深圳市科技计划项目(200902) 作品数:8 被引量:58 H指数:3 相关作者: 刘志刚 刘晓宇 李荔 李盟 朱清仙 更多>> 相关机构: 深圳大学 南昌大学 蚌埠医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
谷跗线螨交叉反应性变应原的定位 被引量:2 2011年 为明确谷跗线螨Tarsonemus granarius交叉反应性变应原在体内的定位,制作谷跗线螨石蜡切片,HE染色后光镜观察其内部形态结构;选用对尘螨过敏患者的阳性血清特异性IgE抗体作探针,免疫组织化学染色分析其交叉反应性抗原存在位置。HE染色显示谷跗线螨的消化系统占据其体腔的大部分,包括口咽部、中肠、后肠、肛门和唾液腺等结构。免疫组织化学染色显示谷跗线螨的口咽部、中肠、肠内容物、肠壁及生殖腺等均有阳性反应。谷跗线螨体内存在可诱发人体IgE抗体的变应原,变应原在其体内的分布格局与屋尘螨Dermatophagoides pteronyssinus基本一致。 赵学影 赵振富 孙新 刘志刚 吕艳思关键词:跗线螨科 变应原 抗原定位 HE染色 交叉反应性 谷跗线螨扫描电镜的形态学观察 2013年 目的用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察谷跗线螨(Tarsonemus granarius)的体表形态特征。方法从空调滤网灰尘中采集谷跗线螨,在连续变倍体视镜下清洗处理活螨后,用SEM观察其外部形态特征。结果用SEM观察谷跗线螨的体表形态结构,明确了谷跗线螨颚体、背板、基节板、表皮内突、刚毛等外部形态结构特点。结论用SEM清晰地观察到谷跗线螨的体表形态,对螨类鉴别及其变应原等的研究有重要的意义。 赵学影 赵振富 孙新 刘志刚关键词:跗线螨科 扫描电镜 形态学 中国不同地理区域室内尘螨的调查研究 被引量:37 2010年 目的为了解我国不同地理区域内床尘螨的种类分布及物种丰富度。方法使用真空吸尘器分别对我国南部(广州和深圳,n=172)、中部(上海和南昌,n=126)和北部(北京和沈阳,n=112)地区的不同居室类型(家庭、宾馆和学生寝室)的床尘进行了采集、尘螨形态学鉴定和统计分析。结果灰尘样品尘螨阳性率59%(242/410),分离出螨8467只。分属于11科21属。麦食螨科的屋尘螨和粉尘螨为我国室内优势螨种,其中屋尘螨占总螨数的百分比为:南部:27.8%,中部:46.6%,北部:38,2%。粉尘螨为:32.3%、28.0%和23.1%。在非麦食螨科螨类中,热带无爪螨在我国南部的床尘中具有较高的数量(17.4%)。其它占有1%以上的螨有腐食酪螨(南部:1.0%,北部:1.2%)和纳氏皱皮螨(南部:5.8%),马六甲肉食螨(南部:3.7%,中部:1.2%,北部:1.2%),普通肉食螨(中部1.2%),阳单梳螨(南部2.2%),基氏蠊螨(中部1.2%)等,不论是螨的阳性率(χ2=29.6,P<0.001)还是螨的密度(χ2=41.8,P<0.001),我国南部和中部地区都要高于北部地区。环境因子和螨致敏危险性之间的相关性分析表明,南部地区和中部地区床尘螨的致敏危险性分别为北部地区的7.4倍和8.6倍(P<0.001)。家庭和学生寝室床尘中螨的致敏危险性要显著高于宾馆。随着楼层的增高,螨的致敏危险性则显著下降(P=0.009)。结论初步查明我国不同地理区域室内尘螨的种类和分布,为尘螨过敏性疾病的防治提供依据。 刘晓宇 吴捷 王斌 李盟 冉丕鑫 刘志刚低致敏原应用于特异性免疫治疗的研究进展 被引量:2 2011年 过敏性疾病是21世纪重点防治的3大疾病之一,目前仍无有效方法对患者达到治愈的目的.特异性免疫治疗(SIT)是针对过敏性疾病唯一的对因治疗方法,传统的SIT具有很大的副作用,开发低致敏原疫苗将对SIT的安全性方面有着十分重要的意义. 刘志刚 易海涛 夏立新关键词:过敏性疾病 疫苗 标准化粉尘螨疫苗免疫治疗哮喘小鼠肺组织病理变化动态观察 被引量:2 2011年 目的对标准化粉尘螨疫苗免疫治疗哮喘小鼠肺组织的病理变化进行观察,以进一步探讨标准化粉尘螨疫苗免疫治疗疗效。方法利用粉尘螨抗原建立哮喘小鼠模型,将32只小鼠分为4组:对照组、哮喘组、低剂量治疗组、高剂量治疗组。末次激发后24h,处死动物,取小鼠肺组织,分别固定、包埋和切片,用光镜、电镜观察肺组织病理变化。结果光镜下哮喘组相对于空白组,肺组织结构紊乱、充血以及水肿,有大量炎症细胞浸润;高剂量粉尘螨疫苗治疗组较哮喘组肺组织病理变化有明显改善,炎性细胞浸润显著减少,水肿较轻。而低剂量粉尘螨疫苗组肺组织仍可见明显炎性细胞浸润和病变,但较哮喘组病理变化为轻。电镜观察显示:哮喘组肺组织结构紊乱,有炎性细胞浸润,而高剂量粉尘螨疫苗治疗组Ⅰ型和Ⅱ型肺泡细胞结构基本正常、清晰。结论粉尘螨疫苗能有效减轻哮喘小鼠肺组织的病理变化,减少炎症细胞浸润,且高剂量粉尘螨疫苗较低剂量治疗疗效更为显著,为临床过敏性哮喘尘螨脱敏治疗奠定理论基础。 刘晓宇 闫浩 朱清仙 李荔 刘志刚关键词:哮喘小鼠 免疫治疗 病理变化 超微结构观察 标准化粉尘螨疫苗免疫治疗哮喘小鼠气道炎症的实验研究 2011年 目的建立小鼠粉尘螨过敏性哮喘模型,探讨标准化粉尘螨疫苗免疫治疗的疗效及机理。方法 32只Balb/c小鼠随机分为阴性对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、粉尘螨疫苗低剂量治疗组(C组)、粉尘螨疫苗高剂量治疗组(D组)。A组始终给予生理盐水,B、C、D组腹腔注射50μg粉尘螨提取液和2 mg Al(OH)3免疫小鼠致敏。然后分别用PBS(50μl)、100μg、1 mg的粉尘螨粗提液皮下注射进行免疫治疗,各组用粉尘螨抗原(50μg/50μl)滴鼻激发,末次激发后24 h用气道高反应仪检测小鼠气道反应性;处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)、血清以及取出小鼠的脾细胞进行后续检测。结果 B组、C组肺泡灌洗液中细胞总数和嗜酸性细胞数显著升高,气道反应性明显增强,两组相比无显著性差异。与之相比,D组气道反应性明显下降,肺泡灌洗液中细胞总数和嗜酸性细胞数显著降低(P<0.01)、Der.f特异性抗体IgE显著降低、支气管肺泡灌洗液上清中IL-4降低(P<0.05),IL-10、IFN-r的含量显著增高(P<0.05),细胞增殖反应显示D组受抑制。结论粉尘螨疫苗可以有效抑制哮喘模型肺部炎症变化和降低气道高反应性,其疗效与剂量有关,机制可能与调节Th1/Th2平衡有关。 刘晓宇 闫浩 李盟 李荔 刘志刚 喻海琼关键词:粉尘螨 疫苗 哮喘 免疫治疗 粉尘螨疫苗免疫治疗过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜的电镜观察 被引量:12 2011年 建立了粉尘螨小鼠过敏性鼻炎模型,观察粉尘螨疫苗免疫治疗鼻黏膜超微结构的变化,探讨粉尘螨疫苗免疫治疗的疗效.将24只BALB/c小鼠随机分为阴性对照组(A组)、过敏性鼻炎模型组(B组)、粉尘螨疫苗治疗组(C组),按本室常规方法建立尘螨过敏性鼻炎小鼠动物模型,观察抓鼻、流涕、喷嚏等症状,末次激发24 h后,麻醉小鼠,眼窝取血,ELISA法检测血清中Der f特异性抗体IgE和IgG2a;取鼻黏膜组织固定,切片、电镜观察.结果表明:建模后B组、C组均出现典型的喷嚏、流涕、抓鼻症状,但粉尘螨疫苗免疫治疗组较模型组症状明显减轻,正常对照组无任何行为异常.与B组相比,C组血清中Der f特异性抗体IgE显著降低(P<0.05),而B组和C组IgG2a的含量较A组显著增高(P<0.01).电镜观察:(1)正常对照组:嗅黏膜上皮细胞,表面有大量纤毛,排列整齐;胞质内细胞器丰富.(2)过敏性鼻炎组:嗅黏膜上皮细胞肿胀,嗅细胞表面的纤毛减少或消失,细胞排列紊乱、细胞间有炎症细胞浸润,细胞器退变、空泡化,核变形不规则、固缩.(3)粉尘螨疫苗免疫治疗组:嗅黏膜纤毛排列较整齐,粗细较均匀,纤毛密度较正常对照组低,线粒体致密,与空白对照组相比数量增多.粉尘螨疫苗可以有效改善过敏性鼻炎的症状,抑制过敏性鼻炎鼻黏膜炎症变化. 刘晓宇 张强 吉坤美 李荔 刘志刚关键词:免疫治疗 过敏性鼻炎 鼻黏膜 电镜观察 舌下含服粉尘螨疫苗免疫治疗法对哮喘小鼠树突状细胞及NF-κB的影响 被引量:4 2011年 目的通过对哮喘模型小鼠舌下含服粉尘螨疫苗进行治疗,研究治疗前后树突状细胞(dendritic cell,DC)和NF-κB在颌下淋巴结和肺部的变化,比较高剂量疫苗和低剂量疫苗对哮喘小鼠的治疗疗效。方法采用常规方法制备舌下含服粉尘螨疫苗。28只BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常组(A组)、哮喘模型组(B组)、粉尘螨高剂量治疗组(C组)、粉尘螨低剂量治疗组(D组),每组7只。检测小鼠气道高反应性,观察支气管肺胞灌洗液(BALF)中细胞计数和分类,肺组织HE染色观察小鼠肺部炎症状况;通过免疫组织化学染色和体视学测量观察各组小鼠肺组织NF-κB阳性细胞的变化和颌下淋巴结33D1阳性DC的表达。结果 C组BALF中嗜酸性细胞计数、肺组织炎症细胞浸润较B组显著减少(P<0.05),气道高反应性下降(P<0.01)。C、D组哮喘小鼠颌下淋巴结33D1阳性DC和肺部NF-κB阳性细胞的数密度、体密度、表面积密度均下降,C组比D组下降更明显(P<0.01)。结论高剂量舌下含服粉尘螨疫苗治疗哮喘小鼠有显著疗效,与DC的免疫耐受和NF-κB的下调密切相关。 刘晓宇 蔡科军 刘志刚 朱清仙关键词:哮喘模型 舌下含服 树突状细胞 NF-ΚB 免疫耐受 小鼠