黑龙江省农业科学院博士后基金(LRB04-185)
- 作品数：4 被引量：27H指数：3
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- 昆明小白鼠胚胎干细胞分离培养的影响因素被引量：2
- 2010年
- 为了研究影响胚胎干细胞（ESC）体外分离克隆的因素,试验采用3~5日龄大鼠心肌细胞制成心肌细胞条件培养基（RH-CM）,比较了4种培养体系对小鼠胚胎干细胞体外培养的影响,并分析比较了不同饲养层对胚胎干细胞分离克隆造成的影响。结果表明：添加重组鼠白血病抑制因子和心肌细胞条件培养基在胚胎贴壁率、内细胞团（ICM）形成率和原代胚胎干细胞集落形成率以及抑制分化的过程中起到的作用显著优于未添加任何诱导成分的培养基;作为饲养层,小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）分离培养胚胎干细胞的效果优于小鼠睾丸支持细胞（MS）。
- 黄治军吕中华郑鹏李冬旭张贵学
- 关键词：胚胎干细胞饲养层
- 新生牛生精上皮细胞体外培养的研究被引量：5
- 2009年
- 两步酶消化法制备新生牛生精上皮细胞悬液,分离纯化、鉴定精原干细胞和支持细胞,冷冻保存支持细胞。以支持细胞为饲养层探索不同培养条件下精原干细胞的增殖情况,免疫组化鉴定。结果表明:10%DMSO与0.1mol/L的海藻糖组合作为冷冻保护剂,冷冻效果较好;血清浓度为2.5%、支持细胞密度为5×105个/mL时,新生牛精原干细胞较易形成集落;精原干细胞及其集落的AKP染色和C-kit免疫组化均呈阳性。
- 吕中华郑鹏黄治军李冬旭张贵学
- 关键词：精原干细胞支持细胞体外培养
- 犊牛睾丸组织培养及PGP 9.5基因的检测被引量：9
- 2010年
- 收集新生牛睾丸,进行组织学观察与组织的体外培养,在10%血清培养液中培养1周和2周后进行组织学观察与RT-PCR分析。结果表明:新生牛睾丸组织经体外培养1周时,管腔直径增大,精原干细胞数明显增多;体外培养2周时,管腔直径继续扩增,精原干细胞数量减少;在新鲜睾丸组织、培养1周和2周的睾丸组织中PGP 9.5持续表达。
- 郑鹏于磊田亚光黄贺张贵学
- 关键词：睾丸体外培养组织学
- 新生牛睾丸细胞的分离纯化与冷冻保存被引量：20
- 2010年
- 以新生牛作为实验动物,取睾丸进行制样组织学观察,并将睾丸消化成单细胞悬液,对生精上皮细胞进行分离纯化、细胞鉴定及冷冻保存,研究不同分离纯化及冷冻保存方法对睾丸细胞的影响。结果表明,新生牛曲细精管中含有精原干细胞和支持细胞,差速贴壁法能有效分离两种细胞;精原干细胞鉴定,AKP、C-kit、OCT-4均呈阳性;支持细胞鉴定,油红O、波形蛋白均呈阳性。精原干细胞冷冻保存以10%的二甲基亚砜为冷冻剂的效果最好,支持细胞冷冻保存以10%乙二醇和0.1 mmol.L-1海藻糖组合效果最好。
- 郑鹏李冬旭田亚光黄贺张贵学
- 关键词：精原干细胞支持细胞分离纯化冷冻保存
- 犊牛睾丸支持细胞体外培养与鉴定
- 新生牛睾丸解离成单细胞悬液,差速贴壁法纯化支持细胞后进行体外培养与鉴定。结果表明:2%血清的培养液能够用于支持细胞的体外培养;支持细胞体外培养能够传至第20代,随着传代次数的增加,增值速度越来越慢;免疫组化染色显示,波形...
- 郑鹏李冬旭于磊黄贺田亚光张贵学
- 关键词：支持细胞体外培养
- 文献传递
