国家自然科学基金(81072913)
- 作品数：4 被引量：56H指数：4
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- 相关机构：中国人民解放军总医院军事医学科学院更多>>
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- 氧化苦参碱脂质体对大鼠肝星状细胞作用的差异蛋白电泳分析被引量：12
- 2013年
- 目的应用比较蛋白质组学的方法分析氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)脂质体作用于体外培养的肝纤维化大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)后,其蛋白表达的差异,以进一步阐明OMT脂质体对肝纤维化治疗作用的分子机制。方法建立四氯化碳(CCl4)致慢性肝损伤纤维化的大鼠研究模型,灌流法分离获得大鼠HSCs,将P2代细胞分为A(模型组)、B(OMT脂质体处理组)、C(脂质体对照组)3组进行实验,以正常大鼠来源的HSCs作为正常对照组,作用7天后,分别提取实验组和正常对照组细胞的总蛋白质,进行等电聚焦双向电泳,建立应用OMT脂质体作用前后HSCs双向电泳差异表达谱;选取两个差异最明显的蛋白点,经肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprinting,PMF)测定,确定差异蛋白结构和功能。结果 (1)总蛋白质点在OMT脂质体作用前后有所减少,分别为864和756个,匹配率为63%;(2)局部区域图像进行放大可得10种蛋白质在正常对照组和实验组之间具有表达差异;(3)经PMF分析和SWISS-PROT蛋白数据库检索可获得两个差异最显著蛋白点为分子量46.236kD的ATM和54.051kD的Miz1。结论 OMT脂质体作用于HSCs会造成其蛋白质表达的差异性,可能参与诱导其凋亡的信号途径。
- 柴宁莉常青徐世平万军吴本俨
- 关键词：肝星状细胞双向电泳
- 氧化苦参碱协同骨髓间充质干细胞治疗大鼠肝纤维化的实验研究被引量：10
- 2013年
- 目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)协同骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的影响,并初步探索其机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、模型组、MSCs组、OM组及OM-MSCs联合治疗组,每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均复制CCl4诱导的HF模型。造模成功后,MSCs组尾静脉注射MSCs5×106个/只,1次/周;OM组肌肉注射OM50mg/kg,3次/周;OM-MSCs联合治疗组肌肉注射OM50mg/kg,3次/周,尾静脉注射MSCs5×106个/只,1次/周。正常对照组、模型组给予等量的生理盐水处理。共给药8周。8周后检测各组大鼠血清ALT及AST水平,利用HE染色和Masson染色评价肝脏病理损伤及细胞外基质沉积情况。利用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中白介素-4(IL-4)和白介素-10(IL-10)的表达。结果 (1)与正常对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,8周末OM组、MSCs组及OM+MSCs联合治疗组血清ALT、AST水平显著下降(P<0.05);但OM+MSCs联合治疗组的血清ALT、AST水平显著低于OM组及MSCs组(P<0.05)。(2)与模型组比较,OM组、MSCs组及OM+MSCs联合治疗组的肝损伤减轻、细胞外基质沉积面积显著减少(P<0.05),且OM+MSCs联合治疗组较OM组、MSCs组更为显著(P<0.05)。(3)与模型组比较,MSCs组、OM+MSCs联合治疗组血清中IL-4水平显著升高(P<0.05),且后两组比较,后者升高更为显著(P<0.05);OM治疗组IL-4水平亦升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。(4)OM组、MSCs组及OM+MSCs联合治疗组的血清IL-10的水平显著升高(P<0.05),其中OM+MSCs联合治疗组IL-10的水平升高更为显著(P<0.05)。(5)双光子显微镜显示MSCs注射至大鼠体内后未在肝脏定植,OM也未增加MSCs在肝脏的定植。结论 OM可协同MSCs减轻CCl4诱导的HF,这可能与增加血清中IL-4和IL-10水平有关。
- 柴宁莉徐世平万军吴本俨
- 关键词：氧化苦参碱骨髓间充质干细胞肝纤维化白介素-4白介素-10
- 胃息肉中Foxa2的表达及其与胃息肉癌变之间的相关性被引量：11
- 2013年
- 目的探讨叉头框蛋白A2（Foxa2）蛋白的表达与胃息肉癌变之间的相关性及其早期报警价值。方法对解放军总医院2011年11月至2012年10月接受胃镜检查的患者，根据计算机随机号码抽取2000例患者，其中170例在胃镜检查时发现胃息肉样病变及可疑癌变病灶，进行内镜下活检，对所取组织进行病理学分型，其中正常胃黏膜30例、炎性或增生性息肉35例、胃底腺息肉42例、腺瘤性息肉31例、进展期胃癌32例。采用ABC免疫组织化学染色法和组织水平反转录一PCR方法，检测不同病理状态组织中Foxa2的表达水平，结合临床对结果进行相关分析。结果Foxa2在正常胃黏膜中仅有少量表达，表达阳性率为3．6％±1．3％；在炎性或增生性息肉、腺瘤性息肉和胃癌组织中表达依次增高，分别为33．1％±8．0％、71．4％±1．7％和96．3％4-0．9％，两两之间差异均有统计学意义（均P〈0．05）；胃底腺息肉中Foxa2的表达阳性率为35．6％4-5．6％，与炎性或增生性息肉组差异无统计学意义（P〉0．05），但明显高于正常胃黏膜组（P〈0．05），且低于腺瘤性息肉组（P〈0．05）；对于胃息肉患者病变部位Foxa2的表达与临床相关资料分析结果显示，Foxa2的表达与患者性别、年龄、病变部位、幽门螺旋杆菌感染以及质子泵抑制剂使用均无明显相关性（均P〉0．05），而与息肉大小存在相关性（L=0．69，P〈0．05）。结论不同类型胃息肉中Foxa2蛋白的表达水平不同，Foxa2蛋白的表达可作为息肉癌变风险预测的临床诊断指标。
- 柴宁莉张文成王艳敏周昭涛张艳娥刘红艳万军覃金华王术勇王韫芳裴雪涛吴本俨
- 关键词：息肉胃肿瘤
- Lgr5和CD44在肠息肉和结直肠癌中的表达及意义被引量：23
- 2013年
- 目的探讨不同病理分型肠息肉与肿瘤发生相关的干细胞标志Lgr5和CD44的表达及其对息肉癌变的临床预测意义。方法经结肠镜活检获取结肠直肠息肉、腺瘤和癌组织145例,进行病理检测分型;应用免疫组化方法检测不同病理类型标本中肿瘤干细胞标志Lgr5和CD44的表达,分析比较其与结、直癌的发生和预后的关系。结果 CD44在结肠癌组织中的表达率为95.65%,显著高于正常粘膜5%、炎性增生性息肉22.58%、管状腺瘤性息肉55.26%及绒毛状息肉75.76%(P<0.05)。Lgr5在大肠癌组织中的表达高达95.65%(22/23),显著高于正常粘膜(无表达)和炎性增生息肉16.12%(P<0.05),而在管状腺瘤和绒毛状腺瘤中表达分别为86.84%(33/38)和93.94%(31/33),与大肠癌相比,两两差异不具有统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果显示,CD44、Lgr5的表达强度与肠息肉癌变进展均呈正相关(rs=0.69377,P<0.0001;rs=0.81637,P<0.0001)。结论 Lgr5和CD44在大肠癌癌组织中高表达,它们的高表达与临床和病理的特征具有显著相关性;Lgr5和CD44的表达是区别大肠癌癌组织与正常肠粘膜组织的显著特点;与CD44相比,Lgr5表达与息肉癌变具有较强相关性,联合检测Lgr5与CD44在肠道早期病变诊断、尤其是肠息肉癌变预测中具有重要意义。
- 柴宁莉张文成王艳敏周昭涛张艳娥刘红艳万军覃金华王术勇王韫芳裴雪涛吴本俨令狐恩强
- 关键词：肿瘤干细胞LGR5CD44结肠息肉结肠癌
