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鸽CDC10 cDNA全序列的克隆与测序: 2002年; 目的　自鸽视盖克隆CDC10全长cDNA。　方法　建立鸽左侧单眼剥夺模型 ,采用cDNA末端快速扩增法和RNA转录物转换机制技术分别克隆鸽CDC10基因的 3′和 5′半分子并进行序列分析。　结果　鸽CDC10cDNA全长为 2 32 9bp ,开放阅读框为 12 5 7bp ,推测编码 4 19个氨基酸残基 ,氨基酸水平与人CDC10有 87%的同源性。; 吕立夏徐磊杨翠香李学礼王尧; 关键词：CDNA 克隆分子生物学

鸽左视网膜摘除视盖的人TMEFF2同源基因差异表达: 2001年; 目的　研究在左视网膜摘除后鸽与人TMEFF 2同源基因在左右视盖的差异表达。方法　从本室构建的左视盖消减基因差异表达的文库得到一基因片段 ,该片段与人TMEFF 2高度同源。采用逆转录PCR和RNA点杂交方法研究该片段在左视网膜摘除后鸽左右视盖的差异表达。结果　RT PCR和RNA点杂交表明该片段在左视盖高表达。结论　TMEFF 2为中脑神经元和海马神经元存活因子。; 吕立夏徐磊杨翠香李学礼王尧; 关键词：抑制消减杂交基因表达视盖脑功能同源基因

单眼剥夺鸽视盖与人CDC1 0同源基因的克隆与表达分析被引量：3: 2001年; 初步研究鸽视觉偏侧化的分子机制。建立鸽左侧单眼剥夺模型 ,采用抑制消减杂交和反Northern方法筛选右视盖差异表达的表达序列标签。自右视盖消减文库随机取 60个重组克隆进行反Northern杂交 ,证实为真阳性克隆 6个 ,随机对其一进行序列分析 ,发现该片段与人CDC10有 84 %的同源性。CDC 10属MBF转录因子复合体的一部分 ,介导细胞周期调节的转录 ,该表达序列标签在右视盖表达增强 ,可能调制一些视觉相关神经元的分化、增殖。; 吕立夏徐磊杨翠香李学礼王尧; 关键词：抑制消减杂交表达序列标签视盖视觉剥夺

左侧视网膜剥夺鸽右视盖差异表达基因的克隆与鉴定: 2002年; 采用抑制消减杂交技术构建左侧视网膜剥夺后右视盖基因差异表达的文库 ,研究在无光刺激的条件下视盖发育受阻的分子机制。随机测序 2 1个序列 ,6个序列经反 Northern证实为真阳性 ,3个序列未发现明确的同源序列 ,另外 3个分别与 homosapiens SH3 GL2、G.domesticaus、 transthyretin有较高的同源性。 2 1个序列中 ,11个基因片段被分配序列号。; 吕立夏徐磊杨翠香李学礼王尧; 关键词：差异表达基因克隆抑制消减杂交表达序列标签

单侧视觉剥夺后鸽脑两侧视盖基因的差异表达: 2001年; 目的　探讨单侧视觉剥夺后鸽子两侧视盖基因的差异表达情况。方法　建立单眼剥夺动物模型 ,抽提、纯化左右视盖mRNA ,利用SSH方法建立左侧视盖差异表达文库 ,对其中EST进行克隆、测序 ,反Northern杂交去除假阳性。结果　共筛选得到 12个差异表达片段 ,经同源性检索 ,其中 11个未发现有高同源性的基因 ,提示可能为新的EST ;另一差异片段与CGI- 3 1蛋白有 85 %的同源性。; 祁美雁徐磊吕立夏李学礼王尧; 关键词：单眼剥夺视盖基因差异表达

大鼠小脑部分表达序列标签的鉴定被引量：5: 2001年; 目的 :为了获取大鼠小脑特异表达的cDNA序列 ,筛选新的EST基因片段 ,以便进一步获取有意义的cDNA全基因。方法 :以大鼠大脑、脑干mRNA逆转录cDNA作为driver (驱动 )cDNA ,大鼠小脑mRNA逆转录cDNA作为tester(测试 )cDNA ,经消减杂交法 ,消除与大脑及脑干相同的cDNA ,并富集低丰度基因 ,从而获得大鼠小脑特异表达基因片段 ,以及低表达基因片段 ,克隆制备成大鼠小脑特异表达cDNA文库。结果 :共挑选出 32个阳性克隆质粒 ,测序得到 34个不同基因片段的序列。最后用反Northern杂交去除假阳性 ,筛选出 8个有意义的差异表达cDNA基因片段。同时 ,将测序结果与Genbank进行同源性比较 ,发现 13个新的EST序列 ,并申请获得基因序列号(AW2 8846 1-AW2 88474)。结论 :抑制消减杂交法是一种筛选特异表达基因的有效方法。; 李学礼吕立夏徐磊杨翠香王尧; 关键词：转录杂交表达序列标签小脑 CDNA

利用消减抑制杂交技术构建MPTP诱导的C57BL小鼠全脑差异表达基因文库: 2002年; 本研究旨在构建 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导的C5 7BL小鼠全脑差异表达基因文库 ,并获取差异表达的表达序列标签。通过MPTP腹腔注射建立C5 7BL小鼠帕金森病模型。利用消减抑制杂交技术建立对照组与实验组差异表达基因文库。自两文库中各随机挑选 2 0个克隆 ,经反Northern杂交证实其中 7个克隆为阳性。同时对上述 4 0个克隆进行序列测定 ,并与已知序列基因库进行同源性比较 ,其中 2 6个新基因片段向Genbank申请了序列号。; 徐磊吕立夏姚劲松杨翠香金珠李学礼王尧; 关键词：帕金森病 MPTP C57BL小鼠 MPTP

单眼视网膜摘除鸽视盖差异表达基因的筛选: 2002年; 目的　筛选单眼剥夺鸽视盖差异表达的基因。　方法　采用抑制消减杂交技术构建左侧视网膜剥夺后左视盖基因差异表达的文库 ,对部分重组克隆进行序列分析 ,反Northern进一步去除假阳性。　结果　随机测序 15 0个表达序列标签 ,16个表达序列标签经反Northern证实为真阳性 ,包括与基因库已知基因同源的及未发现明确的同源序列 ,138个基因片段已申请序列号。　结论　视盖差异表达基因的研究为深入研究视觉发育。; 吕立夏徐磊杨翠香李学礼王尧; 关键词：视盖差异表达基因抑制消减杂交表达序列标签脑功能

单眼视觉剥夺大鼠视皮质基因表达差异的研究被引量：5: 2001年; 本实验利用差异显示反转录PCR(DDRT PCR)技术分析单眼视觉剥夺大鼠左、右侧视皮质基因差异表达情况 ,并通过反Northern杂交去除假阳性筛选差异表达基因片段。最终获得 3个差异表达基因片段。通过克隆、测序和同源性比较发现 ,其中一个片段 5’端的 166个碱基与人KIAA0 541蛋白的mRNA编码区的166bp区段有 83%的同源性。; 丁沛徐磊李学礼王尧; 关键词：视皮质表达序列标签

左侧视网膜剥夺鸽左前脑差异表达基因全长cDNA的克隆: 2004年; 利用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术克隆了一条由左侧视网膜剥夺造成左前脑差异表达EST片段的全长cDNA序列 ,同源性比较后认定 ,其为鸽e(r)基因 .该基因与人类及斑马鱼等脊椎动物e(r)基因的同源性非常高 ,但C端有明显差异 .RNA斑点杂交、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)及Northern印迹等方法检测 ,该基因在不同组织中表达量有差异 .结果表明 ,鸽e(r)基因在左眼视网膜剥夺鸽的左前脑及肝、肾中的表达量较高 ,该基因的表达具有一定的组织表达特异性 .; 金珠匡晶徐磊吕立夏许蕾李学礼王尧

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