江苏省自然科学基金(BK2002108)
- 作品数：8 被引量：15H指数：3
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- 相关机构：南京农业大学上海市农业科学院江苏农牧科技职业学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 脂质对猪未成熟卵母细胞超低温保存效果的影响
- 2008年
- 对猪卵母细胞进行直接冷冻,或冷冻前进行细胞松弛素B处理或细胞松弛素B和离心极化共处理。结果表明,各冷冻组在解冻后均获得了较高的形态正常率,但冻后FDA染色存活率均显著低于对照组,分别为56.8%、45.7%和49.0%,对照组为95.4%(P<0.05)。冻后各组体外成熟率分别为42.6%、30.4%和27.0%,均存在显著差异(P<0.05),并显著低于对照组卵母细胞体外成熟率(73.9%,P<0.05)。仅直接冷冻后卵母细胞获得了7.8%的体外受精卵裂胚,也显著低于对照组的53.3%(P<0.05)。在此基础上,随机挑选胞质均匀、形态正常的新鲜卵母细胞和直接冷冻-解冻后卵母细胞制备透射电镜样本,观察结果表明,冷冻后卵母细胞内脂滴仅见均质状,而未见不均质脂滴。说明脂滴的变化可能是影响卵母细胞发育能力的原因之一。
- 张斌武彩红芮荣戴建军
- 关键词：卵母细胞脂质超低温
- 猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻后的体外成熟
- 用抽吸法采集屠宰猪卵巢中φ2-5mm及φ>5mm卵泡卵母细胞,再用切割法采集φ<2mm卵泡卵母细胞。结果表明,切割法所获小卵泡卵母细胞成熟率显著低于抽吸法采集的中卵泡和大卵泡卵母细胞,P<0.05;而中卵泡和大卵泡之间无...
- 武彩红戴建军芮荣侯加法
- 关键词：GV期卵母细胞玻璃化冷冻体外成熟
- 文献传递
- SD大鼠超数排卵及早期胚胎体内发育被引量：5
- 2005年
- 60只雌鼠随机分为3组,第1组为PMSG+hCG处理组,第2组为LHRH-A2处理组,第3组为自然发情组;于处理大鼠见栓后第0.5天至第5天从输卵管或子宫中回收胚胎。结果表明,第2组每只大鼠平均回收胚胎10.07枚±3.81枚,优于第1组(平均回收8.71枚±1.13枚胚胎),但两组间无统计学差异(P>0.05);两个超排处理组的回收胚胎数均明显高于自然发情配种组(平均回收胚胎6.27枚±3.23枚,P>0.05)。自然发情大鼠在见栓后0.5 d^1 d,1 d^1.5 d,1.5 d^2 d,2 d^2.5 d,2.5 d^3 d,3 d^3.5 d和3.5 d^4.5 d,胚胎分别发育到1-细胞期,1-细胞至2-细胞期,2-细胞期,2-细胞至4-细胞期,4-细胞至8-细胞期,8-细胞期,桑椹胚和囊胚期;自然发情与超排处理的SD大鼠,其早期胚胎发育阶段与进入子宫的时间不尽相同。自然发情大鼠的胚胎多在近桑椹胚期进入子宫,而超排大鼠在8-细胞期即已进入子宫。该结果为进一步开展相关研究奠定了基础。
- 卢庆曹爱巧刘丽均徐平芮荣
- 关键词：自然发情超数排卵胚胎发育SD大鼠
- 小鼠原始生殖细胞在生殖嵴的定位
- 本试验以昆明小鼠胚胎为材料,采用普通石蜡切片和冰冻切片技术,对不同胚龄小鼠生殖嵴进行形态学比较研究．通过对原始生殖细胞(PGCs)在生殖嵴中的碱性磷酸酶(AP)染色定位观察,比较其数量的增殖规律．结果表明,11．5-12...
- 谢冰芮荣卢晓剧世强黄国庆杨倩
- 关键词：小鼠原始生殖细胞
- 文献传递
- 小鼠原始生殖细胞在生殖嵴的定位被引量：2
- 2007年
- 试验以昆明小鼠胚胎为材料，采用普通石蜡切片和冰冻切片技术，对不同胚龄小鼠生殖嵴进行形态学比较研究。通过对原始生殖细胞（PGCs）在生殖嵴中的碱性磷酸酶（AP）染色定位观察，比较其数量的增殖规律。结果表明，11.5～12.5 dpc（配后天数）阶段为采集PGCs的最佳时间。
- 谢冰芮荣卢晓剧世强黄国庆杨倩
- 关键词：小鼠原始生殖细胞
- 猪核移植及其相关技术的研究进展(综述)被引量：3
- 2004年
- 猪器官的解剖结构和生理生化特性与人类的相近 ,猪有可能成为人类异种器官移植的首选供体动物。“多莉”羊的诞生 ,启发了人们改造猪器官用于异种移植的思路 ,大大促进了猪核移植技术的发展。该文对猪核移植及其相关技术的研究进展加以综述分析 ,以供参考。
- 朱良成芮荣
- 关键词：核移植异种移植转基因技术
- 细胞骨架在猪GV期与M Ⅱ期卵母细胞的分布规律
- 2006年
- 采用免疫荧光技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察并分析猪GV期和MⅡ期卵母细胞的细胞骨架分布。结果发现,猪新鲜GV期与MⅡ期卵母细胞的微管、微丝和染色体结构与分布,具有不同的特点和规律。在GV期卵母细胞,结构完整的微管尚未形成;染色体未发生致密化,仍存在于生发泡内;而微丝则分布于质膜下及整个胞质中。MⅡ期卵母细胞的微管,主要存在于纺锤体上,少量微管出现在第一极体周围;染色体排列于纺锤体赤道板上;微丝均匀分布于质膜下。本研究表明,微管、微丝和染色体三者间密切联系、相互作用,共同参与卵母细胞成熟与发育进程的调控。
- 武彩红芮荣戴建军剧世强卢晓郑筱峰
- 关键词：卵母细胞细胞骨架激光扫描共聚焦显微镜
- 表达绿色荧光蛋白的猪胚胎生殖细胞分离
- 2004年
- 以质粒DNA为增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的载体 ,对处于快速增殖期的 8株猪胚胎生殖 (EG)细胞 (4～ 9代 )进行转基因试验。用 1μgDNA和 2 μLLipofecTamine 2 0 0 0转染EG细胞后 ,共获得 4株转染EGFP基因的EG细胞系 (EG EGFP) ,可发出强绿色荧光 ;EG EGFP细胞连续培养 2周以上可分化为多种细胞类型。显微注射EG EGFP细胞至卵裂期胚胎、桑椹胚卵周隙内或囊胚腔中 ,共注射 135枚胚胎 ,其中 112枚存活并发育至囊胚 (83 0 % ) ;86枚嵌合体胚培养后含有荧光细胞 ,其中 5 7枚囊胚在内细胞团 (ICM)上发现有EG EGFP细胞。
- 芮荣邱妍胡元亮范必勤
- 关键词：胚胎生殖细胞增强型绿色荧光蛋白转染
- 猪卵母细胞玻璃化冷冻后细胞骨架的变化被引量：5
- 2006年
- 为研究玻璃化冷冻后猪卵母细胞纺锤体、染色体和微丝的变化,从屠宰猪卵巢表面直径2—5mm卵泡中采集未成熟(GV)期卵母细胞,由GV期卵母细胞经成熟培养获得体外成熟(MⅡ)期卵母细胞。GV期和MⅡ期卵母细胞各分为3组对照组、冷冻保护剂处理组和玻璃化冷冻组。MⅡ期卵母细胞经分组处理后直接用于激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察样本;而GV期卵母细胞处理后先经44h成熟培养,再用作LSCM观察样本。供试卵母细胞经固定、免疫荧光染色后,于LSCM下观察。结果表明,冷冻保护剂处理组GV期卵母细胞经成熟培养后,其纺锤体结构、染色体排列与微丝分布正常率分别为42.9%、89.6%和28.6%;玻璃化冷冻组此3项指标的正常率分别为10.1%、36.4%和16.9%,两组间差异显著(P<0.05);除冷冻保护剂处理组染色体正常率与对照组无较大差异外,两试验组的其他指标均明显低于对照组(分别为79.5%、93.1%和72.3%,P<0.05)。MⅡ期卵母细胞冷冻保护剂处理组的纺锤体结构、染色体排列与微丝分布正常率分别为34.4%、61.3%和47.9%,而冷冻组分别为12.9%、56.7%和37.2%,两组均显著低于对照组(分别为78.3%、90.1%和72.8%,P<0.05)。结果表明,猪GV期和MⅡ期卵母细胞经冷冻保护剂处理或玻璃化冷冻保存后,均造成了纺锤体、染色体和微丝不可逆的损伤,这可能是影响卵母细胞成熟、受精与发育的重要原因。
- 武彩红芮荣戴建军谢冰剧世强卢晓
- 关键词：玻璃化冷冻细胞骨架激光扫描共聚焦显微镜
- 猪卵母细胞中细胞骨架的激光共聚焦显微技术
- 2008年
- 为了探讨卵母细胞中细胞骨架的激光共聚集显微技术,为相关研究提供技术平台,以猪新鲜GV期和体外成熟MⅡ期卵母细胞为研究对象,通过对其进行固定、穿透、封闭、免疫荧光染色、压片和封片等处理,于激光扫描共聚集显微镜下观察微管、微丝和染色体形态分布,摸索出一套适合于猪卵母细胞中细胞骨架的显微方法,可准确定位卵母细胞相应细胞骨架的形态。卵母细胞染色前处理、染色过程及压片均为该方法的关键性步骤,其中保证所有操作在37℃条件下进行尤为重要。
- 武彩红张斌芮荣戴建军吴敏秋苏治国
- 关键词：卵母细胞细胞骨架
