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贵州省科学技术基金(JLkz2011-50)
作品数:
1
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陈攀科
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基质细胞衍生因子受体基因修饰骨髓间充质干细胞移植对大鼠损伤颈动脉修复的影响
被引量:1
2013年
目的探讨基质细胞衍生因子受体(CXCR4)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠颈动脉损伤后修复的影响。方法体外培养和扩增BMSCs,用携带CXCR4的慢病毒质粒(Lent-vector)转染BMSCs,获得CXCR4修饰的BMscs(CXCR4BMscs),免疫印迹(Westernblot)法检测CXCR4的表达情况。建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,随机分成CXCR4转染BMSCs移植组(CXCR4-BMscs,12只),空病毒转染BMSCs组(BMscs组,12只)及磷酸盐缓冲液(PBS)移植对照组(对照组,12只)。细胞移植后2周取血管组织分别行绿色荧光蛋白(GFP)荧光检测BMSCs归巢情况,免疫荧光染色检测血管内膜血小板内皮细胞黏附分子(CD31)的表达,细胞移植后4周免疫组织化学染色检测增殖细胞核抗原(PcNA)的表达及苏木精-伊红(HE)染色检测血管形态学变化。结果BMSCs转染Len@CXCR4后CXCR4蛋白水平与转染Lentbvector和未转染的BMSCs比较呈高表达(P〈0.05)。CXCR4-BMSCs组和BMSCs组血管内膜均有GFP阳性细胞归巢,CXCR4BMSCs组(58.8±4.4)%较BMSCs组(36.2±5.0)%增加(P〈0.05)。CXCR4-BMSCs组CD31表达(58.8±4.3)%高于BMSCs组(28.8±4.2)%(P〈0.05)。PCNA的表达CXCR4BMSCs组(21.0±4.2)%与BMSCs组(36.5±4.9)%较对照组(78.3±3.5)%均降低(P〈0.05),CXCR4-BMSCs较BMSCs组降低(P〈0.05)。CXCR4BMSCs组与BMSCs组新生内膜面积[分别为(o.205±0.018)mm2、(O.323±0.071)mm。]、新生内膜/中膜面积[分别为(1.039±0.123)、(1.660±0.404)]均较对照组减轻[(0.536±0.054)mm2、(2.460±0.328),P〈0.05];CXCR4-BMSCs较BMSCs组也降低(P〈0.05)。结论基因修饰可提高BMSCs的CXCR4表达,CXCR4-BMSCs较单纯BMSCs移植更能增加BMSCs归巢及促进颈动脉球囊损伤后早期再内皮化并减轻血管再狭窄。
刘志江
石蓓
许官学
赵然尊
沈长银
陈攀科
关键词:
间质干细胞
颈动脉损伤
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