国家自然科学基金(31260468)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 柑橘MYB15基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2015年
- 采用电子克隆和RT-PCR方法从柚(Citrus maxima(Burm.)Merr.)、枳(Poncirus trifoliata(L.)Raf.)和柠檬(Citrus limon(L.)Burm.f.)实生苗中克隆了3个MYB蛋白基因,分别命名为CmMYB15、PtMYB15和ClMYB15;并用实时定量qRT-PCR技术检测了该基因在脱落酸(ABA)、干旱、低温和高盐胁迫处理下的时空表达。结果显示,CmMYB15、PtMYB15和ClMYB15的cDNA序列全长分别为994、992、988 bp,分别编码267、266、265个氨基酸,且编码的氨基酸序列N端均含有2个串联的不完全重复的MYB DNA-binding结构域,由此推测该3个基因均属于R2R3亚类;MYB15基因均能被ABA、干旱、低温和高盐胁迫诱导表达,且在柚、枳和柠檬中存在表达差异。本研究表明柚CmMYB15、枳PtMYB15和柠檬ClMYB15是MYB基因家族成员,可能在柑橘响应非生物胁迫过程中起到一定的作用。
- 郭文芳刘德春杨莉庄霞张涓涓王书胜刘勇
- 关键词：柠檬基因克隆基因表达
- 枳抗逆基因PtrZPT2-3克隆与表达分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】分离和克隆枳双锌指蛋白基因PtrZPT2-3(GenBank登录号为KF279693),了解其在枳响应环境胁迫和逆境相关激素诱导的表达情况。【方法】以枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf]实生苗为试验材料,对植株进行低温、干旱、高盐、ABA处理,使用电子克隆和RT-PCR的方法从枳中克隆到一个新的C2H2型锌指蛋白基因,命名为PtrZPT2-3,并研究该基因在4种胁迫处理下的表达模式。【结果】PtrZPT2-3的cDNA序列长930 bp,含有534 bp的开放阅读框(ORF),编码178个氨基酸残基的蛋白,蛋白推测分子质量为19.54 kDa,蛋白的等电点是8.91。PtrZPT2-3包含2个C2H2型锌指结构域,在其C-末端含有一个转录抑制结构域(DLN)。系统发生分析结果表明,PtrZPT2-3与植物中已经发现的双锌指蛋白ZPT2-14、JrZFP2、PtaZFP2、ZPT2-12、ZPT2-13亲缘关系较近。半定量表达分析结果表明,枳PtrZPT2-3基因在干旱和ABA胁迫下的根、茎、叶中表达上调。【结论】枳PtrZPT2-3是C2H2型锌指蛋白家族的新成员,可能在柑橘响应干旱和ABA胁迫的过程中起了重要的作用。
- 吴启刘德春王玥辰刘山蓓刘勇
- 关键词：C2H2型锌指蛋白
- 柑橘抗逆基因NAC83的克隆与表达分析被引量：12
- 2015年
- 以柚[Citrus maxima(Burm.)Merr.]、枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]和柠檬[C.limon(L.)Burm.f.]实生苗为试材,使用电子克隆和RT-PCR的方法从中克隆到3个新的NAC蛋白基因,分别命名为CmNAC83、PtNAC83和ClNAC83;并用qRT-PCR技术检测了该基因在ABA、干旱、低温和高盐胁迫处理下的时空表达。结果显示:CmNAC83、PtNAC83和ClNAC83的cDNA序列全长均为841 bp,都含有750 bp的开放阅读框(ORF),编码249个氨基酸;推测其蛋白分子质量分别为24.18、28.00和28.15 kD,等电点分别是9.02、9.31和9.30,且均含有NAC家族的N端保守结构域;系统进化树分析表明,该3个蛋白均属于SENU5亚族,与苹果NAC22亲缘关系较近。实时定量qRT-PCR分析显示,NAC83基因能被ABA、干旱、低温和高盐胁迫诱导表达,且在不同的柑橘种类中存在表达差异。可见柚CmNAC83、枳PtNAC83和柠檬ClNAC83是NAC基因家族的成员,可能在柑橘响应非生物胁迫的过程中起了重要作用。
- 郭文芳刘德春杨莉庄霞张涓涓王书胜刘勇
- 关键词：柠檬基因克隆基因表达
- 枳抗逆基因PtrZPT2-2的克隆与表达分析被引量：1
- 2014年
- 通过电子克隆和RT-PCR法从枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]中克隆到1个C2H2型锌指蛋白家族基因,命名为PtrZPT2-2。该基因编码159个氨基酸残基,预测蛋白分子量为17.28 kD,等电点为9.51。PtrZPT2-2包含两个C2H2型锌指结构域,在其C–末端含有一个转录抑制结构域EAR/DLN-box(DLNL)。PtrZPT2-2与其他植物参与各种非生物胁迫反应的C2H2型锌指蛋白有较高的一致性。系统发育树分析表明PtrZPT2-2与杨树PtaZFP2,矮牵牛ZPT2-12、ZPT2-13,拟南芥ZAT12、ZAT7亲缘关系较近。半定量PCR分析表明,低温、高盐、干旱胁迫和ABA处理下枳叶、茎、根中PtrZPT2-2均被诱导上调。PtrZPT2-2可能在枳适应低温、高盐、干旱等非生物胁迫和ABA响应中起着重要作用。
- 刘德春吴启王玥辰刘山蓓刘勇
- 关键词：装卸工艺节能
