国家自然科学基金(81070384)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：康秀峰彭贵勇代剑华袁月刘培君更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院天水市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TRADD慢病毒载体构建及其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响被引量：1
- 2012年
- 目的构建抗食管支架术后再狭窄携人TRADD基因慢病毒表达载体,并检测其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法以购买的人TRADD基因为模板,采用PCR法扩增目的基因片段,PCR产物经回收纯化后与线性化的慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro重组。重组质粒转化DH5α感受态细胞。菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆测序无误后,质粒共转染293FT细胞制备慢病毒。Real-time定量PCR法检测病毒滴度。Western blot检测TRADD-GFP-FLAG融合蛋白的表达。MTT法检测TRADD基因慢病毒对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。结果菌落PCR扩增产物经凝胶电泳,阳性克隆得到1 200 bp片段,基因测序显示重组质粒中TRADD序列与GenBank中序列一致。包装产生的慢病毒转染293 FT细胞48 h后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,病毒滴度为3.22×108IU/ml,Western blot检测到融合蛋白TRADD-GFP-FLAG在293FT细胞中获得有效表达,MTT法证实该融合蛋白具有生物活性,能有效抑制瘢痕成纤维细胞增殖。结论成功构建并包装了pLVX-TRADD-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒表达载体,其可明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。
- 袁月康秀峰牟东薛世祥代剑华彭贵勇
- 关键词：TRADD慢病毒表达载体基因治疗
- 氩离子凝固术治疗食管病变的安全性研究被引量：4
- 2013年
- 目的研究氩离子凝固器不同输出参数对活体犬食管损伤的影响,探讨氩离子凝固术(argon plasma coagu-lation,APC)治疗食管疾病的安全范围。方法①采用氩离子凝固器,通过选择不同的输出功率(50、60、70、80 W)、氩气流量(1.6、2.0、2.4 L/min)及作用时间(2、4 s),对3只活体犬食管黏膜进行凝固,切片HE染色,光学显微镜下观察组织损伤深度。②固定氩气流量(2.0 L/min)与作用时间(3 s),选择不同输出功率(50、60、70、80、90、100 W),对2只活体犬食管黏膜切片进行HE染色,光学显微镜下观察组织损伤深度。③将8只活体犬分为2组,采用60 W(2 L、3 s)与70 W(2 L、3 s)输出参数对2组犬食管黏膜(距门齿40 cm处)进行环形烧灼,第2、4周时用胃镜与超声胃镜观察黏膜瘢痕增生及食管狭窄情况。结果①APC输出功率、氩气流量及持续作用时间与食管组织损伤深度之间均存在正相关关系,其中功率变化对损伤深度的影响最大;②氩气流量及作用时间固定的条件下,功率增加,食管组织损伤深度相应增加,在70～90 W内,功率变化而组织损伤变化不显著;③APC输出参数为60、70 W(2 L、3 s)作用于犬食管黏膜,第2、4周时观察,70 W(2 L、3 s)作用后均显示食管损伤部位瘢痕增生,管腔狭窄而60 W(2 L、3 s)作用后瘢痕增生,管腔狭窄均不明显。结论通过选择合适的APC输出参数,可控制食管损伤程度,当输出功率≤60 W时可有效预防APC术后食管狭窄等并发症的发生。
- 康秀峰刘培君袁月王志中代剑华彭贵勇
- 关键词：氩离子凝固术食管损伤并发症预防
