博士科研启动基金(C2005-6)
- 作品数：7 被引量：51H指数：3
- 相关作者：刘红美方小波令狐克勇吴建伟张洁更多>>
- 相关机构：贵阳医学院更多>>
- 发文基金：贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省高层次人才科研条件特助经费项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 用家蝇取代果蝇制作唾腺多线染色体新技术
- 2008年
- 组建学生科技兴趣小组,对家蝇唾液腺染色体制片方法进行研究,开发了制片新技术,即加热处理家蝇三龄幼虫,然后用改进的缓冲液进行解离前预处理,再酸性解离、染色、观察、永久制片、显微照相。利用新方法,学生均能一次就获得细胞膜破裂、背景清晰、染色体分散良好、横纹清楚的制片。
- 刘红美令狐克勇方小波杨桂华郑晴妮
- 关键词：家蝇唾液腺染色体
- 野百合试管鳞茎诱导与增殖的研究被引量：13
- 2008年
- 以贵州野百合鳞片不同部位为外植体,用3%次氯酸钠进行消毒,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明,用3%次氯酸钠对野百合鳞茎进行外植体进行消毒完全可行,且对操作人员,实验材料和环境都不存在不良影响,价格低廉;最佳的诱导培养基为MS＋6-BA1.5mg/L＋NAA0.3mg/L;最适合的外植体为百合鳞片基部。用相同的培养基进行增殖培养,25d后,可获得繁殖系数高、生长势好、并有新根生成的试管鳞茎;将直径为1～2cm的试管鳞茎移栽培养,成活率高于90%。该研究得出的方法可在短时间内提供大量的贵州野百合种苗。
- 刘红美令狐克勇方小波
- 关键词：野百合试管鳞茎增殖
- 热胁迫后家蝇幼虫cDNA文库构建与随机EST测序分析被引量：12
- 2010年
- 目的构建家蝇幼虫cDNA文库,筛选重要免疫因子。方法采用热激法处理家蝇3日龄幼虫,提取处理后培养24h的家蝇幼虫总RNA,运用SMART技术构建cDNA文库并随机挑选克隆进行EST测序分析。结果 cDNA文库的滴度为1.2×106。PCR扩增鉴定显示所选的30个克隆均含有重组的插入片段,大小均大于1kb。随机挑取192个克隆进行表达序列标签(EST)测序,有效序列为171条,根据EST测序结果计算文库重组率达94%。经序列拼接得到129个Unigenes。通过序列比对发现其中72个Unigenes与GenBank中的已知基因同源,并从中鉴定出热激蛋白、变态原、转铁蛋白、几丁质酶、副肌球蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制因子等重要免疫因子。结论高质量的家蝇幼虫cDNA文库构建成功,该文库的构建将有助于家蝇热应激免疫相关功能基因分离和进一步研究。
- 刘红美张洁王贇付萍国果张勇吴建伟
- 关键词：家蝇热激CDNA文库EXPRESSED
- 家蝇相关序列扩增多态性扩增体系的建立与优化被引量：2
- 2008年
- 目的:建立和优化家蝇的相关序列扩增多态性(SRAP-PCR)扩增体系。方法:以驯养家蝇为材料,通过单因子实验分别研究了模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶用量对家蝇SRAP分子标记扩增体系的影响,并对扩增体系进行了优化。结果:优化后的反应体系总体积为30μl,含50ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、0.20mmol/L dNTPs、0.15μmol/L引物和0.50U Taq DNA聚合酶。结论:家蝇SRAP-PCR扩增优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行家蝇遗传多样性分析、基因定位奠定了基础。
- 刘红美方小波郑勤妮胡仕明吴建伟
- 关键词：蝇科随机扩增多态DNA技术
- 紫花南桔梗工厂化育苗技术研究被引量：2
- 2009年
- 通过对野生紫花南桔梗进行离体快繁技术的研究,解决生产栽培中优良种源短缺问题。方法:用野生紫花南桔梗幼茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明:用MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L诱导培养,60 d可获得丛生芽;继代用MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2mg/L培养,增殖率高达20倍以上;用1/2 MS+NAA 0.2 mg/L培养20 d可获得生根植株。本研究得出的方法可为栽培桔梗提供大量优良种苗。
- 刘红美方小波李娟郑勤妮
- 关键词：丛生芽再生植株
- 野百合试管鳞茎诱导与增殖的研究（英文）被引量：21
- 2008年
- 利用现代生物技术组织培养方法对野百合进行种质保存和快速繁殖研究，对发展野百合的大规模生产及百合育种工作，保护野生资源和生态环境有重要意义。
- 刘红美令狐克勇方小波
- 关键词：野百合现代生物技术繁殖
- 家蝇幼虫防御素基因的克隆和序列分析被引量：1
- 2009年
- 目的:克隆家蝇幼虫防御素(defensin)基因并进行序列分析。方法:根据Genbank公布的家蝇成虫defensin基因序列设计一对引物,以家蝇幼虫基因组DNA为模板,进行PCR扩增、测序,并利用软件进行序列分析。结果:克隆得到的defensin基因的长度为330bp,编码92个氨基酸,4个阳性克隆的DNA序列编码的多肽在第27位氨基酸残基不同,为K或N。结论:从家蝇幼虫基因组DNA中克隆得到了defensin基因,发现了两种相差一个氨基酸残基的defensin前体蛋白,并初步预测了两种前体蛋白的化学性质和二级结构,为该基因的重组表达奠定了基础。
- 张洁刘红美
- 关键词：家蝇幼虫
