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国家自然科学基金(30973116)

作品数：7 被引量：24H指数：3
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文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 5篇细胞
  • 3篇愈合
  • 3篇细胞运动
  • 3篇干细胞
  • 3篇表皮干细胞
  • 2篇氧化氮
  • 2篇一氧化氮
  • 2篇迁移
  • 2篇创面
  • 2篇创面愈合
  • 1篇信号
  • 1篇信号分子
  • 1篇血小板
  • 1篇血小板源
  • 1篇血小板源性
  • 1篇血小板源性生...
  • 1篇血小板源性生...
  • 1篇源性
  • 1篇源性生长因子
  • 1篇增殖

机构

  • 6篇第三军医大学...

作者

  • 6篇罗高兴
  • 6篇吴军
  • 3篇周俊峄
  • 3篇胡晓红
  • 3篇张小容
  • 3篇杨思思
  • 2篇崔艳艳
  • 2篇贺伟峰
  • 2篇谭江琳
  • 2篇孙薇
  • 2篇王颖
  • 2篇杨俊杰
  • 2篇詹日兴
  • 2篇李海胜
  • 2篇姚志慧
  • 1篇杨世伟
  • 1篇罗晓丽
  • 1篇彭彦孟
  • 1篇张路
  • 1篇姚智慧

传媒

  • 6篇中华烧伤杂志
  • 1篇Burns ...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 1篇2014
  • 2篇2012
  • 2篇2010
共 7 条 记 录，以下是 1-7
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排序方式：
一氧化氮对HaCaT细胞迁移功能的影响被引量：1
2010年
目的 了解外源性NO对HaCaT细胞迁移功能的影响及其机制.方法 以硝普钠作为NO的供体,在HaCaT细胞培养液中加入0.1、1.0、10.0、100.0、1000.0 μmol/L硝普钠,分别于划痕0 h（划痕即时）及划痕后6、12、24、48 h观察并计算细胞迁移率.根据该结果筛选出硝普钠最佳作用浓度及作用时间,以此为实验刺激条件,应用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变,采用蛋白质印迹法、PCR等方法检测实验组（加入10.0 μmol/L硝普钠培养24 h）及阴性对照组整合素β_1、RhoA、cdc42、Rac1蛋白及RhoA、cdc42、Rac1 mRNA表达情况.对各实验结果行单因素方差分析和重复测量的方差分析.结果 加入硝普钠处理后各浓度组细胞迁移率随划痕时间的延长而逐渐增加.加入10.0 μmoL/L的硝普钠划痕后6～48 h与划痕0 h比较,差异均有统计学意义（F=31.002,P值均小于0.05）.激光共聚焦显微镜显示,阴性对照组细胞纤毛稀少,胞内应力纤维束纤细,而实验组纤毛明显增多,胞内应力性纤维束增粗.实验组整合素β1蛋白表达水平明显低于阴性对照组（F=8.25,P=0.015）;而RhoA的蛋白表达水平为0.92±0.04,高于阴性对照组的0.64±0.04（F=7.25,P〈0.05）,cdc42、Rac1蛋白表达也高于阴性对照组（F值分别为14.10、6.50,P值均小于0.05）.实验组RhoA、cdc42、Rac1的mRNA水平均高于阴性对照组（F值分别为23.67、10.39、9.52,P值均小于0.05）.结论 适宜浓度的外源性NO可促进HaCaT的增殖及迁移,提示其在皮肤创面修复中起重要作用.其机制可能与整合素β_1表达下降、细胞骨架的改变有关.
杨世伟吴军罗高兴张小容胡晓红彭彦孟杨俊杰罗晓丽王颖
关键词：一氧化氮细胞运动细胞骨架HACAT细胞
P311在小鼠浅Ⅱ度烧伤及体外细胞创伤模型中对表皮干细胞迁移的影响被引量：4
2012年
目的观察P311在小鼠浅Ⅱ发烧伤技体外细胞创伤模型中对表皮干细胞（ESC）辽移的作用并探讨其机制。方法（1）取18只C57BL／6小鼠，其中15只行背部浅Ⅱ度烧伤，于伤后6、12、24、48、72h取创面及创周皮肤组织，各时相点3只；余下3只小鼠作为正常对照，同法取止常皮肤标本。采用生物素-链霉亲和素-过氧化物酶（SP）染色法观察P311在上述皮肤组织中的表达。（2）取6只新生的C57BL／6小鼠，连续3d腹腔注射50μg／g溴脱氧尿苷（BrdU，2次／（1）建立ESC示踪模型。7周后于其背部制作浅Ⅱ度烧伤创面。伤后72h取创面皮肤组织制作连续切片，SP法免疫组织化学染色，观察P311阳性和BrdU阳性细胞空间共定位情况。（3）构建腺病毒空载体pAdEasy-增强型绿色荧光蛋h（EGFP）及P311腺病毒表达载体pAdEasy-EGFP-P311，并进行包装。应用Ⅳ型胶原快速黏附法分离培养人ESC,按照随机数字表法将其分为P311高表达组和EGFP对照组，每组3孔，分别以pAdEasy-EGFP-P311及pAdEasy-EGFP腺病毒感染ESC。2组ESC经丝裂毒素C处理2h后行划痕实验。划痕后0（即刻）、24、48、72h测量地固定范围内划痕剩余面积，计算划痕愈合面积百分比。对数据进行独立样本t检验。结果（1）浅Ⅱ度烧伤后不同时相点，P311在创面不同部位的表达量各不相同。伤后创面毛囊、新生表皮巾P311表达量随时间延长逐渐上升；创用表皮及毛囊的P311表达量于伤后12h达高峰，72h回落至正常。（2）应用BrdU标记的小鼠浅Ⅱ度烧伤创Ⅲ新生表皮层可见P311阳性细胞和BrdU阳性细胞共定位。（3）划痕后48、72h，P311高表达组ESC划痕愈合面积百分比分别为（69±31）％、（89±26）％，明显高于EGFP刘照组[（35±12）％、（46±31）％，t值分别为-2．336、-2，611，P值均小于0．05]。结论P311可明显促进小鼠浅Ⅱ度烧伤创面及体外细胞创伤模型中的ES
孙薇姚志慧詹日兴张小容崔艳艳谭江琳杨思思胡晓红周俊峄吴军罗高兴
关键词：烧伤细胞运动表皮干细胞
生长因子促进创面愈合研究进展被引量：12
2010年
1生长因子（GF）的临床应用进展 GF是一类对靶细胞增殖和分化有调节作用的肽类，是体内重要信号分子，在调节生长发育、组织修复、肿瘤发生等多方面发挥重要作用。CF种类繁多，通常按照GF的受体（靶细胞）及特性将其分为EGF、Fb生长因子（FGF）、神经生长因子（NGF）、血小板源性生长因子（PDGF）和TGF等。GF自20世纪80年代开始应用于临床，其对创伤修复的促进作用逐渐明确。近年来，随着基因工程技术的成熟，
周俊峄罗高兴吴军
关键词：神经生长因子促进创面愈合血小板源性生长因子基因工程技术细胞增殖信号分子
P311和转化生长因子β1相互作用及其对小鼠成纤维细胞功能的影响被引量：2
2016年
目的 探讨P311和TGF—β1在小鼠皮肤Fb中的相互作用及其对Fb功能的影响。方法取P311野生型和P311基因敲除型C57BL／6新生小鼠各5只，分离培养2种小鼠皮肤Fh。采用第2代Fb完成以下实验，每个实验重复3次。（1）取P311野生型小鼠Fb，按随机数字表法（分组方法下同）分为空白对照组和P311过表达组，每组36孔。空白对照组每孔加入10μL空载体腺病毒，P311过表达组每孔加入等效价P311腺病毒表达载体。培养48h后，采用实时荧光定量RT—PCR法和蛋白质印迹法分别检测2组Fb的P311mRNA及TGF—β1、α平滑肌肌动蛋白（a-SMA）、I型胶原的mRNA和蛋白表达量（检测方法下同）。（2）取P311野生型和P311基因敲除型小鼠Fb各4瓶，待细胞生长至80％～90％融合时，检测2种Fh的TGF—β1、a-SMA、I型胶原的mRNA和蛋白表达量。（3）取P311野生型小鼠Fb用体积分数为1％FBS的DMEM培养液饥饿处理3h后，分为空白对照组及5、10、15、20、25ng／mLTGF—β1组，每组2瓶。空白对照组常规培养，后5组F11分别加入5、10、15、20、25ng／mLTGF—β1溶液，培养48h后检测6组F11的P311mRNA表达量。另取P311野生型小鼠Fh，分为空白对照组和10ng／mLTGF—β1组，每组6孔，免疫荧光法检测2组Fb的P311蛋白表达情况。（4）将P311野生型小鼠F11同前饥饿处理后，分为空白对照组和10ng／mLTGF—β1组，每组2瓶，空白对照组常规培养，后组加入10ng／mL的TGF-β溶液，培养48h后，检测2组Fh的d—SMA、I型胶原的mRNA和蛋白表达量。取P311基因敲除型小鼠Fb，同前分组及处理后，检测2组Fh的d—SMA、I型胶原的mRNA和蛋白表达量。对数据行单因素方差分析、t检验。结果（1）P311过表达组Fh的P311mRNA表达水平较空白对照组增高近30万倍（t=9．942，P〈0．001）。P311过表达组Fh的TGF—β1、d—SMA、I型胶原的mRNA，以及TGF-β1前体、TGF—β1活化态、a-SMA、I型胶
张路李海胜姚智慧杨思思贺伟峰吴军罗高兴
关键词：瘢痕成纤维细胞转化生长因子Β1
一氧化氮对体外培养人表皮干细胞生物学行为的影响被引量：1
2012年
目的观察外源性NO对人表皮干细胞（ESC）脱黏附、增殖以及迁移功能的影响。方法采用改良Ⅳ型胶原快速黏附法分离、培养人ESC，倒置相差显微镜下观察其形态；蛋白质印迹法和免疫荧光法观察ESC标志物整合素p，和细胞角蛋H 19（ CK19）的表达。对贴壁生长的ESC行划痕处理，用O（对照）、1、10、100、500 μmolL NO供体S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺（SNAP）作用细胞12、24 h，检测细胞迁移率；Transwe11实验检测SNAP（浓度同上）对ESC趋化能力的影响（计数转膜细胞）。采用0、10、100、500 μmolL SNAP作用细胞1 h，黏附实验检测SNAP对ESC黏附功能的影响，计算黏附抑制率；于上述4种浓度SNAP作用O（即刻）、12、24、48 h，采用酶标仪检测ESC增殖水平， 数据以吸光度值表示。对数据进行单凶素方差分析和Dunnett z检验。 结果 （1）倒置相差显微镜下可见，细胞培养5-9 d形成小克隆；培养10 -14 d，细胞增殖明显加快。蛋白质印迹法和免疫荧光法检测结果显示，所分离的细胞均能表达CK19和整合素p．。由此鉴定该细胞为ESC。（2）与O μmolL SNAP怍用12、24 h后细胞迁移率[（35.7±0.3）%、（45.7 ＋5.0）%]比较，1-100 μmolLSNAP均能促进ESC迁移，其中100 μmolL SNAP作用后细胞迁移率达峰值[（48.8±2.7）%、（82.1±15.8）%，P值分别为8. 34、5.10，P值均小于0.01]。100 y,mo1/L SNAP作用后转膜细胞数显著多于O μmolL SNAP作用后（t=9. 24，P=0.00）。100、500 μmolL SNAP作用后，ESC黏附能力明显低于OμmolL SNAP作用后（t值分别为4.30、4.67，P值均为0.00）。100、500 μmolL SNAP作用24、48 h，细胞增殖能力明显强于OμmolL SNAP作用后（t值为2.84-8.17，P值均小于0.05）。 结论适宜浓度的外源性NO对体外培养人ESC的迁移功能有促进作用。外源性NO对体外培养人ESC具有脱黏附、促增殖作用。
詹日兴孙薇姚志慧崔艳艳杨思思谭江琳周俊峄王颖杨俊杰张小容胡晓红吴军罗高兴
关键词：一氧化氮细胞运动表皮干细胞创面愈合
缺氧诱导因子1α对P311的作用及其对小鼠表皮干细胞迁移的影响被引量：2
2017年
目的体外条件下模拟缺氧环境，探讨P311和缺氧诱导因子1α（HIF-1α）相互作用及对小鼠表皮干细胞（ESC）迁移影响。方法取15只C57BL/6J野生型新生小鼠，5只同属来源P311基因敲除新生小鼠，分离培养2种小鼠ESC，取第1代细胞行形态学观察，采用流式细胞仪检测细胞表面标志物CD71、CD49f表达后行以下实验。（1）取2种小鼠ESC划痕处理后，立即按随机数字表法（下同）将P311基因敲除小鼠ESC分为常氧组（将细胞加入完全培养基置于常氧二氧化碳培养箱培养，常氧处理下同）和缺氧组（将细胞置于含体积分数1%氧气的缺氧二氧化碳培养箱培养，缺氧处理下同），每组12个插件；将野生型小鼠ESC分为常氧组、单纯缺氧组、二甲基亚砜（DMSO）对照组（用2 μL DMSO溶剂常氧处理1 h后行缺氧培养）、HIF-1α抑制剂组（加入11 μmol/L HIF-1抑制剂2 μL常氧培养1 h后行缺氧培养）、HIF-1α稳定剂组（加入2 μmol/L FG-4592 2 μL常氧处理1 h后行缺氧培养），每组12个插件。每组各时相点取3个插件分别于划痕后0（即刻）、12 、24、48 h在100倍倒置相差显微镜下测量划痕剩余宽度。（2）取野生型小鼠ESC行缺氧培养，蛋白质印迹法检测缺氧0（即刻）、12、24、48 h HIF-1α蛋白表达。（3）取野生型小鼠ESC同实验（1）分为单纯缺氧组、DMSO对照组、HIF-1α抑制剂组、HIF-1α稳定剂组并行相应处理，分别在缺氧0、12、24、48 h采用实时荧光定量RT-PCR法检测P311 mRNA表达，免疫细胞化学染色法观测P311表达（样本数均为12）。（4）取第2代人胚胎肾293（HEK-293）细胞分为空载缺氧组（转染空载质粒后进行缺氧培养）、P311常氧组（转染P311报告基因质粒后进行常氧培养）、P311缺氧组（转染P311报告基因质粒后进行缺氧培养）、P311缺氧＋HIF-1α抑制剂组（HIF-1抑制剂处理后转染P311报告基因质粒然后进行缺
徐正东李海胜王淞贺伟峰吴军罗高兴
关键词：缺氧诱导因子1伤口愈合表皮干细胞
Comparative proteomic analysis of extracellular matrix proteins secreted by hypertrophic scar witb normal skin fibroblasts被引量：3
2014年
The formation of hypertrophic scars (HSs) is a fibroproliferative disorder of abnormal wound healing. HSs usually characterize excessive proliferation of fibroblasts, abnormal deposition of extracellular matrix (ECM) during wound healing, associated with cosmetic, functional, and psychological problems. Owing to the role of ECM proteins in scar formation, we comparatively analyzed matrix proteins secreted by normal skin fibroblasts (NSFs) and HS fibroblasts (HSFs). The acetone-extracted secreted proteins were separated by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and identified by mass spectrometry (MS). Based on Go annotation of MS data, the profiling of ECM proteins was established and scar-related proteins have been screened out. The functions of several ECM proteins identified by MS have been discussed, such as collagens I, VI, XII, fibronectin, decorin, lumican, and protein procollagen C endopeptidase enhancer 1 (PCPE-1). Among them, the MS result of PCPE-1 was supported by Western blotting that PCPE-1 from HSFs were significantly upregulated than that from NSFs. It is suggested that PCPE-1 could be a potential target for scar treatment. The exploration of scar related proteins may provide new perspectives on understanding the mechanism of scar formation and open a new way to scar treatment and prevention.
Li MaChengjun GanYong HuangYing WangGaoxing LuoJun Wu
关键词：FIBROBLASTPROTEOMICS
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