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国家高技术研究发展计划(2006AA0224C4)
作品数:
2
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高基民
张振
许晓玲
李金龙
马磊
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高基民
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链亲和素标记的白细胞介素4双功能融合蛋白锚定治疗小鼠浅表性膀胱癌
被引量:3
2012年
目的探讨链亲和素标记的白细胞介素4(IL-4-SA)双功能融合蛋白治疗小鼠浅表性膀胱癌的效果。方法制备IL-4-SA双功能融合蛋白,测定其体外生物学活性。建立小鼠浅表性膀胱癌模型,膀胱经生物素化后给予IL4-SA灌注治疗,观察小鼠生存期,并以链亲和素标记的绿色荧光蛋白(GFP—SA)+IL-4和磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组。检测各组小鼠脾细胞的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性和CD8+肿瘤浸润淋巴细胞。结果IL4.SA能够锚定于生物素化的膀胱表面达5d以上。在MIM9细胞种植后的第80天,PBS组小鼠全部死亡,GFP-SA+IL-4组小鼠存活2只,而IL4-SA组小鼠存活5只。在肿瘤特异性杀伤实验中,在效靶比为1:1、25:1、50:1时,PBS组小鼠的CTL杀伤率分别为(3.3±0.6)%、(7.3±0.6)%和(12.7±2.1)%,GFP.SA+IL4组小鼠的CTL杀伤率分别为(4.3±0.6)%、(9.0±1.0)%和(14.3±1.5)%,而IL4-sA组小鼠的CTL杀伤率分别为(11.3±1.2)%、(22.7±1.5)%和(31.0±3.0)%,IL4-SA组与PBS组和GFP—SA+IL-4组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。CD8+淋巴细胞检测结果显示,PBS组和GFP.SA+IL4组的肿瘤组织内仅有少量的CD8+淋巴细胞浸润,而IL-4-SA组则有较多的CD8+淋巴细胞浸润。结论IL4-SA锚定膀胱表面能够产生强烈、持久的免疫应答反应,有可能成为浅表性膀胱癌的一种新灌注治疗方法。
张振
许晓玲
马磊
李金龙
胡志明
高基民
关键词:
膀胱肿瘤
白细胞介素4
链亲和素
融合蛋白
小鼠
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子修饰MB49制备膀胱肿瘤疫苗及应用
2011年
目的链亲和素标记的细胞因子锚定MIM9细胞和成瘤小鼠膀胱,探讨锚定率、锚定量与时间的关系。方法MB49细胞与链亲和素标记的绿色荧光蛋白(SA—GFP)体外锚定后,在荧光显微镜下观察;建立小鼠原位表浅膀胱癌模型后,实验组膀胱灌注锚定链亲和素标记的粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(SA—GM—CSF);对照组小鼠不锚定直接膀胱灌注SA—GM—CSF。取膀胱作冰冻切片免疫组织化学分析。结果MB49细胞基本被SA—GFP锚定,锚定率为98.78%;冰冻切片免疫组织化学显示实验组膀胱黏膜有阳性显色,以第1天最浓,以后逐日变淡,至第7天仍可见较明显染色;对照组膀胱黏膜无阳性显色。结论链亲和素标记的细胞因子可以锚定在细胞表面,且锚定效率高、保留时间长。
梁中锟
张琳
谭万龙
高基民
陈忠
黄鑫
关键词:
膀胱肿瘤
疫苗
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
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