国家自然科学基金(20277030)
- 作品数：5 被引量：29H指数：4
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- 弱阴离子交换、超滤两级法纯化浓缩卵黄蛋白原（Vtg）的研究
- ＜正＞1引言卵黄蛋白原（Vtg）是一种雌性特异性蛋白,其产生过程简述如下:雌性动物在生殖周期内由下丘脑-垂体-性腺系统刺激卵巢分泌内源性雌激素E2;在血液循环系统的作用下, E2被转移至肝脏,被动分散入肝细胞,与雌激素受...
- 刘宝敏袁东星吴翠琴
- 关键词：超滤卵黄蛋白原
- 文献传递
- 固相萃取-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐被引量：14
- 2005年
- 磷钼蓝(PMB)与十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)可生成疏水性的PMB-CTMAB离子缔合物,被Sep-Pak C18小柱萃取富集,基于此建立了SEP-PAK C18小柱固相萃取-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐的新方法.对洗脱液酸度、萃取流速、试剂用量、反应时间与温度等实验参数进行了优化选择,并考察了盐度对测定结果的影响.实验结果表明,PMB-CTMAB在SEP-PAK C18小柱上可被有效地定量萃取;盐度在25～45范围内,对测定结果没有影响.在优化的实验条件下,以盐度为35的人工海水作为基底,方法的线性范围为0.18～4.00 μg/L;平均回收率为98.5%;检出限为0.05 μg/L.对实际海水中痕量活性磷酸盐进行测定,相对标准偏差(RSD)为2.7%～5.6%.与广泛采用的MAGIC法比较,结果无显著差异.新方法具有消耗试样体积少、测定速度快等优点.
- 梁英袁东星林庆梅
- 关键词：固相萃取痕量分析活性磷酸盐磷钼蓝十六烷基三甲基溴化铵
- 乙炔基雌二醇对真鲷幼鱼的雌激素效应研究被引量：5
- 2009年
- 采用静态暴露方式研究17α-乙炔基雌二醇(EE2)对真鲷(Pagrosomus major)幼鱼的雌激素效应。当真鲷幼鱼暴露于0.01、0.1、0.5μg/LEE2,42 d后,真鲷幼鱼的肥满度极显著下降;血浆中卵黄蛋白原(Vtg)被诱导产生,肝胰脏指数(HSI)和血浆蛋白总量极显著升高;血浆雌二醇(E2)和睾酮(T)水平显著降低,其中血浆雌二醇受EE2的干扰更显著,降低的幅度更大。结果提示,真鲷幼鱼的肥满度、肝胰脏指数、血浆蛋白总量、血浆性激素水平等可作为评估EE2等环境内分泌干扰物毒性效应的生物指标;真鲷幼鱼血浆中的Vtg具有作为生物标志物,用于监测海洋水体中EE等环境内分泌干扰物的潜力。
- 吴翠琴袁东星刘宝敏
- 关键词：17Α-乙炔基雌二醇真鲷幼鱼卵黄蛋白原
- 沉淀分离富集-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐被引量：4
- 2006年
- 十六烷基三甲基溴化铵（cetyltrimethylammonium bromide, CTAB）可与磷钼蓝（phosphomolybdenum blue, PMB）生成水难溶的PMB-CTAB离子缔合物沉淀，从而分离富集水溶液中的PMB。该沉淀易溶于硫酸乙醇溶液，溶液在700nm有强吸收，基于此建立了沉淀分离富集-分光光度法测定海水中痕量活性磷酸盐的新方法。对溶剂酸度、试剂用量、反应时间与温度等实验参数进行了优化选择，并考察了盐度对测定结果的影响。实验结果表明，PMB可被CTAB有效地定量沉淀；盐度在15～45范围内，对测定结果无影响。在优化的实验条件下，以盐度为35的人工海水为基底，做空白加P标实验，方法的线性范围为0．30～8．00μg／L，平均回收率为95．0％，方法检测限为0．10μg／L。对实际海水中痕量活性磷酸盐进行测定，相对标准偏差（RSD）为4．4％～7．1％，与广泛采用的MAGIC法比较，置信度为99％时结果无显著差异。新方法具有消耗试样体积少、测定速度快等优点。
- 梁英袁东星林庆梅
- 关键词：磷钼蓝活性磷酸盐十六烷基三甲基溴化铵
- 真鲷卵黄蛋白原的诱导、纯化及初步鉴定被引量：7
- 2005年
- 采用腹腔注射17β-雌二醇(E2),使真鲷雌鱼在一星期内产生大量卵黄蛋白原(Vtg);利用阴离子交换高效液相色谱系统分离纯化E2诱导后的Vtg.Native-PAGE电泳结果表明,真鲷有两种形式的Vtg,分子量分别为570 kDa和360 kDa;SDS-PAGE电泳结果表明,它们由两个不同的亚基构成,分子量分别为180 kDa和115 kDa;磷、脂、糖蛋白分析证实,所获取的Vtg是一类含磷、脂、糖的大分子蛋白.同时考察了4-壬基酚(4-NP)对真鲷Vtg的诱导作用.
- 吴翠琴袁东星林庆梅
- 关键词：卵黄蛋白原真鲷17Β-雌二醇4-壬基酚
- 弱阴离子交换-超滤两级纯化浓缩真鲷卵黄蛋白原
- 2006年
- 利用弱阴离子交换色谱,从雌激素17β-雌二醇诱导的真鲷鱼血清中分离纯化出卵黄蛋白原粗组分,以超滤法进一步除去杂质蛋白,并脱盐浓缩,获得纯度较高的卵黄蛋白原(Vtg),两级纯化得到的Vtg经常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)分析,证实真鲷鱼Vtg有三种形式,分子量分别为665kDa,635kDa和355kDa;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果表明,它们由185kDa左右的蛋白亚基组成.
- 刘宝敏袁东星吴翠琴
- 关键词：超滤卵黄蛋白原
