内蒙古自治区自然科学基金(2009MS1113)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：布日额吴金花孙立杰刘洋刘洋更多>>
- 相关机构：北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司内蒙古民族大学东北农业大学更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 禽流感病毒A/duck/Fujian/31/2007(H5N1)株M1基质蛋白的原核表达与免疫原性鉴定被引量：1
- 2012年
- 经生物学软件DNAStar分析,参照已发表的禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)(H5N1)基因组序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约750bp的M1基因片段,将目的片段定向克隆至pET30a表达载体,经酶切及测序鉴定正确后转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后,BCA法测定纯化蛋白的浓度为0.656mg/mL,免疫印迹检测结果表明,纯化的重组蛋白具有良好的反应活性。将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测结果表明,重组蛋白可产生抗M1蛋白特异性抗体,具有良好的免疫原性。本研究成功表达了流感病毒H5N1的基质蛋白M1,且重组蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研制H5N1亚型流感病毒诊断试剂及基因工程疫苗奠定基础。
- 布日额吴金花孙立杰李明刚刘洋刘洋
- 关键词：原核表达
- 禽流感病毒株A/duck/Fujian/31/2007(H5N1)株M1基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 参照GenBank公布的禽流感病毒基质蛋白M1基因序列,设计合成了1对特异性引物,采用RT-PCR法成功扩增并克隆了禽流感病毒M1基因。序列测定结果为M1基因cDNA全长759bp,编码252个氨基酸。将其序列与数株甲型流感病毒M1基因序列进行比较,M1基因核苷酸同源性为99.1%～99.6%,推导氨基酸同源性为98.8%～99.6%,生物信息学分析表明,M1基因编码的蛋白质具有亲水性,有很强的抗原性,M1蛋白共有6个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。
- 布日额任晓峰李明刚吴金花孙立杰
- 关键词：禽流感病毒克隆
