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制备源自HBsAg基因修饰树突状细胞的外切体: 2012年; 目的:制备一种新型负载HBsAg基因的外切体(exosome)瘤苗,并探讨其生物学特性、免疫学功能。方法:运用分子克隆和病毒载体转染HBsAg基因构建AdVHBsAg-DC肝癌瘤苗,采用流式细胞术鉴定转染基因表达;提取exosome;以透射电镜观察、Western blot法鉴定exosome。结果:构建的重组AdVHBsAg腺病毒载体,经PCR和酶切鉴定,结果显示HBsAg基因片段已正确插入腺病毒载体中。包装的腺病毒载体具有良好的感染性,可以在293细胞中形成病毒颗粒。提取的exosome在透射电镜下可观察到直径为50-100nm的膜性微囊,圆形或椭圆形,有完整包膜。Western blot检测结果表明,exosome含有DC的特征分子和HBsAg基因。结论:成功制备并获得HBsAg基因修饰树突状细胞为来源的exosome瘤苗,为治疗乙肝相关肝癌提供新的思路。; 杨静悦高琳付蓉薛妍刘文超; 关键词：树突状细胞免疫治疗 EXOSOME

案例教学法在肿瘤内科教学中的应用研究被引量：15: 2014年; 目的:以《内科学案例集》作为临床肿瘤内科学教学教材,探讨案例教学法应用教学效果。方法:以临床医学专业见实习生作为本次调查研究对象,对2009级和2008级学生分别采用案例教学法和传统教学法,课程结束后进行问卷调查,了解教学效果,并对比两组学生期末与内科出科考试成绩。结果:(1)案例教学法实施后,学生临床思维能力、观察能力、自学能力等均明显提高,两组间比较有显著统计学意义(P<0.05);(2)在学期成绩比较中,案例教学组成绩比对照组高,成绩间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在临床肿瘤内科学教学中应用案例教学法,教学效果较为显著,因此可以尝试在肿瘤教学中推广使用这种教学方式,但是在应用过程中需要进一步加以完善。; 杨静悦薛妍高琳斯晓明刘文超; 关键词：案例教学法教学应用

脂多糖刺激前后树突状细胞CD44、CD24基因的表达: 2011年; 目的:检测脂多糖作用于树突状细胞前后CD44、CD24基因的表达情况。方法:从外周血分离单个核细胞,加入rhGM-CSF及rhIL-4,培养的第6天,实验组加入脂多糖刺激24 h而对照组不加,于刺激后不同时间点分别提取细胞总RNA,行real time PCR检测。结果:单个核细胞经GM-CSF及IL-4诱导6d后分化成为树突状细胞,表达较低水平的CD44及CD24。脂多糖刺激后树突状细胞的CD44及CD24表达均较对照组增高,CD44增高更明显。结论:树突状细胞受脂多糖刺激后CD44及CD24表达显著增高,这有利于DC-T细胞簇的形成及抗原的递呈,从而导致DC免疫功能的增强。; 郑瑾刘强李燕杨建栋马骥刘尧刘文超; 关键词：脂多糖树突状细胞 CD44 CD24 实时定量PCR

肝癌细胞裂解物负载的树突状细胞来源的exosomes制备及其抗肝癌免疫活性的研究被引量：1: 2013年; 目的:制备一种比单纯源于DC的、更有效的新型治疗肝癌的DC来源的exosomes瘤苗,进而探讨其生物学特性、免疫学功能及抗肿瘤免疫活性。方法:用细胞因子诱导培养树突状细胞(dendritic cell,DC),将肝癌细胞HepG2裂解物负载DC后,提取exosomes。透射电镜观察exosomes形态,流式细胞术检测exosomes蛋白分子的表达;其后应用exosomes直接刺激效应淋巴细胞,MTT法检测CTL对靶细胞HepG2的杀伤活性。结果:透射电镜下观察到负载组exosomes为直径50-100nm的膜性微囊,圆形或椭圆形,有完整包膜。FCM检测表明,负载组exosomes含有DC的特征分子(包括CD86、CD83)。负载组来源的exosomes活化的T细胞对HepG2的杀伤率显著高于未负载组及单纯淋巴细胞组(P<0.05)。结论:肝癌细胞裂解物负载能增强DC分泌的exosomes体外诱导CTL效应。本研究为制备高效的exosomes肝癌瘤苗提供了实验依据。; 杨静悦孙飞付蓉薛妍刘文超; 关键词：肝癌 EXOSOMES

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国家自然科学基金(30901763)