国家自然科学基金(30973118)
- 作品数：6 被引量：32H指数：4
- 相关作者：张志赵元元刘昌玲陈宾张涛更多>>
- 相关机构：广州市红十字会医院暨南大学中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自体与异体活体小皮片混合移植治疗大面积深度烧伤的临床研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨自体与异体活体小皮片混合移植覆盖大面积深度烧伤创面的可行性。方法对9例特大面积深度烧伤患者的大面积肉芽创面,采用自体与异体活体小皮片混合移植法覆盖,自体与异体皮比例为1:1,自体和异体取皮面积与覆盖肉芽创面面积均为1:2～3,植皮创面常规包扎、换药,疗程中不应用免疫抑制剂或其他抗排斥药物。术后坚持随访,观察创面愈合情况。结果本组9例,均在伤后3周后行肉芽创面自、异体小皮片混合移植术。最大覆盖肉芽创面面积为70%,最小为12%。术后3d,自、异体皮片存活良好,术后7～10d,创面基本愈合。最长随访2年10个月,最短随访5个月,愈合过程中及愈合后均未见明显的异体皮被排斥而出现创面裸露等现象。结论自体与异体小皮片按一定比例混合移植,可作为治疗大面积深度烧伤创面的一种覆盖方法。混合移植的自、异体皮比例及移植后的异体皮成活和局部免疫耐受机制,有待进一步研究。
- 李孝建张志霍丽贞梁蓉钟晓雯林伟华张涛钟棉
- 关键词：烧伤
- 人增生性瘢痕成纤维细胞中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制被引量：11
- 2017年
- 目的探讨人增生性瘢痕Fb中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制。方法收集笔者单位2013年1—10月收治的8例烧伤后瘢痕增生需行手术治疗患者的增生性瘢痕组织及其手术切除的全层皮肤供皮区的正常皮肤组织。组织块培养法分离人增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，并进行传代培养，取第3～5代细胞进行以下实验。（1）取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，蛋白质印迹法检测2种细胞中SnoN的蛋白表达。（2）另取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，RT—PCR法检测2种细胞中SnoNmRNA表达。（3）另取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，加入10ng／mLTGF-β1，刺激30min和1、2、6h后，同前检测未刺激及刺激后2种细胞中SnoN的蛋白及mRNA表达。对数据行单因素方差分析、独立样本t检验。结果（1）增生性瘢痕Fb中SnoN的蛋白表达量为0．020±0．003，明显低于正常皮肤Fb的0．032±0．005（t=7．19，P〈0．05）。（2）增生性瘢痕Fb中SnoNmRNA表达量为0．407±0．157，与正常皮肤Fb的0．339±0．095无明显差异（t=-1．29，P〉0．05）。（3）正常皮肤Fb中SnoN蛋白表达量在TGF—β1刺激下呈时间依赖性增高，刺激30min和1、2、6h，细胞中SnoN蛋白表达量均明显高于未刺激细胞（t值为2．27～27．89，P值均小于0．05）。增生性瘢痕Fb中SnoN蛋白表达量在TGF—β1刺激下呈时间依赖性降低，刺激30min和1、2、6h，细胞中SnoN蛋白表达量均明显低于未刺激细胞（t值为10．80—13．85，P值均小于0．05）。（4）正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb中SnoNmRNA表达量在TGF-β1刺激下均呈时间依赖性增高，2种细胞刺激30min和1、2、6h，其SnoNmRNA表达量均明显高于未刺激细胞（t值为18．16～58．22，P值均小于0．05）。结论增生性瘢痕Fh中SnoN蛋白表达减少，导致其对TGF-β1信号抑制作用减弱，从而放大了TGF-β1信号，可能参与了增生性瘢痕的形成。
- 况芳张志陈宾刘昌玲赵元元许志荣
- 关键词：瘢痕成纤维细胞转化生长因子Β1SNON
- Smad泛素化调节因子-2及其mRNA在增生性瘢痕组织中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的研究烧伤后增生性瘢痕组织中Smad泛素化调节因子-2(Smurf2)及其mRNA的表达。方法选取烧伤后增生性瘢痕患者9例,取材于患者整形手术切除的瘢痕,同时取同一患者剩余正常皮肤作为对照。Westernblotting方法检测Smurf2蛋白水平,RT-PCR检测其mRNA表达;进一步分离培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞,加入外源性转化生长因子β1(TGF-β1)刺激,观察Smurf2蛋白和mRNA水平的变化。结果增生性瘢痕组织中Smurf2蛋白水平和mRNA表达显著高于正常皮肤(P<0.05),而且,在外源性TGF-β1刺激下,瘢痕成纤维细胞中Smurf2蛋白和mRNA表达呈时间依赖性增加。结论烧伤后增生性瘢痕组织中Smurf2及其mRNA表达增强;在TGF-β1刺激下,瘢痕成纤维细胞中Smurf2及其mRNA表达逐渐增加。
- 张志李孝建梁达荣李叶扬
- 关键词：转化生长因子Β增生性瘢痕
- 降钙素原对烧伤脓毒症诊断价值的Meta分析
- 2015年
- 目的系统性评价降钙素原对烧伤脓毒症的诊断价值。方法检索Pub Med、Elsevier、Springer、Cochrane图书馆、CNKI、万方数据库中的文献,根据QUADAS评价文献的质量。用Meta-Disc1.4和Stata12.0软件进行统计量的计算及图表绘制。结果纳入文献8篇,分两组:组1合并统计393例烧伤患者,汇总敏感度、特异度和SROC AUC、Q*值分别为0.88、0.82和0.930 7、0.866 0,组2合并统计105例烧伤患者105例共1351个时间点的数据,汇总敏感度、特异度和SROC AUC、Q*值分别为0.70、0.82和0.901 8、0.833 1,诊断阈值是异质性的主要来源。结论PCT对烧伤脓毒症诊断效能较高,临床可应用该指标早期诊断烧伤脓毒症,同时需要联合其他诊断指标,进一步提高烧伤脓毒症诊断的敏感度和特异度。
- 赵元元张志李孝建刘昌玲况芳刘志河曹雯娟
- 关键词：烧伤脓毒症降钙素原META分析
- Smurf2对增生性瘢痕TGF-β1信号通路负向调节因子Smad7的影响及调控机制被引量：16
- 2018年
- 目的探讨Smurf2对增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1/Smad信号转导通路负向调节因子Smad7的影响及调控机制。方法标本来自暨南大学附属广州市红十字会医院2014年1月至10月收治的8例需要手术的增生性瘢痕患者,年龄1岁8个月至7岁,瘢痕增生的时间在2~12个月,以同一患者术中剩余正常皮肤作为对照。采用组织块培养法分离后传代培养人增生性瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞,取第3~5代细胞进行实验。①采用蛋白质印记法检测2组细胞中Smad7的蛋白表达水平;②加入外源性TGF-β1(10ng/ml)作用0min、5min、15min、30min、1h、2h、12h后,采用RT-PCR和蛋白质印记法分别检测2组细胞中Smad7的mRNA和蛋白表达水平;③收集增生性瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞的细胞裂解液,分别加入泛素化混合物于37℃孵育1h、2h、6h,采用蛋白质印记法检测2组细胞中Smad7的体外降解水平;④收集增生性瘢痕成纤维细胞的细胞裂解液,同时加入泛素化混合物及蛋白酶体抑制剂MG132/MG115(50μmol/L∶50μmol/L),研究其对Smad7体外降解的抑制作用;⑤利用免疫共沉淀技术,检测增生性瘢痕成纤维细胞中Smad7与E3泛素连接酶Smurf2是否存在相互作用;⑥采用siRNA干扰技术沉默增生性瘢痕成纤维细胞中Smurf2的基因表达,研究沉默Smurf2后,增生性瘢痕成纤维细胞中Smad7蛋白在TGF-β1刺激下的表达水平。实验数据采用两样本t检验、单因素方差分析进行统计分析,组内两两比较采用SNK法,以P<0.05认为差异有统计学意义。结果在正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞中,Smad7的蛋白表达水平无明显差异(t=0.763,P=0.46);②在外源性TGF-β1刺激下,正常皮肤成纤维细胞中Smad7mRNA和蛋白表达水平均呈时间依赖性增高均P<0.05,增生性瘢痕成纤维细胞中Smad7mRNA表达呈时间依赖性增加(除5min时P>0.05,其余各时间点与未刺激细胞比较,P值均<0.05),蛋白水平
- 刘昌玲张志刘志河陈宾汤文彬曹雯娟李孝建
- 关键词：转化生长因子-Β增生性瘢痕SMURF2SMAD蛋白
- 沉默Smad泛素化调节因子2基因对人增生性瘢痕成纤维细胞功能的影响被引量：6
- 2017年
- 目的探讨沉默Smad泛素化调节因子2（Smurf2）基因对人增生性瘢痕Fb分泌TGF－β1、α平滑肌肌动蛋白（α－SMA）、Ⅰ型胶原的影响。
方法取9例烧伤后增生性瘢痕患者的正常皮肤组织和瘢痕组织，用组织块法培养人正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb，将2种第3代Fb均按随机数字表法分成6组，每组9孔。空白对照组，不加任何小干扰RNA培养72 h；阴性对照组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h；Smurf2小干扰RNA转染组，转染100 nmol/L的Smurf2小干扰RNA培养72 h；空白对照＋TGF－β1组，不加任何小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；阴性对照＋TGF－β1组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组，转染Smurf2小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h。（1）分别采用蛋白质印迹法、RT－PCR法检测2种细胞空白对照组、阴性对照组、Smurf2小干扰RNA转染组Smurf2的蛋白和mRNA表达。（2）采用ELISA法检测2种细胞空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量。（3）采用蛋白质印迹法检测2种细胞6组α－SMA的蛋白表达，ELISA法检测2种细胞6组细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量。（4）采用RT－PCR法检测2种细胞6组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达。以上实验中各组样本数均为9。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。
结果（1）2种细胞Smurf2小干扰RNA转染组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均明显低于空白对照组和阴性对照组（P值均小于0.05），空白对照组和阴性对照组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均相近（P值均大于0.05）。（2）增生性瘢痕Fb空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量分别为（4.34±0.56）、（2.14±0.28）pg/mL，均明显高于正常皮肤Fb的（1.52±0.20）、（1.41±0.18）pg/mL（P值均小于0.05）。增生
- 张志况芳刘昌玲陈宾汤文彬李孝建
- 关键词：瘢痕成纤维细胞转化生长因子Β
