTs。利用BLAST软件在Gen-Bank数据库进行序列相似性比对,发现28个与暗诱导相关的差异表达新ESTs,归类并推测其参与机体暗适应上调表达的蛋白质功能,为进一步分离暗处理诱导表达的基因,揭示短日照加速衰老的作用机理提供基础数据。
- 赵琳高阳段莹莹李永光陈李淼郝迪萩罗秋兰李文滨
- 关键词：大豆衰老短日照代谢
- 克隆启动子方法的比较及应用被引量：15
- 2010年
- 基因的表达调控已成为分子生物学研究热点之一。启动子是基因表达调控的重要顺式元件,启动子的克隆对于研究基因表达调控、构建基因工程载体、表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的启动子陷阱技术筛选启动子到PCR方法的应用,基于PCR克隆启动子技术有:载体锚定PCR、反向PCR、接头PCR、交错热不对称PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。文章着重介绍了几种启动子的克隆方法,分析了它们的优缺点,并展望了今后的研究前景。
- 郝迪萩赵琳陈李淼李文滨
- 关键词：启动子反向PCR
- 不同光长条件下大豆蛋白质组比较研究被引量：6
- 2009年
- 对大豆光周期敏感型品种东农42分别进行16h光照和8h光照处理,提取处理和对照相同叶位叶片的全蛋白质进行双向电泳,通过PDQuest和液相离子阱质谱(LC-ESI-MS)技术对差异表达蛋白进行分析,获得二级质谱图谱,用Mascot软件搜索NCBInr数据库,鉴定出16个差异表达蛋白,其中12个表达量上调,4个表达量下调。对谷胱甘肽S-转移酶、二硫键异构酶、TCTP、半胱氨酸合成酶、Rieske铁硫蛋白前体、金属蛋白酶等主要差异蛋白进行功能分析,表明这些蛋白与植物的光合作用、信号转导、细胞凋亡的调控、防卫解毒和能量代谢等多种植物的生理生化功能相关。
- 赫卫姜振峰赵琳韩英鹏李文滨
- 关键词：大豆蛋白质组学光周期
- 植物中RNA干扰技术的研究与应用被引量：11
- 2009年
- RNA干扰(RNAi)是与靶基因同源的双链RNA引发的,在真菌、植物和动物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默(PTGS)现象。该方法的研究是目前分子生物学和基因工程领域研究的热点之一。作为反向遗传学研究的新工具,RNAi在基因功能研究、基因治疗以及病毒防治等方面发挥着巨大的作用,文章将RNAi的发现、作用机理、特点、导入思路和方法及其在植物中的广泛应用进行了综述。
- 陈李淼赵琳郝迪萩李文滨
- 关键词：RNAI基因功能植物抗逆
- 大豆GmGBP1基因的原核表达及重组蛋白纯化
- 2012年
- 将大豆中已克隆的一个新的SKIP基因(GmGBP1)构建到原核表达载体pGEX-6p-1上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,对其进行IPTG诱导。结果表明:在IPTG浓度为0.1 mmol.L-1,诱导时间为8 h,诱导温度为37℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为95 kDa,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用8 mol.L-1尿素对其进行溶解后经GST柱纯化,得到较好的纯化效果。
- 张彦威刘丽雪赵琳谷月娇卢清瑶宋仙萍李文滨
- 关键词：大豆SKIP原核表达
