国家自然科学基金(81072936)
- 作品数：3 被引量：19H指数：3
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- 噬菌体随机十二肽库淘选三水白虎汤作用于类风湿关节炎滑膜细胞的靶点研究被引量：8
- 2014年
- 目的:利用噬菌体随机十二肽库淘选出与三水白虎汤(SSBH)作用的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)特异性结合的多肽,寻找SSBH治疗类风湿关节炎的蛋白靶点。方法:以SSBH处理过的RASFs为靶细胞,生理盐水(NS)处理的RASFs为吸附细胞,全细胞差减筛选法对噬菌体十二肽库进行3轮淘选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体,并初步鉴定噬菌体克隆的亲和力,阳性克隆测序后进行生物学分析。结果:3轮淘选后,随机挑选32个噬菌体克隆进行DNA序列分析,展示SGVYKVAYDWQH十二肽的噬菌体被富集约为56%(18/32)。结论:从噬菌体肽库筛选到SSBH作用RASFs的特异性结合短肽,并分析出相关作用蛋白。
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- 关键词：类风湿关节炎
- 三水白虎汤对滑膜成纤维细胞增殖及IL-6、IL-17分泌的影响被引量：12
- 2013年
- 目的观察三水白虎汤含药血清对体外培养的类风湿关节炎（RA）、骨关节炎（OA）滑膜成纤维细胞（FLS）增殖及分泌白细胞介素-6（IL-6）、IL-17的影响，探讨三水白虎汤的作用机制。方法组织块培养法收集RA、OA患者的关节FLS，体外培养传代，取3～6代细胞，加入20％三水白虎汤含药血清培养72h，M丌法连续检测FLS的增殖率，ELISA法检测上清液中IL-6、IL-17的水平，以来氟米特和生理盐水含药血清作对照。结果三水白虎汤含药血清对RA、OAFLS增殖有显著抑制作用，同时还能显著抑制RA—FLS分泌IL-17，抑制效率与来氟米特相当；但对RA—FLS的IL-6分泌无影响。对OA-FLS的IL-17、IL-6的分泌均无显著影响。结论复方中药三水白虎汤能抑制FLS的增殖，并能抑制RA-FLS分泌IL-17，这可能是该方治疗RA的药理机制之一。
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- 关键词：滑膜成纤维细胞增殖白细胞介素-17
- 三水白虎汤对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖的蛋白质组学影响被引量：6
- 2013年
- 目的探讨三水白虎汤(SSBH)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)增殖的蛋白质组学影响。方法组织块培养法收集RA患者的关节FLS,体外传代培养,取3～6代细胞,分别加入SSBH含药血清培养(SSBH组)及加入生理盐水制备的血清培养(对照组)。培养72 h后提取细胞总蛋白,用双向凝胶电泳(2-DE)分离细胞总蛋白,凝胶经银染显色和图像数据分析识别差异蛋白位点;基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对差异蛋白位点进行鉴定。结果两组FLS蛋白2-DE图谱均出现差异蛋白质点。在差异蛋白表达量超过3倍的蛋白质点中,选取27个差异蛋白位点进行质谱分析,共鉴定出包括表达上升的IL-1受体拮抗蛋白等25种蛋白质。结论 SSBH可能通过上调RA患者FLS中IL-1受体拮抗蛋白来抑制滑膜增生,这可能是该方剂治疗RA的药理作用机制之一。
- 高燕肖长虹潘超左芳芳李凯琴
- 关键词：类风湿关节炎成纤维细胞细胞增殖蛋白质组学
