云南省应用基础研究计划面上项目(2011FZ210)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：李华杨蓉岳磊谢忠平龙润乡更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人呼吸道合胞病毒Long株的免疫原性初探被引量：1
- 2014年
- 目的评价人呼吸道合胞病毒(HRSV)Long株的免疫原性,为进一步的研究疫苗提供实验数据。方法将HRSV制备成纯化抗原,取40只ICR鼠,随机分为4组,分别用纯化HRSV、纯化HRSV+Al(OH)3、并设0.01 mol/L PBS、Al(OH)3对照组,0天、28天免疫小鼠,采用中和试验检测血清中和抗体,流式检测7种细胞因子。结果初免后28天,加Al(OH)3组与无Al(OH)3组抗体阳转率分别为60%和50%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶4.49和1∶5.27;加强免疫后,Al(OH)3组与无Al(OH)3组小鼠血清抗体阳转率均达100%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶17.15和1∶10.56,平均增长3.8倍和2.0倍;中和抗体在组间无差异,而组内初免与再免的中和抗体有统计学差异(P<0.01)。加Al(OH)3样品组与无Al(OH)3样品组,所检测7种细胞因子均诱导IL-6及TNF,与两个对照组间有统计学差异(P<0.05),而另外5种细胞因子则无明显升高。结论人呼吸道合胞病毒Long株可产生良好的免疫效应。
- 李华杨婷岳磊刘正玲姜广菊龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词：人呼吸道合胞病毒细胞因子免疫原性
- 人呼吸道合胞病毒截短F1蛋白的原核表达及其免疫原性评价被引量：4
- 2017年
- 目的原核表达重组人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)A型Long株截短F1融合性蛋白,并评价其免疫原性。方法采用RT-PCR法扩增HRSV截短F1蛋白基因序列,克隆至pET-28b表达载体,构建重组原核表达质粒RSV F1/pET-28b,转化大肠埃希菌Shuffle T7菌株,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析;用Ni亲和层析柱纯化,纯化产物经SDS-PAGE及Western blot分析。将纯化的重组截短F1蛋白免疫ICR小鼠,ELISA法检测小鼠血清抗体效价。结果重组原核表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的截短F1蛋白相对分子质量约44 000,主要以包涵体形式存在,纯度达90.6%。重组截短F1蛋白免疫小鼠血清抗体效价最高可达1∶4 096。结论原核表达的重组HRSV截短F1蛋白免疫原性好,为单克隆抗体的制备及检测试剂盒的研究奠定了基础。
- 李华杨婷岳磊何晓娟朱凡丽谢天宏龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词：呼吸道合胞病毒原核表达免疫原性
