辽宁省自然科学基金(20102278)
- 作品数：16 被引量：54H指数：5
- 相关作者：张颖马林张凯强顾何锋刘璐更多>>
- 相关机构：中国医科大学辽宁省口腔医学研究所更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氟对大鼠切牙成釉细胞内质网伴侣分子表达的影响被引量：6
- 2013年
- 目的:研究不同浓度氟化物对大鼠切牙成釉细胞的影响,探讨内质网应激在氟斑牙形成中的作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为3组,建立氟斑牙动物模型。观察大鼠切牙成釉细胞的形态学和GRP78、XBP-1、CRT和caspase-12表达的改变,采用MetaMorph显微图像分析软件和SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着饮水氟离子浓度的升高,切牙逐渐出现氟斑牙症状。免疫组化结果显示,CRT(F=11.72,P<0.05)、GRP78(F=27.42,P<0.05)、XBP-1(F=139.7,P<0.05)、caspase-12(F=43.91,P<0.05)表达随氟离子浓度的升高而升高,且各组间均具有显著性差异。结论:成釉细胞在一定浓度的氟化物作用下,其CRT、GRP78、XBP-1和caspase-12均过表达,表明成釉细胞处于内质网应激状态,且caspase-12是导致细胞凋亡的重要途径。
- 张凯强张颖刘璐顾何锋马林
- 关键词：氟成釉细胞
- 内质网应激分子在慢性氟中毒大鼠成釉细胞中的表达被引量：5
- 2014年
- 目的研究不同浓度的氟化物对大鼠成釉细胞内质网应激分子表达的作用,探讨氟牙症形成的机制。方法选择30只Wistar大鼠,随机分成A、B、C 3组,并分别饮用氟浓度为0、75、150mg/L的自来水,8周后处死动物,并制备下颌切牙切片,通过HE染色、免疫组化、透射电镜、TUNEL检测等实验方法,观察3组大鼠成釉细胞内质网应激分子的表达及细胞凋亡情况。结果随着氟浓度的升高,内质网应激分子GRP78 A组为阳性表达,B、C组为强阳性表达(F=27.42,P<0.05);XBP-1 A组为弱阳性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达(F=139.7,P<0.05);Caspase-12 A组为弱阳性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达(F=43.91,P<0.05);CHOP A组为阴性表达,B组为阳性表达,C组为强阳性表达(F=19.61,P<0.05);TUNEL检测显示氟浓度为150mg/L组成釉细胞凋亡数量显著高于75mg/L组和自来水组(F=124.02,P<0.05)。利用MetaMorph显微图像分析软件对结果进行分析,用spss13.0软件包进行统计处理。结论大鼠饮用高浓度的氟化水可激活内质网应激分子,导致成釉细胞产生内质网应激,并最终诱导细胞发生凋亡。
- 张凯强张颖顾何锋马林程睿波刘璐张思宇
- 关键词：氟成釉细胞内质网应激
- 氟对大鼠成骨细胞内质网伴侣分子表达影响研究被引量：4
- 2014年
- 目的观察不同质量浓度氟化物对大鼠股骨成骨细胞内质网伴侣分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及半胱天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达的影响,探讨内质网应激在氟骨症形成中的可能作用。方法 2012年6月在中国医科大学附属口腔医院中心实验室将48只Wistar大鼠随机分成4组,对照组(A组)饮用常规自来水,染氟组(B、C、D组)分别饮用含氟化钠质量浓度为50、100、150 mg/L的自来水,建立氟中毒动物模型。观察大鼠股骨成骨细胞形态学改变及内质网伴侣分子GRP78及caspase-12表达情况。采用SPSS13.0软件包和Meta Morph显微图像分析软件进行统计学分析。结果实验组大鼠切牙出现不同程度氟牙症表现,其骨组织免疫组化结果显示,GRP78、Caspase-12呈阳性表达,随着氟浓度增加,其阳性表达均增加,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠股骨成骨细胞在一定质量浓度氟化物作用下,GRP78与Caspase-12均出现过表达,表明在高浓度氟作用下,成骨细胞出现内质网应激,进而导致细胞凋亡。
- 顾何锋张颖张凯强刘璐马林程睿波张思宇
- 关键词：氟成骨细胞葡萄糖调节蛋白78
- 不同质量浓度氟对大鼠切牙成釉细胞转化生长因子-β1表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究不同质量浓度氟对大鼠切牙生长过程中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为3组,建立氟斑牙动物模型。3组分别为低剂量氟组(F-质量浓度60 mg.L-1,13只)、高剂量氟组(F-质量浓度120 mg.L-1,13只)和对照组(蒸馏水,14只)。10周后取材,采用苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色的方法观察氟对大鼠切牙成釉细胞的形态及TGF-β1表达的影响。结果实验组大鼠切牙均出现典型的氟斑牙症状,牙面出现白垩色改变,釉质表面有横纹。HE染色结果显示成釉细胞形态发生改变,细胞排列紊乱,甚至成灶性堆积,可见空泡性变。免疫组织化学染色结果显示TGF-β1在分泌期和成熟期成釉细胞均为强阳性表达,在星网状层、中间层均为阳性表达,在新形成的釉基质中呈阳性表达。2个实验组TGF-β1的表达强度明显低于对照组(P<0.01),2个实验组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟可能通过抑制TGF-β1的表达而干扰了成釉细胞的分化和基质分泌,造成釉质发育障碍。
- 张雪莉张颖席淑华程广岩郭晓英
- 关键词：氟化物成釉细胞转化生长因子-Β1
- 不同浓度氟对大鼠切牙成釉细胞Smad2/3表达的影响
- 2011年
- 目的:研究不同浓度氟对大鼠切牙生长过程中成釉细胞内信号转导分子Smad2/3表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制。方法:40只Wistar大鼠随机分为3组,建立氟斑牙动物模型。用HE染色和免疫组化方法观察氟对大鼠切牙成釉细胞形态及Smad2/3表达的影响,采用MetaMorph显微图像分析系统和SPSS12.0软件包分别进行图像和数据分析。结果:给氟组大鼠切牙出现典型氟斑牙症状。给氟组Smad2/3的表达显著低于对照组(P<0.01),但低氟组和高氟组间未见显著差异(P>0.05)。结论:过量氟可能通过抑制Smad2/3的表达来影响釉质的分化和发育,导致氟牙症的发生。
- 张雪莉席淑华郭晓英程广岩张颖
- 关键词：氟化物成釉细胞SMAD2/3
- 内质网应激与细胞凋亡研究进展被引量：14
- 2013年
- 内质网应激主要表现为蛋白质合成障碍,会扰乱细胞稳态并最终导致细胞凋亡。该机制在神经变性性疾病、糖尿病、心血管类疾病及细胞肿瘤类疾病等领域研究进展迅速,在口腔疾病领域研究相对滞后。深入研究内质网应激机制在口腔疾病中发挥的作用,有助于该类疾病的预防与治疗。现就内质网应激机制作一阐述。
- 张凯强张颖顾何锋刘璐马林
- 关键词：内质网应激细胞凋亡
- 氟对体外培养大鼠成釉细胞HAT-7细胞活性和对细胞内Ca^(2+)浓度的影响被引量：7
- 2015年
- 目的:观察氟对体外培养的大鼠成釉细胞HAT-7细胞活性及细胞内Ca2+浓度的影响。方法:取对数生长期的HAT-7细胞,分别加入不同浓度的Na F培养液,培养24、48、72 h后,用CCK-8检测细胞的活性;流式细胞术分析氟对细胞凋亡的影响;激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子的浓度。结果:Na F浓度为0.4、0.8 mmol/L时,促进成釉细胞增殖;当Na F浓度大于1.6 mmol/L时,促进成釉细胞凋亡,Na F浓度为1.6 mmol/L时,细胞早期凋亡数量增加,激光共聚焦显微镜检测证实,1.6mmol/L Na F可以诱导大鼠成釉细胞内Ca2+浓度升高,Na F对HAT-7细胞的上述作用与浓度和作用时间呈正相关。结论:低浓度氟促进HAT-7细胞增殖,高浓度则抑制其增殖。Na F浓度超过1.6 mmol/L时,可诱导成釉细胞凋亡,并诱导成釉细胞内Ca2+浓度增加。
- 马林张颖钟鸣朱莉张凯强顾和峰刘璐张思宇程睿波
- 关键词：氟成釉细胞CA^2+激光共聚焦
- 过量氟对成牙本质细胞内质网应激作用的动物实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:观察不同浓度氟化物对大鼠切牙成牙本质内质网伴侣分子表达的影响,探讨氟对成牙本质细胞的损伤机制。方法:随机分组的30只大鼠分别饮用氟化钠浓度为0、75、150×106的自来水,建立慢性氟中毒模型,采用SP免疫组化法检测大鼠成牙本质细胞中Grp78,XBP-1和Caspase-12的表达。利用MetaMorph显微图像分析软件采集数据并使用spss13.0软件分析。结果:随氟化物浓度增加,成牙本质细胞GRP78、XBP-1、Caspase-12的表达强度增加,且各组间具有显著差异(P<0.05)。结论:一定浓度的氟化物可以引起成牙本质细胞内质网应激,Grp78和XBP-1过表达,高强度的内质网应激会诱导成牙本质细胞通过活化Caspase-12导致成牙本质细胞凋亡。
- 张凯强张颖程瑞波刘璐张思宇顾何锋马林
- 关键词：氟斑牙成牙本质细胞
- 氟对大鼠切牙成釉细胞MMP-20及TIMP-2表达的影响及褪黑素对氟的拮抗作用
- 2011年
- 目的:通过研究不同浓度氟对大鼠切牙成釉细胞基质金属蛋白酶(MMP-20)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-2)表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制,并通过比较给氟组与加褪黑素组MMP-20、TIMP-2表达的差异,探讨褪黑素是否对氟斑牙的发生有拮抗作用。方法:40只Wistar大鼠随机分为6组,分别为对照组(A)、低氟组(B)、高氟组(C)、低氟组加褪黑素组(D)、高氟组加褪黑素组(E)和对照组加生理盐水组(F),建立氟斑牙动物模型。用HE染色和免疫组化染色观察不同浓度的氟及褪黑素对大鼠切牙成釉细胞的形态及MMP-20、TIMP-2表达的影响,采用MetaMorph显微图像分析系统和SPSS12.0软件包,分别进行图像和数据统计学分析。结果:给氟组大鼠切牙牙面出现白垩色改变,可见釉质表面横纹;成釉细胞形态发生改变,细胞排列紊乱,甚至成灶性堆积,可见空泡性变;MMP-20、TIMP-2在分泌期成釉细胞、成牙本质细胞均有表达,MMP-20在低氟组、高氟组的表达均显著低于对照组(P﹤0.01),但低氟组和高氟组之间无显著差别;TIMP-2在对照组和高氟组的表达差异有显著性(P﹤0.01),对照组和低氟组、低氟组和高氟组表达均无显著差别(P﹥0.05)。褪黑素组与未加褪黑素组两者的表达无显著差别。结论:过量氟可抑制MMP-20的表达,使MMP-20/TIMP-2的表达失衡,成釉基质蛋白清除延迟,导致釉质矿化不良,形成氟斑牙,褪黑素对氟斑牙的形成无拮抗作用。
- 张雪莉席淑华郭晓英程广岩张颖
- 关键词：氟成釉细胞组织金属蛋白酶抑制剂褪黑素
- 牛血浆纤维黏连蛋白对大鼠成骨细胞增殖、分化及凋亡的影响
- 2012年
- 目的:研究外源性纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)对大鼠成骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,探讨应用FN治疗骨缺损性疾病的可行性。方法:酶消化法分离成骨细胞,通过细胞对染料Alamar蓝摄取检测细胞增殖,ELISA方法检测碱性磷酸酶活性,流式细胞术检测FN对成骨细胞细胞周期及凋亡的影响,Western印迹法检测FN作用后成骨细胞Bcl-2及Bax基因的蛋白表达变化。采用SPSS12.0软件包对实验数据进行单因素方差分析。结果:FN浓度为40μg/mL以上时,能促进大鼠成骨细胞的增殖,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);FN能增加成骨细胞ALP活性,各组与对照组相比均有显著性差异(P<0.05),并有明显的剂量依赖性;不同浓度的FN作用成骨细胞后,可使处于DNA合成期(S期)的细胞百分率增加;增殖指数(proliferation index,PI)增加,细胞凋亡百分率减少,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);FN作用后的细胞,Bcl-2基因的蛋白表达量增加,Bax基因的蛋白表达量减少,有剂量依赖性。结论:外源性FN能促进大鼠成骨细胞增殖、分化,使大鼠成骨细胞的DNA合成期(S期)的细胞百分比增加,同时抑制大鼠成骨细胞的凋亡,使大鼠成骨细胞胞质内Bcl-2基因的蛋白表达量增加,同时减少Bax基因的蛋白表达量。
- 薛明耿春雪杨谛张颖仇丽鸿
- 关键词：纤维黏连蛋白成骨细胞凋亡BCL-2BAX
