国家自然科学基金(20475010)
- 作品数：14 被引量：38H指数：6
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- 青枯菌不同色谱峰组分的细胞表面特性被引量：2
- 2011年
- 将高效离子交换色谱应用于植物重要致病菌——青枯菌的分离分析.青枯菌纯培养物经过色谱分离得到3个特征峰,收集3个色谱峰组分进行形态观察和生理生化鉴定,结果表明3个组分均属于青枯菌生化Ⅲ型;进一步分析发现,3个色谱峰组分在质粒DNA、细胞表面鞭毛菌毛蛋白含量和全细胞脂多糖成分方面无明显差异,但细胞表面黏附的胞外酸性多糖EPSⅠ含量差异显著;3个色谱峰青枯菌细胞表面疏水性的测定结果也证实了EPSⅠ是造成不同青枯菌细胞色谱行为差异的主要原因.高效离子交换色谱为细菌活细胞的研究提供了一种新方法.
- 林娟谢范英刘树滔饶平凡
- 关键词：青枯菌高效离子交换色谱活细胞
- 青枯雷尔氏菌HPLC分析中色谱分离条件的研究被引量：5
- 2006年
- 研究了在青枯雷尔氏菌的高效离子交换色谱（HPLC）分析中,不同色谱分离条件对分离效果的影响.建立了在室温下分离青枯雷尔氏菌的最佳色谱条件：采用Toyopearl SuperQ-650C强阴离子交换树脂、 0.02 mol/L哌嗪-HCl缓冲液（pH 8.0）、洗脱盐浓度为1 mol/L NaCl、洗脱梯度0～75%/30 min、流速1 mL/min.在该色谱条件下,可获得良好分离的3个青枯雷尔氏菌色谱峰.
- 林娟饶平凡马骋刘树滔谢智
- 关键词：青枯雷尔氏菌高效离子交换色谱
- 青枯菌野生型菌株和无毒突变株细胞表面的吸附特性(英文)被引量：4
- 2010年
- 应用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器（HPLC/MALLS）研究青枯菌野生型菌株79#和无毒突变菌株RS52’对强阴离子交换树脂（SuperQ-650C）的吸附特性.结果显示,这2个菌株在色谱行为和吸附特性方面差异显著.静态吸附试验结果也表明,在相同条件下,79#菌株的吸附速率和吸附量与RS52’菌株不同,79#菌株在60min达到吸附平衡,最大吸附量为1.09×109cfu/g（干树脂）;RS52’菌株在120min达到吸附平衡,最大吸附量为2.10×10~9cfu/g（干树脂）.进一步采用Langmuir和Freundlich吸附等温线方程比较79#菌株和RS52’菌株与树脂之间的吸附能力,研究结果与静态吸附试验结果以及高效离子交换色谱的分析结果相一致,RS52’菌株与树脂之间显示出更强的吸附力;此外,用Freundlich方程拟合的效果优于Langmuir方程,拟合的曲线与实验数据更吻合.
- 林娟高珍娜刘树滔饶平凡
- 关键词：青枯菌野生型色谱行为
- 应用高效离子交换色谱分析青枯菌的致病力分化被引量：11
- 2009年
- 应用高效离子交换色谱和激光光散射仪检测器对不同致病力的青枯菌进行分析,建立了一种快速检测青枯菌致病力分化的新方法.青枯菌纯培养物经过高效离子交换色谱分离得到3个致病力不同的特征峰,大小依次为峰3组分>峰2组分>峰1组分.对10株青枯菌进行色谱分析,并结合番茄组培苗感染试验检测其致病力,结果发现,强致病力菌株经过色谱分离只在峰3的保留时间位置出现单一特征峰,在9d内即可引起100%的番茄组培苗发病;若菌株经过色谱分离形成3个特征峰,则峰3所占的面积比越大,该菌株的致病性相对就越强.25株不同致病力青枯菌的验证试验表明了该方法的可行性,番茄组培苗发病率x与峰3面积比y之间呈现出良好的线性关系,回归方程y=0.9581x+5.4984,相关系数r=0.986.通过对青枯菌色谱行为、致病力、细胞表面黏附的EPSⅠ含量三者之间相互关系的进一步研究,发现青枯菌的致病力越强,则细胞表面黏附的EPSⅠ越多,峰3所占的面积比就越大.
- 林娟刘树滔高珍娜饶平凡
- 关键词：青枯菌致病力高效离子交换色谱
- 全脂乳中2种乳酸菌的HPLC研究
- 2012年
- 研究了可应用于高效液相离子交换色谱分析的嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌的培养方法,同时探讨了全脂乳中培养的乳酸菌HPLC上样菌悬液的制备方法。对全脂乳中培养不同时间的嗜热链球菌及保加利亚乳杆菌进行色谱表征,并首次发现保加利亚乳杆菌在全脂乳培养过程中菌体形态变化与色谱表征的一致性。
- 张天亮王霞饶平凡
- 关键词：嗜热链球菌保加利亚乳杆菌色谱
- 不同生长阶段青枯菌的高效离子交换色谱表征被引量：6
- 2007年
- 采用高效离子交换色谱和激光光散射仪对不同生长阶段的青枯菌进行色谱表征。青枯菌经过色谱分离得到3个特征峰。通过对延滞期、对数生长期和稳定期青枯菌细胞浓度、发酵液pH值、细胞表面黏附的胞外酸性多糖(EPSⅠ)含量与青枯菌色谱行为的关系研究,发现在8h时,青枯菌运动能力强,细胞表面EPSⅠ少,吸附力弱,绝大多数菌体直接随流动相流出形成峰1;随着培养时间延长,细胞表面黏附的EPSⅠ量增多,与树脂吸附力增强,保留时间延长。因此分析3个色谱峰的形成与青枯菌的运动性、以及细胞表面EPSⅠ与阴离子交换树脂的吸附作用有关。并通过比较3个色谱峰青枯菌细胞表面EPSⅠ含量的差异和观察青枯菌经过4%甲醛固定处理后色谱行为的变化加以进一步验证。高效离子交换色谱为细菌完整细胞的研究提供了一种新的分析方法。
- 林娟马骋刘树滔饶平凡
- 关键词：青枯菌高效离子交换色谱不同生长阶段运动性
- 脱脂乳发酵体系中乳酸菌的高效离子交换色谱分析被引量：3
- 2007年
- 应用高效离子交换色谱对脱脂乳发酵体系中的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌进行色谱表征。结果表明,单菌培养过程中保加利亚乳杆菌菌体形态的变化在其相应色谱行为上得到了体现,二者的色谱峰有比较好的稳定性。两种菌的峰面积与菌数之间呈现出良好的线性关系,可决系数R2分别为0.9957和0.9916。因此本方法的建立,可用于酸奶发酵过程中乳酸菌的分析与表征,有望为乳酸菌混合物的研究提供一种快捷的新方法。
- 张天亮林娟刘树滔饶平凡
- 关键词：高效离子交换色谱嗜热链球菌保加利亚乳杆菌
- 采用高效离子交换色谱分离分析动物肠道菌群方法初探被引量：11
- 2006年
- 报道了利用高效离子交换色谱直接分离动物粪便肠道菌群的有关研究结果.人与兔的粪便样品稀释后经离心分离岀细菌,通过DEAE弱阴离子交换色谱(30cm×2cmi.d)进一步除去杂物,将所得细菌的完整细胞样品直接上样高效液相阴离子交换色谱进行分离.色谱柱采用TSKgelSuperQ-TOYOPEARL650C强阴离子交换树脂,平衡缓冲液为0.02mol/L的哌嗪-HCl缓冲液(pH8.0),吸附于色谱柱上的细菌完整细胞用0～1mol/LNaCl线性梯度进行洗脱,洗岀液由260nm紫外吸收与光散射强度检测器检测.人与兔粪便细菌样品分别获得8个与5个组分,经镜检与培养实验确认为细菌,并且光散射仪洗脱峰峰面积同细菌计数结果具有线性相关性.实验表明,高效离子交换色谱能够应用于肠道菌群这样的复杂细菌体系的分离分析.
- 陈章捷时祥柱林娟刘树滔叶秀云陈躬瑞饶平凡
- 关键词：肠道菌群高效离子交换色谱
- 青枯菌HPLC分析中样品制备方法的优化被引量：6
- 2006年
- 采用高效离子交换色谱(HPLC)和紫外-激光光散射仪在线双检测系统研究了青枯菌细胞的制备方法对细胞生命活力和细胞表面特性的影响。通过青枯菌在不同悬浮缓冲液中菌数变化的统计、不同离心速度和洗涤次数对青枯菌色谱行为影响的分析以及不同色谱峰青枯菌细胞的透射电子显微镜观察,结果表明:采用5000r/min离心10min收集菌体细胞、超纯水(>16MΩ)悬浮和洗涤青枯菌、重复洗涤二次的样品制备方法,既可以避免培养基成分对青枯菌色谱行为造成的干扰,又可以保持青枯菌细胞的生命活力和细胞表面的原有性质。
- 林娟马骋刘树滔谢智饶平凡
- 关键词：青枯菌HPLC分析细胞活力
- 脱脂乳发酵体系中混合乳酸菌的HPLC研究被引量：2
- 2012年
- 研究了对脱脂乳发酵体系中Hansen DVS发酵后混合乳酸菌的HPLC分析过程中,不同色谱条件对分离效果的影响。确立了最佳色谱条件:样品上样于Toyopearl TSKgel SuperQ-650c强阴离子交换树脂柱,以浓度为0.02 mol/L哌嗪-HC1缓冲液平衡,洗脱盐浓度为1.0 mol/L的NaC1,洗脱梯度为0～0.75 mol/L的NaCl线性梯度洗脱30 min,再经浓度为0.75～1 mol/L的NaCl线性梯度洗脱10 min以及浓度为1 mol/L的NaC1洗脱10 min,流速定为1 mL/min;并对脱脂乳中不同培养时间的Hansen DVS混合乳酸菌进行了色谱表征。首次对脱脂乳发酵体系中混合乳酸菌的HPLC分析最佳色谱条件的建立,为深入研究发酵过程中乳酸菌混合菌群的动态变化提供了一种快速有效的方法。
- 张天亮王霞饶平凡
- 关键词：发酵乳酸菌HPLC色谱条件
