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国家重点基础研究发展计划(2002CB13005)
作品数:
1
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相关作者:
邓鹏
吴翠玲
伍丽琼
王娟
姜勇
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南方医科大学
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邓鹏
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2010
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髓样相关蛋白8真核表达载体的构建及其细胞内定位
2010年
目的:构建小鼠髓样相关蛋白8(MRP8)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况。方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应扩增得到MRP8编码序列,并将其克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后将重组质粒瞬时转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察结果。结果:重组质粒经聚合酶链反应、酶切和测序鉴定证明构建正确,并且该质粒能够在NIH3T3细胞的胞浆、胞核中广泛表达,表达产物主要定位在细胞核中。结论:成功构建带有HA标签的MRP8真核表达载体。该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究MRP8作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具。
伍丽琼
吴翠玲
王娟
徐佳
邓鹏
姜勇
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血凝素类
转染
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