重庆市自然科学基金(CSTC2008BB122)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 沉默乙酰肝素酶基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭能力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察沉默乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖及侵袭能力的影响。方法构建针对HPA基因的shRNA慢病毒载体,感染人卵巢癌SKOV3细胞。实验设计分为未转染组、实验转染组(选择3个靶点设计HPA-shRNA-1、HPA-shRNA-2、HPA-shRNA-3序列)、空白转染组;转染后,采用荧光定量PCR、Western blot方法检测HPA在基因水平和转录后蛋白水平的沉默效率;使用流式细胞仪检测细胞周期变化,CCK-8法检测细胞增殖情况,基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭能力变化。结果①构建的shRNA慢病毒载体感染卵巢癌SKOV3细胞后,见HPA-shR-NA-1和HPA-shRNA-2序列的HPA基因和蛋白水平均显著下降(P<0.05),而HPA-shRNA-3序列在其表达上无降低,为无效转染序列;②实验转染组中有效转染序列HPA-shRNA-1、HPA-shRNA-2组中均见细胞G1期比例增加[分别为(69.69±3.87)%、(66.29±4.06)%],细胞增殖受到抑制[分别为(1.77±0.13)、(1.74±0.27)],穿膜细胞数显著减少[分别为(22.40±5.02)、(23.42±5.72)],与未转染组及空白转染组之间相比有明显差异(P<0.05)。结论干扰HPA基因后,对卵巢癌细胞的增殖及侵袭能力有明显的抑制作用,其作用机制与HPA的基因和蛋白表达下调有关。
- 赵玲杨鹰
- 关键词：沉默基因乙酰肝素酶卵巢癌肿瘤浸润
- 舒林酸下调COX-2和乙酰肝素酶对内皮祖细胞迁移趋化能力的影响
- 2014年
- 目的探讨舒林酸抑制卵巢癌SKOV-3细胞环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达影响共培养体系中内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)迁移趋化能力的可能机制。方法分离鉴定EPCs;半定量RT-PCR检测不同浓度舒林酸分别作用不同时间后卵巢癌SKOV-3细胞中COX-2基因表达变化及Western blot检测SKOV-3细胞中COX-2蛋白表达变化;处理后SKOV-3细胞与EPCs共培养,观察EPCs迁移趋化能力;Western blot和ELISA检测SKOV-3细胞中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)含量。结果半定量RT-PCR检测显示舒林酸对卵巢癌SKOV-3细胞COX-2基因抑制作用存在剂量-时间依赖性(P<0.05);Western blot结果显示2 mmol/L舒林酸作用48 h后卵巢癌SKOV-3细胞中COX-2蛋白水平显著降低(P<0.05);共培养后实验组EPCs迁移趋化能力明显降低(P<0.05);Western blot结果分析显示COX-2与HPA表达呈显著正相关(r=0.977,P<0.01)且迁移趋化能力与SKOV-3细胞表达HPA水平呈显著正相关(r=0.870,P<0.05)。结论舒林酸可能通过抑制卵巢癌SKOV-3细胞COX-2表达并下调HPA水平,降低EPCs的迁移趋化能力。
- 张龙辉赵玲杨鹰
- 关键词：舒林酸环氧化酶2乙酰肝素酶迁移
- 侧群细胞与卵巢癌干细胞被引量：3
- 2011年
- 侧群细胞（side population,sP）是一类具有干细胞特性,能够排出活性污染Hoechst33342而具有弱荧光染色特性的细胞。利用这一特性,sP细胞可以通过免疫荧光激活细胞法结合流式细胞仪被分选,目前在人、鼠多种卵巢癌细胞株及患者腹水中成功分选、鉴定、培养,证实了sP细胞的存在,并证实其与肿瘤干细胞之间存在一致性。基于对sP细胞生物学特性的研究,进一步了解肿瘤干细胞在基因调控、信号转导等方面的研究,并且为研究卵巢癌干细胞创造有价值的细胞模型。本文就sP细胞在卵巢癌干细胞中的研究进展作一综述。
- 赵玲邱倩杨鹰
- 关键词：肿瘤干细胞侧群细胞卵巢癌
