河南省医学科技攻关计划项目(200703066)
- 作品数：6 被引量：24H指数：5
- 相关作者：王军朱登纳范亚珍陈海侯艳艳更多>>
- 相关机构：郑州大学第三附属医院郑州大学第一附属医院郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织Foxgl基因表达的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察脐血源性神经干细胞（NSCs）移植对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑组织海马齿状回颗粒细胞下层（SGZ）Foxgl基因表达的影响。方法采用密度梯度离心法分离脐血单个核细胞，进行定向诱导培养，并通过免疫细胞化学法鉴定培养细胞表达神经干细胞表面标志。将7日龄SD大鼠150只随机分为假手术组、HIBD组和NSCs组，HIBD组和NSCs组分离并永久性结扎左侧颈总动脉，假手术组只分离不结扎左侧颈总动脉，也不进行缺氧，NSCs组于造模24h后经大鼠尾静脉行脐血源性神经干细胞移植，3组大鼠分别于造模后第3、7、14、21、28天共5个时间点取材，每个时间点各取10只大鼠，应用原位杂交法检测各组大鼠SGZFoxgl基因HIBD后各时间点的表达水平。
- 尚凤伟王军侯艳艳朱登纳范亚珍王俊辉张贞焕
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤神经干细胞新生大鼠
- 脐血单个核细胞诱导的神经干细胞中Foxg1和Nestin基因的表达及其相互关系被引量：6
- 2010年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外分离培养和定向诱导分化为神经干细胞(NSCs)的机制,观察培养细胞增殖分化情况,检测NSCs中Foxg1和Nestin基因mRNA的表达情况及相互关系。方法从脐血中分离出UBC-MNCs,用含人表皮细胞生长因子(hEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs增殖分化及形态学特点;免疫组织化学法检测培养细胞中神经细胞标志抗原巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记靶细胞,并测定增殖指数;RT-PCR法检测诱导前、培养3d、6d、9d、12d细胞中Foxg1和Nestin基因mRNA的表达变化。结果 UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原。Brdu标记细胞阳性率达90%。Foxg1mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导后逐渐升高(P<0.05),6d达高峰,后逐渐下降(P<0.05);NestinmRNA表达逐渐升高(P<0.05)。结论体外诱导培养可获得UBC-MNCs源性NSCs,表达神经细胞特异性标志物Nestin、NSE和GFAP蛋白,Foxg1和Nestin基因表达明显增强,是NSCs增殖分化的关键调控因子。脐血能够成为NSCs的新来源。
- 王军范亚珍陈海朱登纳吴值荣侯艳艳
- 关键词：NESTIN脐血神经干细胞细胞培养诱导分化
- 胰岛素样生长因子-1经鼻给药对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞的影响被引量：6
- 2012年
- 目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)经鼻靶向中枢给药对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠内源性神经干细胞(NSCs)的保护性治疗作用。方法取90只7日龄SD新生大鼠随机分为假手术组、模型对照组、IGF-1干预组。采用Rice法制作新生大鼠HIBD动物模型。模型对照组于缺氧缺血后1 h鼻腔递送9 g·L-1盐水0.1 mL;IGF-1干预组于缺氧缺血后1 h鼻腔递送IGF-1 2.5μg(溶于9 g·L-1盐水0.1 mL);假手术组仅分离颈总动脉,不结扎不行缺氧处理。术后1、3、5、7、14 d取其脑组织,采用单、双标免疫组织化学方法检测其侧脑室室管膜下区(SVZ)BrdU阳性细胞和巢蛋白(Nestin)阳性细胞、双阳性细胞的表达;并计算BrdU阳性细胞数、Nestin阳性细胞数及BrdU-Nestin双阳性细胞数;HE染色观察其脑损伤组织形态结构变化。结果模型对照组:术后1 d SVZ区BrdU、Nestin、BrdU-Nestin阳性细胞开始增加,第3天达高峰,术后7 d明显减少,术后14 d SVZ仅有少量细胞;IGF-1干预组:术后1 d SVZ 3种阳性细胞明显增多,术后3 d增加急剧,术后5 d达高峰,术后7 d开始减少,术后14 d减少明显,每个时间点IGF-1干预组均高于模型对照组(Pa<0.05);假手术组无明显增殖现象,与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论经鼻腔导入IGF-1对HIBD大鼠内源性NSCs具有明显的保护作用。
- 王军王留霞朱登纳尚凤伟
- 关键词：胰岛素样生长因子-1经鼻给药缺氧缺血性脑损伤内源性神经干细胞巢蛋白
- 脐血单个核细胞体外向神经干细胞的诱导及Foxg1基因的表达被引量：6
- 2010年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外向神经干细胞(NSCs)的诱导分化机制及NSCs中Foxg1基因表达的意义。方法从脐血中分离出UBC-MNCs,用含hEGF、bFGF和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs形态学及增殖分化特点;免疫组化法检测培养细胞中神经细胞标志抗原Nestin、NSE、GFAP的表达情况,BrdU标记靶细胞;RT-PCR法检测分离后、培养3、6、9、12 d细胞中Foxg1基因的表达。结果UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原。Foxg1 mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导后逐渐升高(P<0.05),6 d达高峰,之后逐渐下降(P<0.05)。结论体外定向诱导培养可获得UBC-MNCs源性NSCs,Foxg1基因是NSCs增殖分化关键调控因子,脐血可成为NSCs的新来源。
- 范亚珍王军陈海朱登纳吴值荣侯艳艳
- 关键词：脐血神经干细胞细胞培养诱导分化
- 人脐血源性神经干细胞中Nestin基因的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨人脐血单个核细胞(UBC-MNCs)体外定向诱导分化为神经干细胞(NSCs)的可行性,观察NSCs中Nestin基因mRNA的表达情况。方法采用密度梯度离心法从人脐血中分离出UBC-MNCs,用含人表皮细胞生长因子(hEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和B27因子的Neurobasal培养基联合诱导其向NSCs方向分化,观察NSCs增殖分化及形态学特点;免疫组织化学法检测培养细胞中神经细胞标志抗原巢蛋白Nestin、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;RT-PCR法检测诱导前后培养细胞中NestinmRNA的表达变化。结果 UBC-MNCs可定向诱导分化为神经元样细胞,形成典型NSCs克隆团,表达Nestin、NSE、GFAP标记抗原蛋白,诱导前细胞Nestin、NSE、GFAP的表达均非常低,诱导6d时Nestin阳性细胞数达高峰,然后开始下降,NSE、GFAP阳性细胞数逐渐增高。Brdu标记靶细胞阳性率达90%。Nestin mRNA在诱导前细胞中低表达,诱导3d、6d、9d、12d时表达逐渐升高(P<0.05)。结论体外诱导培养可获得UBC-MNCs源性NSCs,Nestin基因是NSCs增殖分化的关键调控因子,在UBC-MNCs诱导分化后表达明显增强。脐血能够成为NSCs的新来源。
- 陈海王军范亚珍朱登纳吴值荣侯艳艳
- 关键词：NESTIN脐血神经干细胞诱导分化
- 脐血源性神经干细胞移植对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠的治疗作用被引量：5
- 2010年
- 目的探讨人脐血源性神经干细胞(NSCs)移植治疗缺血缺氧性脑损伤(HIBD)新生大鼠的可行性。方法 7 d龄大鼠随机分成NSCs移植(A)组、HIBD模型对照(B)组和正常对照(C)组,每组40只。从人脐血中分离出单个核细胞(UBC-MNCs),定向诱导分化出NSCs并行溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)标记,经尾静脉移植到HIBD新生大鼠体内。免疫组化法检测移植后1、7、142、1 d各组动物脑组织易损区室管膜前下区(SVZa)神经巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、BrdU染色阳性细胞表达情况及移植细胞在脑内的存活、迁移和分化情况。结果 UBC-MNCs可体外培养并定向诱导分化为NSCs,A组SVZa区NSE、BrdU阳性细胞表达量较B组均增高(P<0.01);移植早期Nestin增高,移植后14 d达峰,以后逐渐下降(P<0.01);A组GFAP表达较B组降低,大鼠损伤区面积显著减小(P<0.01)。结论移植的NSCs可在HIBD新生大鼠SVZa存活、增殖及分化,促进组织结构恢复和细胞功能重建,NSCs移植是治疗HIBD的一种新途径。
- 朱登纳张博爱王军范亚珍贾延劼陈海牛国辉
- 关键词：神经干细胞细胞移植缺血缺氧性脑损伤
