您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(30621064)

作品数:4 被引量:7H指数:2
相关作者:李宁李俊李秋艳卫恒习罗娟更多>>
相关机构:中国农业大学生物技术有限公司石河子大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇农业科学

主题

  • 1篇导管
  • 1篇定量PCR
  • 1篇短发夹RNA
  • 1篇乳腺
  • 1篇乳腺导管
  • 1篇乳腺干细胞
  • 1篇生长抑制素
  • 1篇黏附分子
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞群
  • 1篇细胞黏附
  • 1篇细胞黏附分子
  • 1篇小干涉RNA
  • 1篇小鼠
  • 1篇囊胚
  • 1篇内参
  • 1篇内参基因
  • 1篇基因
  • 1篇肌肉生长
  • 1篇肌肉生长抑制...

机构

  • 3篇中国农业大学
  • 1篇石河子大学
  • 1篇北京济普霖生...
  • 1篇生物技术有限...

作者

  • 3篇李宁
  • 1篇李松
  • 1篇娄颜坤
  • 1篇代蓉
  • 1篇罗娟
  • 1篇薛恺
  • 1篇卫恒习
  • 1篇宋嘉哲
  • 1篇李秋艳
  • 1篇李俊

传媒

  • 2篇生物化学与生...
  • 1篇Scienc...
  • 1篇中国科学:生...

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2010
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
猪囊胚microRNA定量PCR分析中适宜内参基因的选择被引量:3
2012年
在定量PCR中,通常使用表达量恒定的基因作为内参对实验结果进行校正,以得到准确的定量结果.本实验用低密度芯片方法对猪体细胞核移植(SCNT)、体外受精(IVF)、体内受精(IVO)及孤雌(PA)囊胚的microRNA表达情况进行了定量分析,结果发现,4种类型胚胎共同表达的microRNA数目为36种,其中11种microRNA的表达量不受胚胎种类的影响(P>0.05).以这11种microRNA为候选内参基因用GeNorm(一种以两两比较为模型,计算样品中所有候选内参基因稳定值的程序,可得到样品中表达最为稳定的一对内参基因组合)及NormFinder(excel加载宏,以方差分析为模型对候选内参基因的稳定性进行分析,可得到稳定性最高的候选内参基因)方法分析发现miR-16表达最为稳定,以miR-16为内参得到的相对定量结果与用细胞数校正的定量结果一致,证实了miR-16是猪囊胚microRNA定量PCR分析的适宜内参基因.
李俊卫恒习李燕李秋艳李宁
关键词:内参基因定量PCRMICRORNA囊胚
Identification of a suitable endogenous control gene in porcine blastocysts for use in quantitative PCR analysis of microRNAs被引量:2
2012年
To obtain reliable results in quantitative PCR (qPCR) reactions, an endogenous control (EC) gene is needed to correct for systematic variations. In this study, a TaqMan low density array was used to quantify the expression levels of microRNA (rniRNA) genes in in vivo fertilized, in vitro fertilized, parthenogenetic and somatic cell nuclear transfer blastocysts. The aim was to identify suitable EC genes for the qPCR analysis of rniRNAs in porcine blastocysts. The results showed that thirty-six miRNAs were commonly expressed in the four kinds of embryos and the expression levels of eleven miRNAs were similar in the different embryo types (P-value〉0.05). These 11 miRNAs were selected as candidate EC genes for further analysis and, of these, miR-16 was identified as the most stable EC gene by the GeNorm (a tool based on a pair-wise comparison model that calculates the internal control genes stability measure and determines the most reliable pair of EC genes) and NorrnFinder (an excel plug-in that uses an ANOVA-based model to estimate intra- and inter- group variation to indicate the single most stable EC gene) programs. In addition, a cell number normalization method validated miR-16 as a suitable EC gene for use in future qPCR analysis of miRNAs in porcine blastocysts.
LI JunWEI HengXiLI YanLI QiuYanLI Ning
关键词:BLASTOCYST
小鼠肌肉生长抑制素基因短发夹RNA促进MyoD在C2C12细胞中的表达(英文)被引量:2
2010年
肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族,主要功能为负向调节骨骼肌的生长.肌肉生长抑制素基因敲除小鼠肌肉出现显著增加,而将干涉该基因的短发夹RNA注射并电击转化入大鼠胫前肌则引起肌肉重量、肌纤维以及MHCⅡ表达的增加.通过与小鼠肌肉生长抑制素基因表达载体共转染HEK293细胞,筛选到两条能够高效抑制小鼠肌肉生长抑制素基因表达的小干涉RNA.构建了这两条小RNA的表达载体Mst-shRNA1和Mst-shRNA2,用其分别转染小鼠C2C12成肌细胞,并通过G418药物筛选和流式细胞仪富集整合了短发夹RNA表达载体的阳性细胞.通过采用Real-time PCR和Western blot分析,检测到在分别整合了Mst-shRNA1和Mst-shRNA2的C2C12细胞中,内源性肌肉生长抑制素基因的mRNA水平分别下降了10.2%和35.5%,蛋白质表达则分别下降了29.3%和64.7%.同时,在这两组中MyoD的表达上升了24.4%和40.4%,证明通过RNA干涉实现的肌肉生长抑制素基因的抑制导致了下游MyoD基因表达的上调.这些结果表明内源性产生的肌肉生长抑制素基因小干涉RNA能够有效抑制该基因的表达.这种以RNA干涉技术为基础促进肌肉生长的方法为遗传育种提供了一种新技术,能够在对家畜经济性状的改良中发挥重要作用.
娄颜坤罗娟代蓉李宁
关键词:肌肉生长抑制素RNA干涉小干涉RNA短发夹RNAMYOD
具有乳腺导管再生能力的小鼠乳腺原基细胞群黏附因子的表达特点
2010年
乳腺干细胞是研究器官形成、细胞增殖、分化、生存和凋亡等信号通路的理想模型,而近来的研究发现许多成体干细胞的特异性表面标记都与细胞黏附分子(celladhesion molecule,CAM)家族相关.因此,研究胚胎期乳腺干/祖细胞群的黏附分子基因表达特点,对于纯化和鉴定胚胎期乳腺干/祖细胞具有重要指导意义.用成年小鼠乳腺上皮干细胞的标记CD24和CD49f来分选小鼠胚胎期14天乳腺原基细胞群,发现CD24+和CD49f+双阳性的乳腺原基细胞包含两个细胞群:CD24hiCD49f+细胞群和CD24medCD49f+细胞群.它们占乳腺原基总细胞的比例分别为16%和47%.在随后的细胞培养实验和体内移植再生实验中发现,CD24medCD49f+细胞群可以贴壁,而且具有再生乳腺导管的能力,相反,CD24hiCD49f+细胞群既不能贴壁也不具有移植再生能力.这些结果表明,这两个细胞群分别代表不同的细胞类型,而CD24medCD49f+细胞群有可能包含具有自我更新能力的乳腺原基干/祖细胞.挑选了可能与乳腺相关的19个黏附分子,并对这两群细胞进行了定量PCR检测.结果表明,具有乳腺导管重建能力的CD24medCD49f+细胞群的黏附分子基因表达明显区别于CD24hiCD49f+细胞群,而且其中几个与成体干细胞相关的标记基因在CD24medCD49f+细胞群中的表达显著高于CD24hiCD49f+细胞群.
宋嘉哲薛恺李松李宁
关键词:乳腺干细胞细胞黏附分子
共1页<1>
聚类工具0