江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(G2002-026)
- 作品数：6 被引量：68H指数：4
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- 相关机构：扬州大学更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金上海市科技兴农推广项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛结核病诊断技术的研究进展被引量：38
- 2004年
- 杨卫冲焦新安
- 关键词：牛结核病发病率卡介苗艾滋病OIE动物疫病
- 酶标单抗阻断ELISA检测鸡白痢和鸡伤寒抗体被引量：11
- 2006年
- 以辣根过氧化物酶标记的沙门氏菌O9单抗3-47-0与包被的鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体阻断EL ISA以检测鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌感染。该方法基于待检血清样品抑制酶标单抗与脂多糖的结合,以检测鸡白痢和鸡伤寒特异性抗体。对72份已知鸡白痢阳性血清(抑制率为(98.5±4.0)%)、54份已知鸡白痢阴性血清(抑制率为(15.3±8.0)%)、42份SPF鸡血清(抑制率为(0.8±7.2)%)检测的结果表明,该方法具有很强的区分能力。在人工感染试验中,从第2周开始,该方法能从全部鸡只中检测到特异性抗体,比全血玻板凝集试验(PAT)早1周时间。对344份种鸡血清的检测结果表明,单抗阻断EL ISA比PAT特异性好、敏感性高。另外,该方法也能检测出与鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌有共同抗原的沙门氏菌感染产生的抗体。
- 徐耀辉焦新安胡青海潘志明黄金林曾显营
- 关键词：鸡白痢鸡伤寒阻断ELISA单克隆抗体
- 鸡CD3γδ基因cDNA的克隆及其真核表达质粒的构建被引量：2
- 2006年
- 用Trizol提取4～6周龄白莱航鸡、伊莎鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺组织的总RNA,再用Oligo-dT纤维素富集mRNA后,用RT-PCR扩增出鸡CD3γδ基因cDNA。PCR产物切胶回收后连入T载体,序列分析发现伊莎鸡、固始鸡和隐性白羽鸡的CD3γδcDNA比白莱航鸡多一个氨基酸,且在胞外区的一个区域有4个氨基酸的差异。将白莱航鸡的CD3γδ从T载体上切下连入pcDNA3.1(+),再将重组质粒pcDNA3.1-CD3转染COS-7细胞,用已知的抗鸡CD3的单克隆抗体测得转染细胞中CD3γδ分子的表达,这说明构建的真核表达质粒正确,为下一步用DNA免疫的手段研制抗鸡CD3的单克隆抗体以及研究鸡CD3分子的结构和功能打下了基础。
- 胡青海焦新安徐耀辉张小燕潘志明黄金林殷月兰
- 关键词：CD3CDNA真核表达
- 中国部分地方品种鸡CD4和CD8α基因cDNA的克隆与序列分析被引量：3
- 2006年
- 用Trizol分别提取4～6周龄白莱航鸡、狼山鸡、大骨鸡、北京油鸡、仙居鸡、茶花鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺细胞的总RNA，再用Oligo-dT纤维索富集mRNA后，用RT-PCR分别扩增出鸡CD4和cD8α基因cDNA。将PCR产物克隆进T载体后测序。序列分析显示不同品种鸡的CD4 cDNA序列完全一致；中国地方品种鸡与国外品种的白莱航鸡、RPL7系鸡在CD8α胞外区有6～13个氨基酸的差异，仙居鸡与其他5个中国地方品种鸡在CD8α胞外区有4～5个氨基酸的差异，狼山鸡、北京油鸡和隐性白羽鸡CD8α cDNA的核苷酸序列及推导的氨基酸序列完全一致。这些结果表明，中国地方品种鸡CD4基因序列高度保守；中国地方品种鸡与国外品种鸡的CD8α cDNA序列之间具有遗传多态性，而中国地方品种鸡之间CDSα cDNA序列遗传多态性低，为进一步研究CD4分子和CD8α链的结构和功能提供了条件。
- 胡青海焦新安潘志明黄金林殷月兰
- 关键词：CD4CD8ΑCDNA克隆
- 鸡CD4和CD8α基因cDNA的克隆及其真核表达质粒的构建
- 用Trizol提取6周龄白莱航鸡胸腺组织的总RNA,再用Oligo-dT纤维素富集mRNA后,用RT-PCR分别扩增出了鸡CD4和CD8 α基因eDNA。PCR产物切胶回收后连入T载体,测序正确后再连入peDNA3.1(...
- 胡青海焦新安徐耀辉潘志明黄金林
- 关键词：CD4CD8克隆真核表达质粒
- 文献传递
- 禽流感病毒H5和H9亚型多重RT-PCR快速检测方法的建立被引量：7
- 2006年
- 根据禽流感病毒(A IV)核蛋白(NP)和血凝素(HA)基因序列,设计1对用来鉴定A型A IV特异性引物(NP-F,NP-R)和2对用来鉴定A IV H 5和H 9不同亚型特异性引物(H 5-F,H 5-R;H 9-F,H 9-R),建立了多重RT-PCR快速检测方法。该方法能同时从一种病毒扩增出2条核酸带,分别为型(NP:330 bp)和亚型(H 5A:550 bp,或H 9A:490 bp)。通过对105份样品进行检测,并与病毒分离及琼脂扩散(AGP)血清学方法作平行对比,两者之间符合率达100%;试验灵敏度为102ELD50。结果表明,建立的多重RT-PCR为检测H 5、H 9亚型A IV提供了一种快速、经济、易行的技术。
- 耿士忠曾显营潘志明黄金林焦新安刘秀梵
- 关键词：禽流感病毒核蛋白基因血凝素基因
- 鸡CD4和CD8α基因cDNA的克隆及其真核表达质粒的构建被引量：9
- 2004年
- 用Trizol提取6周龄白莱航鸡胸腺组织的总RNA,再用Oligo-dT纤维素富集mRNA后,用RT-PCR分别扩增出鸡CD4和CD8α基因cDNA。PCR产物切胶回收后连入T载体,测序正确后再连入pcDNA3.1(+)。将重组质粒pcDNA3.1-CD4和pcDNA3.1-CD8分别转染COS-7细胞,用已知的抗鸡CD4和CD8的单克隆抗体检测到转染细胞中CD4和CD8α分子的表达,这说明构建的真核表达质粒正确,为下一步用DNA免疫方法研制抗鸡CD4和CD8的单克隆抗体以及研究鸡CD4和CD8分子的结构和功能打下基础。
- 胡青海焦新安徐耀辉潘志明黄金林
- 关键词：CD4CD8克隆真核表达质粒
