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国家自然科学基金(30471450)

作品数：15 被引量：81H指数：6
相关作者：王中全崔晶秦银霞来利红王睿更多>>
相关机构：郑州大学河南大学湖南省寄生虫病防治研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金河南省杰出人才创新基金更多>>
相关领域：医药卫生农业科学更多>>

文献类型

  • 15篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 15篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 16篇旋毛虫
  • 6篇血清
  • 6篇肉汁
  • 6篇小鼠
  • 5篇ELISA
  • 4篇抗原
  • 3篇蛋白
  • 3篇重组蛋白
  • 3篇免疫层析
  • 2篇蛋白鉴定
  • 2篇旋毛虫病
  • 2篇血清学
  • 2篇血清学诊断
  • 2篇原核表达
  • 2篇镜检
  • 2篇镜检法
  • 2篇抗体
  • 2篇抗体水平
  • 2篇抗原性
  • 2篇克隆

机构

  • 16篇郑州大学
  • 2篇河南大学
  • 1篇商丘医学高等...
  • 1篇湖南省寄生虫...

作者

  • 15篇崔晶
  • 15篇王中全
  • 7篇秦银霞
  • 6篇来利红
  • 4篇王睿
  • 4篇王洁
  • 3篇王来
  • 2篇任道锋
  • 2篇王强
  • 1篇韩化敏
  • 1篇逯莉
  • 1篇侯小君
  • 1篇何永康

传媒

  • 5篇中国人兽共患...
  • 3篇中国寄生虫学...
  • 3篇中国病原生物...
  • 2篇免疫学杂志
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇热带病与寄生...

年份

  • 1篇2009
  • 7篇2008
  • 6篇2007
  • 1篇2006
  • 1篇2005
共 15 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用的研究被引量：5
2009年
目的探讨旋毛虫Ts21重组蛋白的免疫诊断价值及免疫保护作用。方法应用旋毛虫Ts21重组蛋白ELISA(Ts21-ELISA)与肌幼虫ES抗原ELISA(ES-ELISA)对旋毛虫病与其他寄生虫病患者血清及5种旋毛虫(T1、T2、T3、T4和T7)感染小鼠血清进行检测,并观察不同剂量旋毛虫感染小鼠后不同时间的血清抗体水平。将Ts21重组蛋白皮下注射免疫小鼠(20μg/只,免疫3次,每次间隔10d),末次免疫后10d,每只小鼠用300条旋毛虫肌幼虫经口攻击感染,3.5d和42d后剖杀,观察肠道成虫与肌幼虫数并计算减虫率。结果Ts21-ELISA检测旋毛虫病、并殖吸虫病、囊尾蚴病及棘球蚴病患者血清的抗体阳性率分别为94.7%(18/19)、15.8%(3/19)、9.1%(1/11)和7.7%(1/13),与血吸虫病、华支睾吸虫病患者血清及健康人血清无交叉反应;Ts21重组蛋白与ES抗原ELISA检测旋毛虫病患者血清抗体的敏感性与特异性差异均无统计学意义(χ2=0,P>0.05;χ2=0.358,P>0.05)。Ts21重组蛋白与ES抗原检测T1感染小鼠血清的敏感性差异无统计学意义(χ2=0.104,P>0.05),与T2、T3、T4、T7感染小鼠血清的交叉反应率明显低于ES抗原(χ2=17.069,P<0.05)。小鼠感染300条旋毛虫后4周,应用Ts21-ELISA检测的血清抗体阳性率为100%(10/10);小鼠感染5条旋毛虫后6周,血清抗体阳性率为100%(10/10)。Ts21重组蛋白免疫小鼠用旋毛虫攻击感染后3.5d和42d,肠道成虫与肌幼虫减虫率分别为42.71%和49.8%。结论Ts21重组蛋白可用于旋毛虫病的血清学检测,但不能忽视与并殖吸虫病、囊尾蚴病及棘球蚴病患者血清的交叉反应。
王睿王中全崔晶
关键词：旋毛虫ELISA血清学诊断免疫保护
旋毛虫抗原分子克隆及其T细胞和B细胞表位预测被引量：11
2007年
目的克隆旋毛虫肌幼虫肘，21000抗原蛋白基因（Ts21），预测其T细胞和B细胞表位。方法旋毛虫（河南地理株）感染小鼠后收集肌幼虫，提取肌幼虫总RNA，应用RT-PCR技术获取目的基因Ts21，构建重组质粒pUC18—Ts21并测序，应用生物信息分析软件预测其T细胞和B细胞表位。结果成功构建克隆载体pUC18-Ts21。旋毛虫M21000抗原的T细胞表位位于第9—23、135—150位氨基酸位点；B细胞表位位于第31-35、53—56、98—104、124—130、133—157、160-172位氨基酸位点。结论成功克隆了旋毛虫河南地理株肌幼虫肘，21000抗原的编码基因，T细胞和B细胞表位预测结果表明该抗原蛋白具有较好的抗原性，可作为旋毛虫病免疫诊断和预防的候选抗原。
王来崔晶王中全王强来利红秦银霞任道锋
关键词：旋毛虫分子克隆T细胞表位B细胞表位
小鼠实验感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化被引量：7
2007年
目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组(每组10只),分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染300条幼虫,感染后1～6周每周尾部静脉采血,6周后每2周尾部静脉采血,至感染后20周,用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清中抗旋毛虫IgG抗体水平。结果小鼠感染旋毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫后3～5周,血清IgG抗体水平快速升高,至感染后第8周达高峰,此后旋毛虫和乡土旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平缓慢下降,布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平迅速下降;小鼠感染伪旋毛虫后3～5周血清IgG抗体水平快速升高,至第16周达高峰,之后缓慢下降。5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平差异具有显著性(P<0.05)。结论5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平和动态变化不同;旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染的血清学诊断及流行病学调查。
王洁崔晶王中全
关键词：旋毛虫ELISA排泄分泌抗原小鼠
免疫层析试纸条检测轻度感染小鼠肉汁抗旋毛虫抗体的研究被引量：2
2008年
目的观察免疫层析试纸条对轻度感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条。将70只雄性昆明小鼠随机分为7组（每组10只），每组分别经口感染30、25、20、15、10、5、3条旋毛虫幼虫，感染后6周用试纸条进行血清及肉汁抗体检测，并与ELISA、镜检法及消化法的检测结果进行比较。结果30、25、20、15、10条旋毛虫幼虫感染的小鼠，试纸条与ELISA的血清及肉汁抗体阳性率均为100（10／10）,镜检法与消化法的幼虫检出率均为100％（10／10）。5条旋毛虫感染的10只小鼠，镜检法和消化法的幼虫检出率分别为70％（7／10）和100％（10／10），消化法检查时10只小鼠的每克肌肉虫荷为0．88～3．14条幼虫（平均为1．58条），试纸条与ELISA检测时的血清及肉汁抗体阳性率均为100％（10／10）。3条旋毛虫感染的10只小鼠，4种方法检测时均为阴性。结果表明，试纸条检验肉类中旋毛虫的敏感性与ELISA和消化法相同，且明显高于镜检法（P〈0．05）。低剂量旋毛虫感染小鼠后6周的肉汁抗体水平与感染剂量呈正相关（P〈0．05），肉汁与血清抗体水平均具有相关性（P〈0．05）。结论每克小鼠肌肉仅含0．88条旋毛虫幼虫时也可被试纸条检出，试纸条可用于轻度感染肉类中旋毛虫检疫的初筛。
王中全王洁崔晶秦银霞来利红
关键词：旋毛虫镜检法消化法肉汁小鼠
旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平的研究被引量：2
2007年
目的观察旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷(larvae per gram diaphragm,lpgd)与血清及肉汁抗体水平的关系。方法将32只雄性昆明小鼠随机分成4组(每组8只),每只分别感染50(A组)、100(B组)、300(C组)、500条(D组)旋毛虫幼虫,感染后42d剖杀,收集血清及肉汁,观察膈肌虫荷并用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清及肉汁抗体。另将50只小鼠随机分成5组(每组10只),每组分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染500条幼虫,感染后42d剖杀,观察感染不同种旋毛虫小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平。结果感染旋毛虫的A、B、C、D4组小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平均无相关性(P>0.05),但与感染剂量呈正相关(P<0.05),每组小鼠的血清与肉汁抗体水平也均具有相关性(P<0.05)。5种旋毛虫感染小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平相比均无相关性(P>0.05),但血清与肉汁抗体水平相比均具有相关性(P<0.05)。旋毛虫感染小鼠的血清及肉汁抗体水平明显高于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫)感染小鼠的血清和肉汁抗体水平(P<0.05)。结论旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染小鼠血清及肉汁中抗旋毛虫抗体的检测。
崔晶来利红王中全
关键词：旋毛虫肉汁血清小鼠
实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的研究被引量：6
2007年
目的观察小鼠感染旋毛虫后不同时间肉汁中抗体水平的变化及其与血清抗体水平的相关性。方法将288只昆明小鼠随机分成3组(每组96只):轻度(A组)、中度(B组)及重度(C组)感染组,每鼠分别经口感染100、300、500条旋毛虫幼虫,感染后各组每周或隔周随机剖杀8只小鼠,收集血清和肉汁,用旋毛虫肌幼虫排泄物分泌抗原(ES抗原)ELISA检测血清及肉汁中抗体水平;另取30只小鼠,每鼠感染500条旋毛虫幼虫,感染后6周剖杀,制备肉样,用ELISA检测4℃及-20℃保存不同时间后的肉汁中抗体动态水平。结果轻度、中度和重度感染组小鼠分别在感染后4、3和3周开始从肉汁中检出抗体,抗体阳性率分别为87.5%、50%和87.5%;3组小鼠的肉汁抗体阳性率均随感染后时间的延长而逐渐升高,分别在感染后6、4和4周达100%,抗体水平均在感染后8周达高峰,吸光度(A490值)分别为0.43、0.49及0.52,之后肉汁中抗体水平稍有下降,但感染后第18周抗体阳性率仍均为100%,A490值分别为0.35、0.41及0.46。3组小鼠感染后不同时间肉汁与血清抗体水平均具有相关性(r100=0.940,r300=0.970,r500=0.983,P<0.05)。感染旋毛虫小鼠肉样在4℃保存7d和1d的抗体水平A490值均为0.53(F=0.250,P>0.05)。在-20℃保存8周和1周的肉汁抗体水平A490值分别是0.46和0.50,保存8周的肉汁抗体水平与1周的相比无明显下降(F=2.273,P>0.05);虽然保存10周的肉汁A490值已降至0.43,与保存1周的相比差异有统计学意义(F=15.675,P<0.05),但抗体阳性率仍为100%并持续至实验结束时(保存20周)。结论动物死亡或屠宰后不能采集血清时,可从新鲜、冷藏及冷冻胴体采集肉汁代替血清进行抗旋毛虫抗体的检测。
王中全来利红崔晶
关键词：旋毛虫肉汁血清ELISA小鼠
旋毛虫抗原基因Ts21的原核表达与重组蛋白鉴定被引量：6
2007年
目的原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr)21000抗原基因(Ts21)并对重组蛋白进行纯化和抗原性鉴定。方法将旋毛虫抗原基因Ts21亚克隆入原核表达载体pMAL-c2X,构建重组表达质粒pMAL-c2X-Ts21,经酶切鉴定正确后转化大肠埃希菌TB1,以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。亲和层析法纯化表达产物。应用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定重组蛋白的抗原性。将重组蛋白免疫小鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体滴度,免疫荧光检测(IFA)确定Ts21蛋白在肌幼虫体内的分布。结果SDS-PAGE结果显示,表达产物为Mr63500的重组融合蛋白,IPTG诱导4h后表达量最大,薄层凝胶光密度扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的18.2%。Western blotting结果显示该重组蛋白可被旋毛虫、纳氏旋毛虫感染小鼠血清及旋毛虫病患者血清识别,但不能被乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及伪旋毛虫感染小鼠血清识别;与钩虫病、囊尾蚴病、日本血吸虫病患者血清无交叉反应,但与并殖吸虫病、华支睾吸虫病及棘球蚴病患者血清有交叉反应。重组蛋白免疫小鼠可产生高滴度的血清抗体,IFA显示Ts21蛋白主要分布于肌幼虫体壁。结论成功制备了旋毛虫Ts21基因的重组蛋白,该蛋白具有较好的抗原性。
王中全逯莉崔晶王来王睿
关键词：旋毛虫原核表达重组蛋白抗原性
旋毛虫43 kDa蛋白的基因克隆和序列分析
目的构建编码旋毛虫相对分子质量43 000(43 kDa)蛋白基因(Ts43)的原核表达载体, 并对其序列进行分析。方法应用RT-PCR方法从河南省南阳猪源旋毛虫获得旋毛虫基因Ts43,克隆入pGEMEX-1载体中构建重...
韩化敏崔晶王中全卫海燕晋雪香
关键词：旋毛虫抗原基因克隆
文献传递
Ts21重组蛋白斑点免疫金渗滤法检测旋毛虫抗体的研究被引量：4
2008年
目的应用旋毛虫Ts21基因重组蛋白建立诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA、旋毛虫Ts21重组蛋白与肌幼虫排泄-分泌(excretory-secretory,ES)抗原包被硝酸纤维素膜(NCM),分别建立Ts21重组蛋白-斑点免疫金渗滤法(Ts21-dot immunogold-filtration assay,Ts21-DIGFA)与ES-DIGFA,对旋毛虫病及其他寄生虫病患者血清和感染动物血清进行检测,并与ELISA检测结果进行比较。结果Ts21-DIGFA检测旋毛虫病患者血清抗体的敏感性和特异性分别为94.73%和86.96%,ES-DIGFA的敏感性和特异性分别为89.47%和86.96%,差异无统计学意义(χ2敏感=0.368,χ2特异=0,P>0.05);Ts21-ELISA的敏感性和特异性分别为94.73%和94.20%,与Ts21-DIGFA相比差异无统计学意义(χ2敏感=0,χ2特异=1.272,P>0.05)。Ts21-DIGFA检测旋毛虫感染猪血清的敏感性和特异性分别为88.89%和100%,ES-DIGFA的敏感性和特异性分别为94.44%和95.00%,差异均无统计学意义(χ2敏感=0,χ2特异=0,P>0.05)。小鼠感染300条旋毛虫后4周Ts21-DIGFA的血清抗体检出率为100%(10/10);感染10条及5条旋毛虫后6周血清抗体检出率均为100%(10/10)。DIGFA可在3 min内肉眼观察结果,抗原包被后的NCM和金标SPA在4℃至少保存6个月。结论Ts21-DIGFA检测旋毛虫抗体具有较高的敏感性和特异性及良好的稳定性和重复性,可用于旋毛虫病的血清学诊断及血清流行病学调查。
侯小君王中全崔晶秦银霞王睿
关键词：旋毛虫斑点免疫金渗滤法重组蛋白ELISA
旋毛虫抗原基因Ts21体外表达条件的研究
2008年
目的优化体外表达旋毛虫抗原基因Ts21的条件。方法比较不同诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间、抗生素(氨苄青霉素)浓度及诱导温度等条件下融合蛋白(rMBP-Ts21)的表达水平,选择适宜的表达条件。结果在诱导剂浓度0.3mmol/L、诱导时间3h及诱导温度在20℃的情况下,融合蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的20%;抗生素浓度对融合蛋白表达量无明显影响。结论获得旋毛虫抗原基因Ts21体外表达的适宜条件,为大量制备、纯化该重组抗原奠定基础。
王来崔晶王中全王强
关键词：旋毛虫融合蛋白
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