国家自然科学基金(30371204) 作品数:29 被引量:85 H指数:6 相关作者: 邬堂春 谭皓 杨晓波 牛丕业 宫智勇 更多>> 相关机构: 华中科技大学 东风汽车公司 太原钢铁集团有限公司 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 山西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 一般工业技术 更多>>
紫外线C对A549细胞HSPs表达的影响 被引量:2 2007年 [目的]研究紫外线C(UVC)对热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)27、70及90的影响。[方法]用紫外线不同照射剂量(0、10、20、40、80J/m2)来照射A549细胞株,用Western-blot检测HSP27、HSP70、HSP90的表达水平。[结果]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27表达在20J/m2时达到高峰,HSP70表达在40J/m2时达到高峰,HSP90各剂量的UVC照射下,未见显著性变化。与对照组(0J/m2)相比,在10J/m2时,HSP27和HSP70表达增加(P<0.05);在20J/m2时,HSP27表达显著增加(P<0.01),HSP70表达也继续增加(P<0.05);在40J/m2时,HSP27表达开始下降,但与对照组相比差异没有显著性(P>0.05),HSP70表达仍显著增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。在80J/m2时,HSP27表达与对照组和40J/m2组相比,差异无显著性(P>0.05),HSP70表达下降,但仍高于对照组(P<0.05)。在10、20、40和80J/m2的UVC照射下,HSP90表达变化均未见显著性差异(P>0.05)。[结论]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27,HSP70能被一定剂量范围的UVC照射所诱导,高剂量UVC照射时HSP27、HSP70的表达被抑制,但HSP90表达未发现能被诱导。 牛丕业 宫智勇 谭皓 王峰 邹云峰 杨瑾 段燕英 袁晶 邬堂春关键词:HSP70 HSP27 HSP90 A549细胞 高温、苯并芘-7,8-二醇-9,10-环氧化物单独作用对人肺腺癌细胞Hsp27、Hsp70表达的影响 被引量:1 2006年 目的研究不同温度和不同浓度B(a)P7,8二醇9,10环氧化物(BPDE)作用A549细胞后,热休克蛋白27(HSP2)、热休克蛋白70(Hsp70)的表达规律。方法体外培养的A549细胞分为高温应激组和BPDE组。37℃培养的细胞作对照,高温应激组细胞置于高温(39℃、42℃、43℃)应激2小时。BPDE组用不同浓度的BPDE(0、2、4、8μmolL)染毒2h。利用Westernblot技术分析A549细胞株中Hsp27、Hsp70的表达水平。结果高温应激组细胞Hsp27的表达较37℃对照明显升高,差异均有显著性(P<0.05)。在39℃,Hsp27的表达水平达到峰值。高温处理后,Hsp70的表达也增加,在42℃达到最高,且与对照相比差异有显著性(P<0.05)。BPDE组Hsp27、Hsp70的表达均较对照明显升高,其中Hsp27的表达水平在实验用最高浓度8μmolL达到最高,且与对照比较差异有显著性(P<0.05),但仍处于上升阶段。Hsp70在4μmolL达到最高,在4μmolL和8μmolL时,Hsp70的表达水平与对照比较差异有显著性(P<0.05)。结论高温和BPDE均能诱导A549细胞Hsp27、Hsp70的表达。高温应激时,Hsp27和Hsp70的表达水平分别在39℃和42℃达到峰值。BPDE处理时,Hsp27在8μmolL时表达最高,但仍处于上升趋势,而Hsp70在4μmolL时表达最高。 段燕英 隆宗琰 牛丕业 邬堂春关键词:BPDE 高温 热休克蛋白27 质膜Ca^(2+)-ATP酶异构体2基因多态性与噪声性听力损失易感性的关系 被引量:15 2005年 目的 探讨质膜Ca2 + - ATP酶异构体 2 (PMCA2 )基因多态性与噪声性听力损失的关系。方法 采用横断面流行病学研究方法 ,对 194名噪声暴露作业工人进行调查和听力测试 ,按听力学评价的结果将其分为听力损失组和听力正常组 ;用多聚酶链反应 限制性片断长度多态性 (PCR -RFLP)方法和等位基因特异扩增法 (ASA)检测其PMCA2基因上rs2 2 892 74和rs6790 64 0两个单核苷酸位点的多态性。结果 在 93名噪声性听力损失的工人中 ,rs2 2 892 74位点AA、AG和GG基因型的频率分别为16. 1%、40. 9%和 43. 0 % ,等位基因A和G的频率为 3 6 6%和 63 . 4% ;在 10 1名听力正常的工人中 ,其基因型频率分别为 15 8%(AA)、3 2 7% (AG)和 5 .1 5 % (GG) ,等位基因频率为 3 2. 2 % (A)和 67. 8% (G)。rs6790 64 0位点在噪声性听力损失组CC、CT和TT基因型的频率分别为 0、 82 8%和 17. 2 % ,等位基因C和T的频率为 41. 4%和 5 8 .6% ;在听力正常组的基因型频率分别为 1 0 %(CC)、 76. 2 % (CT)和 2 2 . 8% (TT) ;等位基因频率为 3 9. 1% (C)和 60. 9% (T)。两位点的基因型分布及其等位基因频率在噪声性听力损失组与听力正常组之间差异均无显著性 (P >0 . 0 5 )。采用多元Logistic回归对两组间年龄、性别、吸烟状况。 杨杪 谭皓 郑建如 王峰 蒋长征 何美安 陈永文 邬堂春关键词:基因多态性 听力损失 易感性 热休克转录因子2基因多态性与噪声性听力损失易感性的关系 被引量:2 2005年 目的:探讨热休克转录因子2(HSF2)基因多态性与噪声性听力损失的关系。方法:采用横断面流行病学研究方法对194例噪声暴露作业工人进行调查和听力测试,按听力学评价结果分为听力损失组(A组)和听力正常组(B组);用等位基因特异扩增法(ASA)检测其HSF2基因rs2243364位点和HSF2结合蛋白(HSF2BP)基因rs11908893位点的多态性。结果:HSF2基因rs2243364位点在2组均只存在TT一种基因型。HSF2BP基因rs11908893位点在A组TT、CC和CT基因型的频率分别为1.1%、0和98.9%,等位基因T和C的频率为50.5%和49.5%;在B组则分别为0、4.0%和96.0%,48.0%和52.0%。2个位点的基因型分布及其等位基因频率在2组间均差异无显著性意义,未发现2个位点中任一基因型的噪声性听力损失的危险度有升高。结论:HSF2基因多态性可能不是噪声性听力损失的遗传易感性因素。 刘琳 杨杪 谭皓 郑建如 冯友梅 邬堂春关键词:基因多态性 噪声 听力损失 易感性 职业性噪声暴露工人噪声性听力损失的遗传易感性研究 [目的]研究几种听力损失相关蛋白和热休克蛋白的基因多态性与职业性噪声暴露工人噪声性听力损失的遗传易感性之间的关系。[方法]采刚横断面流行病学研究方法,对194名职业性噪声暴露作业工人进行调查和听力测试,按听力学评价的结果... 杨杪 谭皓 郑建如 王峰 蒋长征 何美安 陈永文 邬堂春关键词:听力损失 易感性 单倍型 文献传递 Significant Positive Correlation of Plasma BPDE-Albumin Adducts to Urinary 1-Hydroxypyrene in Coke Oven Workers 被引量:3 2007年 Objective To investigate the application of BPDE-albumin adducts as monitoring biomarkers for coke oven workers exposed to polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and to explore possible relationship between BPDE-albumin adducts and urinary 1-hydroxypyrene (1-OHP) levels in them. Methods Thirty-seven coke oven workers from a coke plant and 47 controls without the occupational exposure to PAHs were recruited in this study. The levels of plasma BPDE-albumin adducts and urinary 1-OHP were analyzed using high performance liquid chromatography. Results The median levels of BPDE-albumin adducts (42.10 fmol/mg albumin) and urinary 1-OHP (5.46 μmol/mol creatinine) were significantly higher in coke oven workers than in controls (14.16 fmol/mg albumin, 2.96μmol/mol creatinine, respectively; P〈0.01). Multiple logistic regression analysis showed that coke oven workers were at higher risk of having BPDE-albumin adduct levels above 25.30 μmol/mg albumin (OR=1.79, P〈0.01) and urinary 1-OHP levels above 4.13 μmol/mol creatinine (OR=2.45, P〈0.05). There was a positive correlation between the levels of BPDE-albumin adducts and urinary 1-OHP in all subjects (rs=0.349, P〈0.01). Conclusion BPDE-albumin adduct is a useful biomarker for monitoring long-term exposure to PAHs, and plasma BPDE-albumin adducts level is significantly correlated to urinary 1-OHP levels in coke oven workers. HONG WANG XIAO-BO YANG AI-LIN LIU HONG-YAN ZHEN LIANG GUO HUA-SHAN LIANG YONG-YI YUN BAI YONG-WEN CHEN TANG-CHUN WU关键词:BENZO[A]PYRENE 1-HYDROXYPYRENE HSP70过表达对紫外线C致DNA损伤的影响 被引量:5 2007年 [目的]研究HSP70过表达对紫外线致DNA损伤的影响。[方法]设A549、A549/pcDNA、A549/HSP703个组,分别用不同紫外线照射剂量(0、10、20、40、80J/m2)照射HSP70表达正常和过表达的A549细胞株,用Western-blot检测HSP70的水平,用碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤情况。[结果]DNA损伤的彗星率随紫外线照射的剂量增加而逐渐加重。当在相同剂量40J/m2时,A549/HSP70组的彗星率为24%、尾矩为14.31±1.60,A549相应为40%、18.83±0.41, A549/pcDNA为40%、18.67±0.81。在40J/m2照射所致的Olive尾矩明显减少,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。[结论]HSP70能保护细胞免受一定剂量范围内的紫外线引起的DNA损伤。 宫智勇 牛丕业 牛丕业 谭浩 王峰 邹云峰 王峰 段燕英 袁晶 杨瑾关键词:热休克蛋白70 DNA损伤 A549细胞 HSP70在苯并(a)芘致细胞DNA损伤中的保护作用 被引量:2 2007年 [目的]研究热休克蛋白70(HSP70)对苯并(a)芘[B(a)P]所致肺腺癌细胞A549的DNA损伤的保护作用。[方法]用含HSPTO基因cDNA的pcDNA3.0/HSP70重组质粒转染A549细胞,提高A549细胞HSP70表达水平,以空载体质粒pcDNA3.0转染作载体对照。对肺腺癌A549细胞(A549)、空载体质粒pcDNA3.0转染A549细胞(A549/pcDNA)和HSP70过表达A549细胞(A549/HSP70),用不同浓度的B(a)P(1、5、10、50、100μmol/L)染毒24h,MTT法测定细胞存活率、单细胞琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA损伤。用溶剂二甲基亚砜处理细胞组作为未染毒细胞组。[结果]B(a)P染毒作用时,A549/HSP70细胞在50、100μmol/L浓度组存活率明显高于A549细胞。A549、A549/pcDNA和A549/HSP70细胞的DNA损伤程度都伴随B(a)P染毒浓度增加而增加。与各自未染毒细胞相比,染毒A549和A549/pcDNA细胞的Olive尾矩值均有明显增加(P<0.05),A549/HSP70细胞在5、10、50、100μmol/L浓度时,Olive尾矩值明显升高(P<0.05)。与A549细胞组相比,在各染毒浓度下,A549/HSP70细胞Olive尾矩值均有降低(P<0.05)。A549/pcDNA细胞Olive尾矩值均无明显改变。[结论]HSP70对苯并(a)芘所致肺腺癌细胞A549的DNA损伤具有保护作用。 宫智勇 宫智勇 王峰 牛丕业 邹云峰 王峰 邬堂春关键词:热休克蛋白70 苯并(A)芘 多环芳烃 DNA损伤 中国汉族人群热休克蛋白60基因多态性及连锁不平衡分析 2009年 目的分析中国汉族人群热休克蛋白60(HSP60)基因多态性及连锁不平衡关系。方法采用分片断扩增直接测序的方法,结合Taqman探针基因分型技术对30名无关健康汉族志愿者进行HSP60基因多态性检测和单倍型分析。结果(1)共检出13个频率大于1%的HSP60单核苷酸多态性(SNPs)位点,其中4个为新发现SNPs。9个已报道的SNPs分别为rs1116734、rs3749095、rs1050347、rs8539、rs2340690、rs3214832和rs7585486,内含子7无rs编号的(a/c),rs788016;4个新SNPs分别是:位于2号染色体198189061a/g,198184890a/g,198184774ag/--,198180643ac/--(内含子7),杂合度分别为0.06、0.04、0.5和0.5。(2)SNPs:rs1116734、rs1050347、rs8539、rs2340690、和rs788016在不同人种中的分布差异均有显著性(P=0.00)。(3)连锁不平衡分析(LD)后发现rs1116734与198189061a/g,rs1116734与rs788016不存在连锁不平衡。rs1050347、rs2340690、rs3214832、rs7585486及198180659a/c(无rs编号)两两间完全连锁不平衡,rs8539、198184774ag/--、198180643ac/-两两间完全连锁不平衡。以R2大小及最小等位基因频率对13个SNPs进行选择,5个代表性SNPs位点rs1116734、rs3749095、rs8539、rs2340690、和rs788016均可构成9种单倍型。结论中国汉族人群HSP60的SNPs分布有别于其他人种,rs1116734、rs3749095、rs1050347、rs8539、rs2340690、rs3214832、198184774ag/-、rs7585486、198180659a/c、198180643ac/-、rs788016是HSP60基因在中国汉族人群中较常见的SNPs。rs1116734、rs3749095、rs8539、rs2340690和rs788016是5个较有代表性的SNPs。 王静 江琪 杨晓波 何美安 白云 何越峰 邬堂春关键词:汉族 热休克蛋白 基因多态性 单倍型 槲皮素抑制HSP70表达对紫外线C致DNA损伤的影响 被引量:6 2007年 目的研究热休克蛋白70(HSP70)在紫外线C致DNA损伤中的保护作用。方法用254 nm紫外线不同照射剂量(10,20,40,80 J/m2)照射槲皮素(quercetin)抑制HSP70表达的A549细胞株(A549/quercetin),用Western-blot检测HSP70的水平,用碱性单细胞凝胶电泳检测DNA损伤,用彗星细胞率和Olive尾矩评价DNA损伤情况。A549细胞作为正常对照组,DMSO处理作为溶剂对照组(A549/DMSO)。结果无论在A549组、A549/DMSO组,还是在A549/quercetin组,DNA损伤的彗星细胞率随着紫外照射的剂量增加而逐渐增加,在10 J/m2时,未观察到HSP70的保护作用,3组的彗星细胞率差异无统计学意义;在20 J/m2照射时,可以观察到HSP70的保护作用,但不明显;40 J/m2照射时,观察到HSP70对DNA有很明显的保护作用;80 J/m2照射时,HSP70的保护作用又逐渐地消失了。进一步分析40 J/m2照射的Olive尾矩显示,与A549组或A549/DMSO组相比,A549/quercetin组Olive尾矩明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HSP70能保护细胞免受一定剂量范围内的紫外线C照射引起的DNA损伤。 牛丕业 宫智勇 谭皓 王峰 邹云锋 杨瑾 段燕英 袁晶 邬堂春关键词:热休克蛋白70 槲皮素 单细胞凝胶电泳