国家自然科学基金(30672184)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
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- 人工毛乳头最佳直径的选择
- 2008年
- 目的观察葡聚糖-荧光素在APA微囊中的扩散方式,对比其在不同直径APA微囊中的扩散速度,确定最佳的人工毛乳头直径;对比最佳直径人工毛乳头的微囊膜与毛乳头基膜的通透性,以进一步评价微囊膜的通透性能。方法在共聚焦显微镜下,分别观察分子量10、40、70ku的葡聚糖-荧光素在APA微囊中的扩散速度和扩散方式,对比、分析相同时间、不同直径的APA微囊中葡聚糖-荧光素的强度,结合囊内细胞数量及成囊所需电压等因素,确定最佳的人工毛乳头直径;比较最佳直径人工毛乳头的微囊膜与新鲜分离的毛乳头基膜的通透性。结果相同分子量、相同时间内荧光强度的比较:小囊组>中囊组>大囊组,大囊组、小囊组间的差异具有极显著的统计学意义(P<0.01);大囊组与中囊组间的差异具有显著的统计学意义(P<0.05);直径400μm微囊中的荧光强度高于新鲜分离毛乳头中的荧光强度。结论直径约400μm人工毛乳头的微囊膜能保证营养物质、代谢产物和信号分子的自由进出,其内部结构适合毛乳头细胞聚集性生长的特性,且其制作过程对细胞的影响较小。
- 林常敏李宇黄铿纪影畅蔡湘娜李国强
- 关键词：微囊通透性毛乳头
- 毛乳头细胞培养基血清浓度的探索被引量：2
- 2008年
- 目的研究不同血清浓度的培养基对毛乳头细胞生长速度及细胞状态的影响。方法改良一步酶消化法分离培养人头皮毛乳头细胞,分别以无血清培养基及10%、15%等不同浓度小牛血清培养基,培养第3代毛乳头细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状态,细胞消化后,计数并绘制生长曲线。结果在无血清培养基培养条件下,毛乳头细胞传代后贴壁率较低,贴壁后细胞未见明显增殖;传代后前8d,15%和20%血清培养基培养的毛乳头细胞生长速度,明显快于无血清培养基组和10%血清培养基组(P<0.05);传代第10天后,15%和20%血清培养基中毛乳头细胞生长速度差异无显著的统计学意义。结论细胞生长速度与血清浓度密切相关。
- 林常敏李宇纪影畅黄铿蔡湘娜李国强
- 关键词：细胞培养毛乳头血清
- 人工毛乳头与毛乳头的形态学和活性比较
- 2008年
- 目的:通过对人工毛乳头与毛乳头的对比观察,从形态学、细胞活性、膜通透性等方面对人工毛乳头进行评价。方法:利用高压电场微囊发生器,以APA微囊包裹分离毛乳头细胞;在普通光学显微镜、倒置相差显微镜、透射电镜下观察对比新鲜分离的毛乳头与毛乳头细胞微囊(人工毛乳头)的大体形态和超微结构;MTT法比较微囊化和培养的毛乳头细胞的活性;激光共聚焦显微镜比较人工膜和生物膜的通透性。结果:毛乳头细胞微囊与新鲜分离的人头皮毛乳头在大体形态及超微结构方面非常相似,培养14天后两种细胞的活性趋于一致;直径400μm的微囊中的荧光强度高于新鲜分离的毛乳头中的荧光强度(P<0.05)。结论:人工毛乳头与毛乳头的形态和活性相似,APA膜的通透性优于毛乳头的基膜。
- 林常敏李宇黄铿纪影畅蔡湘娜李国强张锦堃
- 关键词：毛乳头微囊活性
- 大鼠毛囊发育启动阶段模型构建及其Wnt10b／β连环蛋白信号表达的观察被引量：3
- 2010年
- 目的构建适合研究毛囊发育启动的体外培养模型，观察Wnt10b／β连环蛋白信号在毛囊发育初期的表达情况。方法将不同胎龄的SD大鼠胚胎（胎鼠）背部皮肤以明胶海绵为载体，在Dulbecco改良Eagle培养液（DMEM）的气液交界平面中漂浮培养3～6d，HE染色，观察毛囊发育情况；免疫荧光法动态观察Wnt10b及β连环蛋白在毛囊发育初期的表达；将胎龄15d胎鼠背部皮肤在含不同胎牛血清浓度的DMEM中培养，观察胎牛血清对毛囊形态发生的影响。结果（1）胎龄14d后期至15d早期的胎鼠背部皮肤培养效果最好，体外培养3d以内，毛囊的发育保持与体内过程一致，培养3d后毛囊发育逐渐减慢，直至停止于第4阶段；（2）胎牛血清对毛囊的发育没有明显促进作用；（3）在培养的前几天，Wnt10b／β连环蛋白的表达与体内一致，随着培养天数的增加，Wnt10b／β连环蛋白的表达逐渐减弱，在培养的第6天，毛囊的形态发生停止时，Wnt10b／β连环蛋白的表达也随之消失。结论在体外短期培养的胎鼠背部皮肤毛囊发育与体内基本一致，可以作为研究毛囊发育启动的模型；Wnt10b／β连环蛋白信号的表达与毛囊的早期发育密切相关。
- 纪影畅李宇鲁峰胡志奇王森林常敏高建华
- 关键词：毛囊器官WNT信号
- 大鼠胚胎皮肤毛囊形态发生与Wnt—10b／β-catenin的表达被引量：8
- 2010年
- 目的研究大鼠胚胎皮肤毛囊的形态发生与Wnt-10b／β-catenin信号的表达情况.方法取不同胎龄的SD大鼠胚胎及1～3d新生鼠的背部皮肤，采用石蜡包埋、切片、HE染色，对SD大鼠胚胎毛囊的发生过程及其形态学特征进行描述，同时应用荧比免疫组化染色，观察Wnt-10b及β—catenin在毛囊发育过程中的时空表达。结果在第14、15天时，胚胎背部皮肤逐渐由单层向多层转化，毛囊最早形态发生的时间约为胚胎第15天后期、第16天早期；毛睫基板形成之前，Wnt—10b及β—catenin均匀表达于表皮；当毛囊基板形成后，Wnt-10b及β-catenin仅仅强表达于基板；随着毛囊继续发育，Wnt-10b及β—catenin的表达局限于紧贴“真皮浓缩”的毛囊上皮及毛基质细胞；毛囊之间的表皮未见明显表达，结论SD大鼠背部皮肤毛囊的形态发生很可能始于胚胎第15天后期、第16天早期；Wnt-10b及β—catenin参与调控毛囊发生的启动和进一步发育。
- 纪影畅李宇鲁峰胡志奇王森林常敏高建华
- 关键词：毛囊WNT信号
