国家教育部博士点基金(20131106130002)
- 作品数：6 被引量：111H指数：5
- 相关作者：郭顺星陈娟刘思思张岗周雅琴更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院广西药用植物园廊坊师范学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 铁皮石斛DoMAPK5基因的克隆及表达特征分析被引量：5
- 2016年
- 目的克隆及分析铁皮石斛DoMAPK5基因的表达特征。方法利用cDNA末端快速克隆技术(RACE),首次从铁皮石斛接菌共生萌发种子中分离得到1个新的MAPK基因,对其编码蛋白的理化性质、保守结构域等特征及进行了分析。并应用荧光定量PCR对DoMAPK5基因在石斛不同组织中表达模式分析。结果 DoMAPK5基因(Gen Bank注册号KJ472788),全长为2184bp、编码一条597个氨基酸的肽链,预测分子量为67.39KDa,等电点为9.28,编码的蛋白均不含信号肽,在210-232位具有23个氨基酸的跨膜域,具有MAPK蛋白家族保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的结构域及MAPK位点。序列比对及系统发育树分析结果表明DoMAPK5基因与葡萄MAPK基因均具有很高的相似性(82%),与水稻MAPK10亲缘关系最近。应用荧光定量PCR对DoMAPK5基因在石斛不同组织中表达模式分析显示,该基因在未接菌的植物组织中属组成型表达,在接菌共生萌发的植物组织中显著上调,为未萌发种子的10.49倍。结论 DoMAPK5在植物组织中属于组成型表达,具有受菌根真菌诱导表达的特征。
- 赵明明张岗张大为李标郭顺星
- 关键词：铁皮石斛共生萌发
- 铁皮石斛赤霉素3-氧化酶基因的克隆及表达分析被引量：13
- 2016年
- 目的克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛Dendrobium officinale赤霉素3-氧化酶（gibberellin 3-oxidases,GA3ox）基因（Do GA3ox）,并进行生物信息学和表达分析。方法采用RACE和RT-PCR技术获得Do GA3ox基因c DNA全长;利用生物信息学软件预测其编码蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 7.0和MEGA 6.0软件分别对其进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测基因表达模式。结果克隆到Do GA3ox基因（Gen Bank注册号KT597694）,c DNA全长1 318 bp,编码一条由353个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为39 052.5,等电点6.21;Do GA3ox蛋白不含跨膜域和信号肽,具有GA3ox的保守结构域DIOX_N（40~130）和2OG-Fe II_Oxy（197~299）;Do GA3ox与大葱、油棕、海枣、野茶树及蓝猪耳GA3ox蛋白一致性分别为55%、56%、54%、51%、50%,与单子叶植物大葱、油棕和海枣的亲缘关系较近。q RT-PCR实验结果显示Do GA3ox基因在铁皮石斛种子共生（非共生）萌发1~3级时,其相对表达量呈现出先升高后降低再升高的趋势,分别为未萌发种子的13.44（5.21）、7.28（2.32）和9.40（6.21）倍,由此可知,该基因在共生萌发种子中的表达量高于非共生萌发种子。结论首次克隆得到1个Do GA3ox基因的全长c DNA,其转录本在共生和非共生不同萌发级别种子中的表达特性说明该基因在铁皮石斛种子萌发中起着重要调控作用。
- 刘思思张岗陈晓梅李淑超陈娟郭顺星
- 关键词：铁皮石斛种子萌发克隆实时荧光定量PCR
- 药用植物内生真菌多样性研究进展被引量：35
- 2015年
- 总结近年来国内外药用植物内生真菌多样性研究的最新文献,分析药用被子植物(木本和草本)、裸子植物和蕨类植物等内生真菌的种类多样性,及其作用多样性和与寄主专一性关系。综述了药用植物内真菌的分离方法、鉴定方法、种类多样性、作用多样性及其与寄主专一性的关系,分析了这一领域研究目前存在的问题,并提出了可能的解决方法。药用植物内生真菌具有丰富的种类多样性,其在药用植物资源的保护与资源再生中具有巨大的应用潜力,还有待进行更为系统的研究。
- 谭小明周雅琴陈娟郭顺星
- 关键词：药用植物内生真菌专一性
- 软腐病病原菌对金钗石斛致病性的形态学研究被引量：3
- 2014年
- 目的旨在研究软腐病病原菌终极腐霉对金钗石斛致病的形态学特征。方法利用终极腐霉孢子悬液喷洒法对金钗石斛组培苗叶片进行致病性实验,对健康的以及感染终极腐霉48 h后的金钗石斛的叶片应用水压片法在光学显微镜下观察两者的形态差别。对健康的金钗石斛及感染终极腐霉48 h后的植株的根、茎、叶进行扫描电镜观察并分别比较致病前后微观结构的差异。结果压片法观察叶片部位结果显示,健康的金钗石斛叶片结构完整;致病组可见终极腐霉病原菌在金钗石斛叶片中生长旺盛,大量卵孢子和孢子囊分布于叶肉细胞间。感染病原菌后的叶肉细胞完整性受到严重破坏。扫描显微镜观察结果显示:叶肉细胞、叶鞘组织、幼嫩根尖细胞以及根被为发病的关键部位。在茎部菌丝通过消解细胞壁进入细胞。在根部菌丝除通过消解细胞壁进入细胞外,还通过根被表面的许多孔洞进入细胞。病原菌菌丝体通过叶背面大量分布的气孔结构或叶表面极具破坏性地进入叶片体内,并形成典型的附着胞结构。结论终极腐霉主要通过机械穿透和分泌降解酶破坏寄主细胞的细胞壁及其内部结构。
- 邢咏梅李向东郭顺星
- 关键词：石斛软腐病
- 铁皮石斛促生长内生真菌的筛选与鉴定被引量：28
- 2014年
- 石斛生境中存在多种能够促进石斛生长的内生真菌,利用内生真菌与铁皮石斛组培苗共生培养,筛选对铁皮石斛组培苗有促生长活性的内生真菌,研究内生真菌对石斛根的侵染情况,采用形态鉴定和分子鉴定的方法对促生长活性内生真菌进行鉴定。结果表明,8株内生真菌对铁皮石斛苗有促生长作用,均能侵染铁皮石斛根,在铁皮石斛根的根被、外皮层、皮层中以菌丝或菌丝团的形式存在,不侵染内皮层和中柱,区别于有害真菌。8株活性内生真菌中,2株产孢真菌经形态鉴定,属于Pestalotiopsis,Eurotium属,6株不产孢真菌经分子鉴定,分别属于Pyrenochaeta,Coprinellus,Pholiota,Alternaria,Helotiales等5个属。促生长活性内生真菌与石斛组培苗共生培养,可促进石斛组培苗生长,对于缩短石斛生长周期,增加石斛中药材资源具有指导意义。
- 侯晓强郭顺星
- 关键词：铁皮石斛内生真菌菌种鉴定
- 兰科植物种子萌发的研究进展被引量：32
- 2015年
- 兰科(Orchidaceae)植物属多年生单子叶植物,是被子植物中仅次于菊科与豆科的第三大科,具有很高的观赏、药用和经济价值。兰科植物种子细小量大,无胚乳,自然条件下需与适宜的菌根真菌共生才能萌发。自然环境的破坏和人为过度采挖,加上种子自身萌发条件苛刻,致使野生资源在原始生境的恢复异常困难,野生兰科植物极度濒危。研究表明,种苗快繁是实现濒危兰科植物资源再生和合理开发利用的有效途径,而种苗快繁技术的核心在于种子萌发。本文在综述了兰科植物种子成熟度、种子收集与预处理的基础上,重点阐述了种子非共生萌发和接菌(真菌)共生萌发,期望对兰科植物种子高效萌发用于产业化生产提供理论基础。
- 刘思思陈娟郭顺星
- 关键词：非共生萌发菌根真菌兰科共生萌发
