国家自然科学基金(30671498) 作品数:21 被引量:111 H指数:7 相关作者: 王慧 王树迎 尹逊河 王淑静 郝建民 更多>> 相关机构: 山东农业大学 山东大学 中国海洋大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省科技攻关计划 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
LHR基因在济宁青山羊发情周期不同阶段子宫中表达差异的研究 被引量:8 2009年 从济宁青山羊子宫组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增黄体生成素受体(LHR)基因,获得一条286bp的片段,以pGEM-TEasy vector为载体,转染大肠杆菌E.coliDH5α,筛选阳性克隆并测序。采用优化的半定量RT-PCR技术,以山羊GAPDH为分子内参,比较研究了发情周期不同阶段的济宁青山羊子宫组织中LHR基因的表达差异。结果表明:得到的片段为山羊LHR基因的部分序列,与GenBank中登录的山羊LHR基因(AF379199)41-326 bp序列同源性高达100%。LHRmRNA在整个发情周期的子宫中都有表达。其中,发情期的表达水平最低(0.454±0.06),且与其它时期比较均差异显著(P<0.05),随之在间情期升至最高值(0.705±0.09),尔后在发情前期降至(0.553±0.07)。这一研究结果为山羊的生殖内分泌调控机制研究提供了分子水平的数据。 申颖 王慧 王树迎 王立芹 侯衍猛 黄丽波关键词:半定量RT-PCR 发情周期 济宁青山羊 多胎与单胎山羊发情期卵巢褪黑素受体基因的克隆测序分析 2011年 为揭示褪黑素影响山羊繁殖性状的遗传机制,本研究采用差异显示PCR(DDRT-PCR)和克隆测序技术,研究了褪黑素受体1a(MelR1a)基因在多胎的济宁青山羊和单胎的沂蒙黑山羊发情期卵巢组织中的表达情况,并对MelR1a基因进行了克隆测序分析。检测结果表明,MelR1a在两种山羊卵巢中均有表达,说明,褪黑素可以通过分布于卵巢中的褪黑素受体而对山羊的生殖发挥重要的调控作用。克隆测序分析结果表明,两种山羊发情期卵巢组织中褪黑素受体1a基因的碱基组成没有变异,说明山羊褪黑素受体基因序列具有高度的保守性。 汪运舟 曾启繁 陈维云 王慧 王树迎关键词:济宁青山羊 沂蒙黑山羊 卵巢 济宁青山羊皮肤不同部位褪黑素受体基因的表达差异及其与皮肤毛囊结构的相关性研究 <正>引言褪黑素(melatonin,MT)是一种主要由松果体分泌的吲哚类激素,它的生理功能是由褪黑素受体(melatoninreceptor,MTR)介导的,松果体是生物钟的重要组成部分,通过分泌褪黑素的节律性改变来影... 傅咏 董彬 王慧关键词:济宁青山羊 褪黑素受体 毛囊 皮肤 文献传递 依托国家级实验教学示范中心 搭建创新人才培养平台 被引量:23 2010年 结合学校动物科学与动物医学国家级实验教学示范中心建设过程中的经验,重点阐述了实验教学改革的措施,借助于示范中心的建设,搭建创新人才培养平台取得的成效及示范辐射作用的发挥情况。 王淑静 郝建民 柳洪洁关键词:动物医学 教学改革 荧光定量PCR检测山羊褪黑素受体表达体系的优化研究 被引量:1 2010年 本研究通过系统对比试验,优化建立了检测山羊卵巢组织中褪黑素受体基因表达量差异的荧光定量PCR技术体系,在这种体系下检测褪黑素受体1A基因在山羊卵巢组织中的差异表达量,可以得到最优的标准曲线,使起始模板浓度与循环数有良好的线性关系,且扩增效率百分数Eff接近1;荧光动力学曲线符合标准的"S"形荧光增长曲线,曲线拐点清楚,基线平而无明显上扬趋势;熔解曲线成单峰,充分说明扩增的特异性高,产物单一,与SYBR Green I荧光染料结合的为目标DNA片段,荧光曲线能够准确反映目的产物的扩增结果。 汪运舟 陈维云 王慧 李俊娴 于婷 王树迎关键词:荧光定量PCR 反转录 反应体系优化 熔解曲线 济宁青山羊皮肤不同部位IGF1表达量差异及其与毛囊发育的相关性研究 <正>前言类胰岛素生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)是动物体内重要的生长调节因子之一,可以促进细胞的有丝分裂,促进细胞增殖和抑制许多细胞系在成熟之前的凋亡。IGF1对毛囊的上皮和... 董彬 赵军 王睿智 王慧关键词:济宁青山羊 毛囊 IGF1 荧光定量RT-PCR 文献传递 发情周期中山羊子宫和输卵管内肥大细胞及组织胺含量的变化 被引量:5 2009年 应用改良甲苯胺蓝染色法和透射电镜技术观察了山羊发情周期4个阶段肥大细胞(MC)在子宫和输卵管内的分布、形态及数量变化规律,用荧光测定改良法检测了子宫和输卵管组织中组织胺(HA)含量。结果显示:MC呈圆形、椭圆形或梭形,在子宫内主要分布在肌层,子宫外膜中零星散在,内膜中散在分布于固有层的子宫腺和血管周围,子宫阜和内膜上皮中未发现。输卵管内MC在黏膜皱襞、肌层和外膜中均有分布。MC在发情后期有明显的脱颗粒现象。发情周期中子宫及输卵管MC数量变化为:MC(发情后期)>MC(发情前期)>MC(间情期)>MC(发情期),子宫肌层MC数量各组间差异极显著(P<0.01),子宫固有层和输卵管内无显著变化。子宫角内HA含量在发情后期与其它时期有显著变化(P<0.05),子宫体、子宫颈和输卵管的变化不明显(P>0.05)。 王立芹 申颖 王树迎 黄丽波 侯衍猛 王慧 王建民关键词:山羊 肥大细胞 子宫 输卵管 组织胺 济宁青山羊发情周期不同阶段LHR在输卵管中的分布及其mRNA表达 运用免疫组织化学和实时荧光定量RT-PCR技术探究济宁青山羊发情周期不同阶段黄体生成素受体(LHR)在输卵管不同部位中的位置分布,并比较研究济宁青山羊发情周期不同阶段输卵管不同部位LHR mRNA表达量的差异。结果显示:... 李广君 王树迎 王慧 侯衍猛 黄丽波关键词:济宁青山羊 荧光定量RT-PCR 免疫组化 输卵管 文献传递 nNOS阳性神经元在家兔脑干的分布及衰老变化 利用SABC免疫组织化学方法,研究神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元在家兔脑干的分布和衰老变化。结果表明:家兔脑干内分布有丰富的nNOS阳性神经元;阳性神经元主要分布于动眼神经核、红核、脑桥核、三叉神经感觉主核以及... 王宪龙 尹逊河 邱建华 蔡玉梅 郭丽红关键词:神经型一氧化氮合酶 衰老变化 文献传递 家兔脑缺血再灌注损伤后边缘系统一氧化氮合酶活性的变化及血塞通对其变化的影响 被引量:1 2010年 为了研究家兔脑缺血再灌注损伤后边缘系统一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及血塞通对其活性变化的影响,探讨血塞通对全脑缺血家兔的脑保护作用。选取3月龄哈白兔63只,体质量(1500±150)g,随机分为脑缺血治疗组、脑缺血未治疗组和对照组3组,手术建立家兔全脑缺血模型,应用生化检测技术测定脑缺血再灌注后不同时间边缘系统NOS活性变化及血塞通对其活性的影响。结果表明,边缘系统内NOS活性在脑缺血再灌注2h后开始升高,6h达到高峰,随后逐渐下降,24~96h活性持续下降,120h后恢复至正常水平;脑缺血治疗组下降幅度大、速度快,在96h即恢复至正常水平。缺血治疗组和正常对照组NOS的活性极显著低于缺血未治疗组(P<0.01)。结果提示,血塞通可以通过减弱NOS活性进而维持NO的生理含量,对全脑缺血再灌注损伤家兔有明显的脑保护作用。 赵军 尹逊河 梁京芸 谢有莲 郭丽红关键词:血塞通 缺血再灌注 一氧化氮合酶活性