广西壮族自治区自然科学基金(2013GXNSFBA019087)
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 相关作者：闵丹丹李刚唐美琼蒋妮叶云峰更多>>
- 相关机构：广西中医药大学广西壮族自治区药用植物园广西药用植物园更多>>
- 发文基金：广西药用植物园青年基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 三七香叶基香叶基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析被引量：9
- 2015年
- 基于三七转录组测序结果,选择萜类代谢骨架上香叶基香叶基焦磷酸合酶基因(GGPPS),结合RACE技术,克隆得到全长1 203 bp的c DNA序列,最长开放阅读框为1 035 bp,命名为Pn GGPPS,Gene Bank登录号为KM486564,Pn GGPPS基因全长2 370 bp,包含1个内含子和2个外显子,该基因编码344个氨基酸,与蓖麻Ricinus communis、丹参Salvia miltiorrhiza等植物GGPPS的同源性达到73%以上,具有富天冬氨酸区等多个结构域,属于类异戊二烯合成酶超家族。实时荧光定量PCR结果显示,Pn GGPPS在一至三年生三七的根、茎、叶和三年生的花等不同器官组织中均有表达,但以三年生叶中具有显著水平的高表达量,暗示其既具有调节三七生长发育的基本功能,也与三七叶绿素和类胡萝卜素的合成、叶绿体的发育、阴生适应性,以及品质的形成有关。
- 闵丹丹唐美琼李刚屈啸声缪剑华
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 三七RNase-like基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2014年
- 采用同源序列克隆法,结合RACE技术,从三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H]根茎总RNA中克隆次生代谢相关差异表达RNase-like贮藏蛋白的编码序列,并进一步以DNA为模板扩增全长基因,获得一条开放阅读框为717 bp的cDNA序列,命名为PMP(GenBank,KC751542),相应基因全长1 074bp。序列及其进化分析表明,该基因包含3个外显子和2个内含子,编码238个氨基酸,相应蛋白质的分子量为27.47 kD,含有核苷酸结合的保守区域,属于RNase-T2超家族成员。三七PMP蛋白与人参RNase-like贮藏蛋白高度同源,序列相似性达95%。实时荧光定量PCR研究表明,三七PMP基因在其根、茎、叶、花等器官中均有表达,且3年生根中表达量最高,暗示该基因可能参与三七皂苷次生代谢调控及其品质形成。
- 唐美琼李刚闵丹丹韦荣昌
- 关键词：克隆
- 三七病程相关蛋白PR10-1基因克隆及功能初步分析被引量：10
- 2015年
- 采用同源克隆法和RACE技术相结合,对三七根部蛋白质组差异进行研究,鉴定PR10-1蛋白相应的基因全长c DNA,初步分析该基因在三七中的功能。测序结果显示该基因序列全长863 bp,包含1个序列长465 bp编码155个氨基酸的开放阅读框,命名为Pn PR10-1,Gen Bank登录号KJ741402。氨基酸序列同源性及系统发育树分析发现,Pn PR10-1与人参的PR10-1蛋白同源性最高,含有Bet-v-I家族等多个保守结构域。实时荧光定量PCR分析显示,Pn PR10-1在1~3年生三七各组织中均有本底表达,暗示其参与生长发育、代谢调控等生物学过程;Pn PR10-1在根部受根腐病原菌（Fusarium oxysporum）胁迫上调表达,推测Pn PR10-1基因可能参与抗三七根腐病等广谱抗病防御反应。
- 唐美琼闵丹丹李刚蒋妮叶云峰
- 关键词：病程相关蛋白基因克隆防御反应
