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慢病毒介导的Isll基因在人骨髓间充质干细胞中的表达: 2011年; 目的研究慢病毒介导的Isll基因在人骨髓间充质干细胞（hMsc）中的表达情况，并检测其下游基因Nkx2．5和Flk一1的表达。方法多位点Gateway载体构建技术构建2K7puro／EF1α-Isll慢病毒表达载体（由EF1α启动子启动Isll基因表达）。包装细胞293FT细胞获得慢病毒，再转染至hMSC。利用嘌呤霉素抗性筛选出Isll阳性细胞。应用RT．PCR、Westernblotting检测hMSC中Isll基因在转染后1-6周的mRNA和1—4周的蛋白表达情况。结果成功构建了慢病毒载体EF1α—Isll，转染后hMSC中检测出Isll基因mRNA和蛋白的表达，其mRNA表达随着培养时间延长而上调，第3周表达量（0．65±0．14）较1、2周增多（0．36±0．09，0．37±0．05，均P〈0．05），3周后表达趋于稳定。转染后在无任何诱导剂的情况下，检测到Isll下游基因Nkx2．5的表达，但尚未见Flk-1的表达。结论通过慢病毒载体将Isll基因转染hMSC后，可获得长期稳定的表达，并在无任何诱导剂的情况下，能促进下游基因Nkx2．5的表达。; 王银芬李伟强方榕刘佳杨达雅胡承恒伍贵富项鹏; 关键词：慢病毒属转染

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国家自然科学基金(30770896)