卫生部临床学科重点项目(2007-2010)
- 作品数：6 被引量：40H指数：4
- 相关作者：侯明王谦冀学斌彭军杨晓静更多>>
- 相关机构：山东大学中国医学科学院肿瘤医院复旦大学更多>>
- 发文基金：卫生部临床学科重点项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 人源化抗血小板膜糖蛋白Ⅵ单链抗体的研究
- 2009年
- 目的用噬菌体抗体库技术研究抑制血小板聚集功能的人源化抗血小板膜糖蛋白（GP）Ⅵ单链抗体。方法从特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血浆中用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA）技术和血小板聚集实验筛选出抑制血小板聚集的抗血小板GPⅥ自身抗体。从抗GPⅥ自身抗体阳性患者外周血淋巴细胞中提取mRNA，用RT—PCR扩增出人免疫球蛋白重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因片段，用连接DNA将VH和VL连接成单链抗体（ScFv）基因片段。用限制性内切酶SfiⅠ／NotⅠ酶切ScFv基因片段后克隆到噬菌体载体pHEN2，然后转化大肠杆菌TGI。用辅助噬菌体M13K07援救转化后的TG1，产生单链抗体。用抗原吸附法经过5轮吸附→洗脱→富集，得到纯化的抗GPⅥ单链抗体，并研究其对血小板聚集功能的影响。结果806例慢性ITP患者中11例（1．36％）血浆中抗GPⅥ自身抗体阳性，2例（0．24％）明显抑制胶原诱导的血小板聚集功能。扩增出380—400bp大小的VH和VL基因，用连接肽（Gly4Set）3成功地连接成约800bp大小的ScFv基因片段。将ScFv克隆到pHEN2并转化大肠杆菌TG1后，形成4．1×10^7个克隆。用辅助噬菌体M13K07援救TG1后产生的抗体滴度为2．62×10^10 cfu／ml。亲和层析后得到的纯化抗体可抑制胶原诱导的血小板聚集而对二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集无明显影响。结论利用噬菌体抗体库技术表达的人源化抗血小板GPⅥ抗体ScFv片段可抑制血小板聚集功能。
- 冀学斌侯明张春青石艳彭军初晓霞马道新李丽珍
- 关键词：血小板聚集噬菌体抗体库技术
- 胰腺癌淋巴结转移的特性及手术治疗被引量：6
- 2014年
- 淋巴结转移是胰腺癌转移的主要方式,也是影响预后的重要因素。本文回顾胰头癌淋巴结转移发生的可能途径和转移特性,着重讨论胰头癌淋巴结手术清扫的范围和利弊,目前有关淋巴结清扫的争议、详尽的淋巴结获取分析和准确度肿瘤分期以及更积极的多学科肿瘤治疗是将来胰腺外科努力的发展方向。
- 傅德良
- 关键词：胰腺癌淋巴结转移手术治疗
- 用图像引导技术提高胸腹部肿瘤大分割放疗的治疗精度被引量：20
- 2008年
- 目的探讨图像引导放疗技术应用于胸腹部肿瘤大分割放疗以提高治疗精度，测量其摆位误差并确定由内靶体积（ITV）外放产生计划靶体积（PTV）的间距。方法人组24例胸腹部肿瘤病例，采用大分割放疗，每次治疗前行锥形束CT扫描，在线校正摆位误差并记录误差值。统计校正前后的误差数据，采用二参数法计算由ITV外扩产生PTV间距。结果校正前摆位平移误差在左右（x）、头脚（y）和腹背（z）方向上分别为（2．1±2．0）、（3．9±3．2）、（2．9±2．8）mm，校正后分别为（0．8±0．7）、（0．9±0．7）、（0．9±0．7）mm；外扩间距校正前分别为5．6、10．2、7．7mm，校正后分别为2．1、2．3、2．3mm。旋转角度误差校正前后无变化，校正前头脚方向误差大于左右和腹背方向，校正后3个方向误差之间无差别。结论图像引导放疗通过在线校位能有效减小摆位误差并能观测肿瘤及周围组织器官位移和变形，计算在线校位后的靶区外放间距可以为PTV确定提供参考。
- 张寅张连胜肖建平翟万聪李明辉戴建荣李晔雄
- 关键词：图像引导放疗锥形束CT摆位误差
- IL-18及其受体在特发性血小板减少性紫癜患者Th1类细胞优势应答中的作用被引量：8
- 2009年
- 目的探讨白细胞介素18（IL-18）及其受体（IL-18R）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者Th1类细胞因子优势应答中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测15例活动期和18例缓解期ITP患者外周血单个核细胞（PBMNC）中转录因子T-bet和GATA-3mRNA的表达；应用ELISA法检测血浆中IL-18的变化；应用流式细胞术检测CD3^＋细胞和淋巴细胞表面IL-18R的表达。13名健康志愿者为正常对照。结果ITP活动期患者PBMNC中T-betmRNA表达水平（0．069±0．013）明显高于对照组（0．019±0．010）（P〈0．05），而GATA-3mRNA的表达水平（0．002±0．001）明显低于对照组（0．005±0．002）（P〈0．05）；血浆IL-18和CD3^＋细胞表面IL-18R表达水平较ITP缓解期患者和对照组显著增高。ITP缓解期患者T-bet与GATA-3mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（P值均〉0．05），T-bet／GATA-3比例基本恢复正常，血浆中IL-18和CD3^＋细胞表面IL．18R的表达水平也基本恢复正常。结论ITP活动期患者表现为Th1优势应答，T-bet／GATA-3比例明显失衡，T-bet／GATA-3比例可作为ITP患者Thl类细胞极化的敏感指标；ITP活动期患者IL一18和IL-18R表达上调，可能为ITP患者的治疗提供一个新的治疗靶点。
- 王谦杨晓静单宁宁侯明冀学斌王春燕朱效娟杨蕾张晓琳彭军马道新石艳
- 关键词：紫癜转录因子T-BET转录因子GATA-3白细胞介素-18白细胞介素18
- 免疫性血小板减少症患者外周血白细胞介素-18及其受体α链的表达被引量：4
- 2010年
- 目的通过检测新诊断的免疫性血小板减少症（ITP）患者用药前外周血IL-18和CD3＋细胞表面IL-18受体仪链（IL-18Rα）的表达，探讨IL-18和IL-18Rα在ITP发病中的作用机制。方法以我院门诊及住院治疗的18例新诊断的11TP为研究对象，应用ELISA检测血浆中IL-18的含量，采用流式细胞术分析CD3＋细胞和总淋巴细胞表面IL-18Rα的表达，应用RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMCs）中IL-18mRNA、转录因子T-betmRNA和GATA-3mRNA的表达。选择15例与试验组匹配的健康志愿者作为正常对照组。结果新诊断的ITP患者血浆中IL-18的含量为（468．57±141．62）pg／ml，显著高于对照组（P〈0．05）；CD3细胞表面及淋巴细胞表面IL-18Rα的表达分别为（8．50±3．16）％和（9．16±2．98）％，两者均显著高于对照组（P〈0．05）；ITP患者PBMCs中IL-18mRNA、T-betmRNA和GATA-3mRNA的表达分别为0．12±0．02、0．07±0．02和0．0039±0．0014，IL-18mRNA和T-betmRNA显著高于对照组（P〈0．05），而GATA-3mRNA显著低于对照组（P〈0．05），T-bet／GATA-3比例显著增高。结论IL-18与ITP的发生发展有关，本研究从蛋白和基因水平说明IL-18和IL-18Rα可能上调ITP患者Th1类细胞的表达，通过调整T—bet／GATA-3的比例，恢复Th1／Th2的平衡，有望为ITP的治疗提供一个新的治疗策略。
- 王谦展凤霞单宁宁侯明杨晓静陆楠王洪春张晓琳冀学斌纪春岩
- 关键词：转录因子白细胞介素18免疫性血小板减少症
- 前瞻性评价单克隆抗体俘获血小板抗原技术对免疫性血小板减少症的诊断价值被引量：3
- 2010年
- 目的 评价单克隆抗体俘获血小板抗原技术（MAIPA）对免疫性血小板减少症（ITP）的诊断价值,以及对免疫性和非免疫性血小板减少的鉴别诊断价值.方法 以来自14家医院的321例血小板减少患者为研究对象,男118例,女203例,应用改良MAIPA试验双盲法检测患者血小板膜糖蛋白特异性自身抗体（抗-GPⅡb/Ⅲa和抗-GP Ⅰ b/Ⅸ）,客观评价该试验在ITP诊断中的敏感性和特异性,了解ITP患者血小板特异性抗体浓度与血小板数量的相关性以及地塞米松治疗后抗体浓度的变化.结果 抗-GPⅡb/Ⅲa、抗-GP Ⅰ b/Ⅸ、抗-GPⅡb/Ⅲa联合抗-GP Ⅰ b/Ⅸ诊断ITP的敏感性分别为39.75%、32.64%、55.23%,特异性分别为97.56%、93.94%、92.68%,阳性预测值分别为97.94%、93.98%、95.65%,阴性预测值分别为35.71%、32.35%、41.53%,总有效率分别为54.51%、48.29%、64.80%;ITP患者血小板特异性抗体阳性率显著高于非免疫性血小板减少患者;抗体阳性患者的血小板数量显著低于阴性患者,ITP患者血小板特异性抗体水平[吸光度（A）值]与血小板数量呈负相关;激素治疗有效的ITP患者抗-GPⅡb/Ⅲa或（和）抗-GP Ⅰ b/Ⅸ转阴或抗体水平降低.结论 MAIPA试验对ITP具有较高的诊断价值,对ITP患者的疗效也具有指导意义,可作为IFP和非免疫性血小板减少的鉴别诊断依据.
- 王谦展凤霞侯明丁娟朱媛媛秦平彭军
- 关键词：血小板减少自身抗体单克隆抗体
