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湖北省教育厅重点项目(D20101001)
作品数:
1
被引量:2
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相关作者:
曾毓芳
马立新
陈雅兰
屠俊
张桂敏
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相关机构:
湖北大学
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相关领域:
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何家亨
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马立新
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曾毓芳
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菌物学报
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2011
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rDNA介导的酿酒酵母稳定表达载体的构建
被引量:2
2011年
将一段含有质粒ColE1复制起始区(ori)和氨苄青霉素抗性基因(bla)的DNA片段插入到酿酒酵母rDNA片段中部的EcoRI或HpaI位点之间,在pYES2载体的基础上构建了两个rDNA介导的酿酒酵母稳定表达载体pHBM367E或pHBM367H。将黑曲霉糖化酶基因导入载体pHBM367H,获得表达载体pHBM166。为生物安全性的考虑,pHBM166经HpaI酶切去掉2.2kb的ColE1ori和bla片段后转化酿酒酵母Y33菌株,获得不含任何抗生素抗性基因的工程菌。随后,对糖化酶基因在酿酒酵母中的表达、稳定性进行了分析,结果显示,rDNA介导的糖化酶基因在酿酒酵母中的表达呈现不同的剂量效应,挑选高表达的菌株传80代之后仍能保持其产糖化酶的稳定性。
张桂敏
曾毓芳
陈雅兰
屠俊
何家亨
马立新
关键词:
酿酒酵母
糖化酶
生物安全性
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