福建省自然科学基金(2009J01146)
- 作品数:5 被引量:6H指数:2
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- CD_(147)基因沉默对甲状腺乳头状癌细胞中VEGF-C表达的影响被引量:2
- 2011年
- 目的观察CD147基因沉默对甲状腺乳头状癌细胞株K1中血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的影响,筛选有效的小干扰RNA(siRNA)序列。方法设计合成3对不同的CD147 siRNA,分别转染人K1为实验组(S1、S2、S3组),同时设不加干预者为正常组,siRNA阴性对照进行干预为阴性对照组。RT-PCR、ELISA法分别测定各组CD147 mRNA及其蛋白。筛选能有效沉默CD147 mRNA及其蛋白的siRNA序列。RT-PCR、Western blot法分别测定CD147表达沉默后K1细胞中的VEGF-C mRNA及其蛋白。结果 S1组CD147 mRNA及其蛋白表达量与正常组、阴性对照组相比,P均>0.05。S2、S3组与正常组、阴性对照组相比,P均<0.05。S2、S3组的siRNA序列可有效沉默CD147的表达而S1组不能。S2、S3组CD147 mRNA的表达抑制率分别为67.8%和72.5%;CD147蛋白表达抑制率为31.7%和35.4%。S2、S3组K1细胞中VEGF-C mRNA表达抑制率分别为66.4%和56.6%;其蛋白表达抑制率分别为51.9%和41.6%。结论筛选出了能有效沉默CD147基因表达的siRNA序列。CD147基因沉默后可降低K1细胞中VEGF-C的表达,可能影响肿瘤细胞的淋巴结转移能力。
- 颜守义万光俊王波赵文新
- 关键词:小干扰RNA细胞外基质金属蛋白酶诱导因子血管内皮生长因子C淋巴转移
- STAT3-siRNA对人甲状腺癌SW579细胞株增殖侵袭的影响被引量:1
- 2010年
- 目的研究小干扰RNA-siRNA对人甲状腺癌SW579细胞STAT3表达及细胞增殖和侵袭的抑制作用。方法将STAT3-siRNA转染给人甲状腺癌SW579细胞来沉默STAT3的表达。用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting测定STAT3mRNA和蛋白的表达。用甲基噻唑基四唑(MTT)来分析STAT3STAT3-siRNA对癌细胞的生长抑制作用。通过RT-PCR检测MMP2和MMP9mR-NA的表达,Transwell侵袭小室实验研究癌细胞的体外侵袭能力。结果STAT3-siRNA能有效而稳定地抑制甲状腺癌SW579中STAT3的表达,下调STAT3可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长,在转染后24、48、72h,转染STAT3特异性的siRNA组生长抑制率显著高于对照组。siRNA沉默STAT3基因后,肿瘤细胞的体外侵袭能力明显下降。结论下调STAT3可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长和侵袭能力,STAT3特异性siRNA作为一种治疗肿瘤的新途径值得进一步研究。
- 王波赵文新
- 关键词:甲状腺肿瘤学
- 人甲状腺乳头状癌蛋白质组差异表达研究被引量:1
- 2012年
- 目的比较人甲状腺乳头状癌(PTC)与正常甲状腺组织差异表达的蛋白质,筛选PTC特异的肿瘤标志物。方法以PTC组织为实验组,甲状腺腺瘤周围正常组织为对照组;利用双向凝胶电泳技术分离各组总蛋白,建立PTC和正常甲状腺组织的蛋白表达图谱。用Image Master 2DE1ite 5.0图像分析2组蛋白表达差异,并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对差异蛋白进行鉴定,并搜索Swiss-port数据库查询蛋白功能。结果比较PTC与正常甲状腺组织蛋白表达谱,共发现55个差异蛋白点,经质谱鉴定出10种差异表达蛋白,其中cytoskeletal 19、Mitochondrial 3,2-trans-enoyl-CoA isomerase、CD147、Cathepsin B、carbonyl reductase-1、annexin A1共6种蛋白质在PTC中高表达;tropomyosin-2、tropomyosin-1、tubulointerstitial nephritis antigen-like isoform 2 precursor、fibrinogen beta chain共4种蛋白为低表达。结论 PTC与正常腺体组织间存在多种差异表达的蛋白质,可能通过细胞周期调控、细胞代谢及影响肿瘤的侵袭与转移等机制参与PTC的发生和发展。
- 赵文新颜守义王波万光俊张立永
- 关键词:甲状腺肿瘤蛋白质组学
- 小分子RNA在甲状腺肿瘤中作用的研究进展被引量:1
- 2010年
- 甲状腺癌为常见的内分泌系统恶性肿瘤,近年来发病率逐渐升高,但对其发病机制尚缺乏深入的研究,对其诊断和预后判断尚缺乏特异的生物学指标,许多学者对此进行了广泛的研究。小分子RNA是新近发现的非编码单链RNA,调控细胞凋亡、细胞迁移和血管生成等多个肿瘤相关基因的表达。现主要综述小分子RNA在甲状腺癌中的诊断和判断预后中作用的研究进展。
- 王波赵文新
- 关键词:分子病理学小分子RNA甲状腺肿瘤学
- CD147-siRNA对甲状腺乳头状癌K1细胞侵袭能力的影响被引量:2
- 2012年
- 目的研究小干扰RNA对人甲状腺乳头状癌K1细胞CD147表达及细胞侵袭能力的影响,并筛选出有效的siRNA序列。方法人工设计合成3对CD147-siRNA,并将CD147-siRNA转染人甲状腺乳头状癌K1细胞来沉默CD147基因的表达。用RT-PCR、ELISA分别测定CD147 mRNA和其蛋白的表达,从而验证CD147-siRNA的干扰效果;用RT-PCR、Western blot技术分别测定MMP7 mRNA和其蛋白的表达;Transwell侵袭实验研究干扰后K1细胞的体外侵袭能力。结果 S2、S3组CD147 mRNA及其蛋白表达量较正常组和阴性对照组明显减少(P<0.05)。与正常组相比,CD147 mRNA的表达抑制率分别为67.81%和72.48%;CD147蛋白表达抑制率分别为31.65%和35.47%。S2、S3组K1细胞中MMP7 mR-NA表达抑制率分别为50.25%和53.40%,MMP7蛋白表达抑制率分别为41.58%和40.49%。Transwell小室实验检测转染后72 h的S2、S3组K1细胞,较正常组相比抑制率分别为35.87%和30.16%。而转染的S1、Normal组、Control组在细胞的侵袭力方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论 S2、S3组CD147-siRNA可以有效阻断CD147的表达,抑制肿瘤细胞的体外侵袭能力,CD147特异性siRNA作为一种治疗肿瘤的新途径值得进一步研究。
- 张立永赵文新颜守义万光俊王波
- 关键词:甲状腺肿瘤CD147MMP7肿瘤侵袭