国家自然科学基金(30471419)
- 作品数：9 被引量：63H指数：5
- 相关作者：戴思兰刘振林尹伟伦曹华雯夏新莉更多>>
- 相关机构：北京林业大学河北科技师范学院东北大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 甘菊BADH基因cDNA的克隆及在盐胁迫下的表达被引量：18
- 2009年
- 利用PCR、RT-PCR和PCR-RACE技术,从菊科植物甘菊(Dendranthema lavandulifolium)中克隆到2个甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase,BADH)基因的同源基因,分别命名为D lBADH1和D lBADH2,GenBank登录号分别为DQ011151和DQ011152。D lBADH1的cDNA全长1821 bp,其开放阅读框编码503个氨基酸的蛋白质;D lBADH2全长1918 bp,编码506个氨基酸的蛋白质。两个基因核苷酸序列的同源性为97%,推导的氨基酸序列的同源性为98%。与已发表的其它植物BADH基因氨基酸序列的同源性在64%以上。在推导的氨基酸序列中,均含有醛脱氢酶所具有的高度保守的十肽(VTLELGGKSP)以及与酶功能有关的半胱氨酸残基(C)。在推导的氨基酸序列的系统关系中,甘菊位于其它双子叶植物和单子叶植物之间,与其植物分类的系统关系相吻合。RT-PCR-Southern半定量表达分析表明,甘菊BADH基因家族中存在表达受盐诱导的成员。
- 刘振林曹华雯夏新莉尹伟伦戴思兰
- 关键词：甜菜碱醛脱氢酶基因甘菊CDNA克隆
- 菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因同源片段的克隆与序列分析被引量：9
- 2006年
- 在盐和干旱等渗透胁迫条件下,一些植物会积累甘氨酸甜菜碱(简称甜菜碱)作为渗透调节物质,甜菜碱在植物体内由胆碱经两步氧化形成,催化这两步反应的酶分别是胆碱单氧化物酶(cholinemonooxyge-nase,CMO)和甜菜碱醛脱氢酶(betainealdehydedehydrogenase,BADH)。由于甜菜碱的合成途径简单,进行遗传操作方便,在诸多抗逆性基因中甜菜碱合成酶基因被看作是最有希望的胁迫抗性基因。其中,BADH基因的全长cDNA序列首先被从藜科植物菠菜(Spinaciaoleracea)中克隆到,此后人们相继以该基因为参照,研究其它植物中的BADH基因。本文作者在以菠菜BADH基因为对照研究菊科植物的BADH基因时,根据已发表BADH基因的保守区序列设计了一对PCR兼并引物,以菠菜基因组DNA为模板,采用PCR法扩增出长分别为825bp(seq1)和822bp(seq2)的两个DNA片段,经测序和序列分析,seq1与GenBank中登录的菠菜BADH基因的基因组序列(U69142)一致,其外显子区与已发表的该基因的cDNA序列(M31480)一致,seq2与U69142序列的同源性为68%,其外显子区与M31480序列的同源性为83.93%。而且,在由该核苷酸序列推导的氨基酸序列中,含有醛脱氢酶高度保守的十肽VTLELGGKSP,说明该基因为菠菜BADH基因的同源基因。根据现有文献分析,菠菜中可能存在两个BADH的同工酶,作者所克隆基因片段所属的基因可能编码菠菜BADH的另一个同工酶。该序列已在GenBank中登录,登录号:DQ070842。
- 刘振林尹伟伦戴思兰
- 关键词：菠菜克隆
- 新的BADH同源基因:甘菊BADH基因被引量：5
- 2005年
- BADH基因是重要的渗透胁迫抗性基因,在植物的抗性分子育种方面具有重要作用。本文作者利用PCR、RT-PCR、PCR-RACE技术,从菊科菊属植物甘菊(Dendranthemalavandulifolium(Fisch.)LingetShih)中克隆到2个BADH基因的同源基因——DlBADH1和DlBADH2,GenBank登录号分别为:DQ011151和DQ011152。
- 刘振林尹伟伦戴思兰
- 关键词：BADH基因同源基因甘菊RACE技术菊属植物
- 二月兰传粉生物学研究被引量：4
- 2007年
- 对二月兰在北京地区开花的物候期、花粉的活性、柱头的可授性、植株繁育系统及种子的萌发特性等方面进行研究,结果表明:二月兰的花期从3月底可一直到5月中旬,盛花期在4月,单朵花期维持5d左右,5月中旬花朵基本凋谢,进入结实期;花粉活性蕾期最高,开花第4天基本无活性,而柱头可授性在开花后3～4d最高;不同方式的结实率也表明二月兰自然条件下难于自花授粉;二月兰的种子储藏年限及温度对萌发率有一定的影响,尤其对萌发速度影响较大,2005年收集的种子较于2003年和2004年萌发更快,而在25℃下萌发速度比20℃和30℃更快。
- 张莉俊韩颖戴思兰
- 关键词：二月兰传粉生物学繁殖
- 高等植物成花分子机理的研究进展被引量：17
- 2007年
- 植物花的发育是科学家们长期以来所探索的迷题,也是当今发育生物学研究的热点。成花过程是在植物自身遗传因子和环境条件的共同作用下完成的,是一个非常复杂的过程。而成花分子机理的研究则是揭示这一过程的最直接的途径。根据植物对环境条件的反应及自身的生物学特性,可以将植物成花类型分成光周期成花、春化作用成花和基因控制的植物成花三个类型。而有关这三个成花过程分子机理的研究都取得了重大突破。本文就这几个过程的研究进展作一简要综述。
- 马月萍戴思兰
- 关键词：高等植物成花分子机理
- 甘菊DlBADH1基因启动子DBP12表达特性研究被引量：5
- 2007年
- 用pCAMBIA1305.2做载体,构建含有甘菊(Dendranthema lavandulifolium)DlBADH1基因(登录号:DQ011151)启动子DBP12(登录号:DQ497621)的质粒pCHW-2。利用叶盘转化法,通过农杆菌EHA105菌株介导,将重组质粒导入烟草叶片。采用GUS组织活性检测法鉴定烟草转基因植株,结果表明:DPB12启动子驱动的GUS基因表达无组织特异性。对转基因植株进行NaCl、ABA、SA处理,GUS荧光测定发现:100μmol/L ABA胁迫处理24 h和400 mmol/L NaCl胁迫处理48 h,转pCHW-2烟草植株叶片中GUS酶活性均有大幅度提高。该结果表明:DlBADH1基因启动子DBPl2是一个诱导型启动子。这一研究结果为进一步研究甘菊中BADH基因调控表达机理提供了参考。
- 曹华雯刘振林夏新莉尹伟伦戴思兰
- 关键词：转基因烟草SANACLGUS活性
- 甘菊BADH基因启动子的克隆与瞬时表达分析被引量：8
- 2008年
- 为了给菊花[Dendronthema×grandiflora (Ramat.) Kitam.]的转基因育种提供诱导型启动子,借鉴5′RACE策略,利用锚定PCR步移的方法克隆了甘菊[Dendranthema lavandulifolium(Fisch.ex Trautv.)Makino]甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase,BADH)基因的4个启动子序列,分别命名为DBP11、DBP12、DBP21和DBP22(GenBank登录号:DQ497620～DQ497623),序列长度分别为1230、1249、1273和574bp。4个启动子序列对应区域的同源性在89%以上。其中DBP12和DBP21分別是甘菊BADH基因DlBADH1和DlBADH2(GenBank登录号:DQ011151和DQ011152)的启动子序列,DBP11和DBP22为甘菊BADH基因家族中其它成员的启动子序列。序列分析表明,上述启动子序列中均含有多处与水分胁迫和脱落酸诱导相关的顺式作用元件。在表达载体pCAMBIA1305.2的基础上,用所克隆的4个甘菊BADH基因启动子序列分别置换驱动其报告基因表达的35S启动子,建立了新的植物表达载体。用其转化农杆菌,并用叶盘法侵染甘菊,瞬时表达的结果表明这些启动子序列均具备驱动报告基因表达的功能。
- 刘振林曹华雯夏新莉尹伟伦戴思兰
- 关键词：甘菊甜菜碱醛脱氢酶基因启动子克隆
- 烟草转DFL基因植株的鉴定被引量：4
- 2007年
- LEAFY基因在植物成花过程中具有重要的作用。DFL是甘菊中LFY同源基因。本研究将DFL基因导入烟草中,鉴定该基因的功能作用。对经潮霉素筛选的抗性植株进行了组织化学染色、PCR扩增及Southern杂交检测。结果检测出8株为GUS阳性植株,进一步用PCR方法验证出其中6株为PCR阳性植株;Southern杂交检测最终证实有3株烟草植株的基因组中已经整合进DFL基因。对转基因植株的开花期和植物学性状进行观测,并与非转基因烟草植株做对比,结果发现：转DFL基因烟草植株的花期有所改变,其中3株转基因植株花期提前15～23d;部分烟草植株发生形态学性状的变异,如叶片褶皱,叶色发黄。本研究可为转基因改良花卉品种开花期提供参考。
- 白凌马月萍戴思兰
- 关键词：转基因烟草花期
