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国家自然科学基金(30470853C07)
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杨跃
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孙璐
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孙璐
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杨跃
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2009
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Thy-1表达水平对肺腺癌细胞A549迁移性及部分相关基因表达的影响
2009年
目的验证Thy-1(CD90)摹因与肺癌细胞迁移潜能的关系,并探讨其作用机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.0构建包含Thy-1基因全长序列的重组表达质粒载体,转染A549细胞,G418筛选获得稳定克隆,采用RT—PCR及免疫荧光技术检测重组质粒转染后细胞内Thy-1mRNA及蛋白表达水平的改变;通过体外Transwell迁移实验研究外源性Thy-1对A549细胞迁移能力的影响。结果构建了pcDNA3.0-Thy-1真核细胞表达载体;成功建立了稳定表达外源性人Thy-1蛋白的肺癌A549细胞株。Transwell实验提示,表达外源性Thy-1蛋白的A549细胞较对照组细胞体外迁移能力下降(P〈0.0001);基因芯片结果提示,Thy-1基因在肺癌细胞中表达后,影响了25个细胞迁移相关基因的表达,在检测基因表达差异时,RT—PCR与基因芯片能够得到基本-致的结果。结论Thy-1基因的过表达能降低肺癌细胞系A549细胞的迁移能力,并改变A549细胞多个细胞迁移相关基因的表达,提示Thy-1在肺癌组织的表达状态可能影响肺癌的转移性。
孙璐
陈晋峰
王嘉
赵威
杨跃
关键词:
THY-1
A549细胞
TRANSWELL
反转录-聚合酶链式反应
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