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一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白多克隆抗体制备被引量：4: 2008年; 目的获得一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白（IRF-4-binding protein，IBP）的高效价特异性多克隆抗体。方法通过生物信息学分析选择IBP特异片段（1228～1893bp），目的片段cDNA插入pET32a和pGEX-KG原核表达载体，分别转化BL21感受态细菌，IPTG诱导表达后组合应用阴离子交换层析、His、GST亲和层析技术获得免疫原（pET32a／IBP融合蛋白）及检测原（pGEX-KG／IBP融合蛋白）。HPLC鉴定纯度。利用改良快速免疫法获得兔抗IBP多克隆抗血清，并经蛋白A柱纯化，非特异性抗体吸收。间接ELISA检测抗体滴度、Western blot和免疫组化实验检测抗体特异性。结果表达并纯化的pET32a／IBP融合蛋白纯度达92％，pGEX-KG／IBP融合蛋白纯度达87％。IBP多克隆抗体滴度达1：51200，能特异地和内源性IBP结合。结论成功表达并纯化了IBP融合蛋白，制备了高滴度、高特异性的抗IBP多克隆抗体。; 张竹君周玉李鹏易维京杨明珍李淑慧胡川闽; 关键词：IRF-4结合蛋白蛋白纯化多克隆抗体

Aberrant expression of the IFN regulatory factor 4-binding protein (IBP) in human colorectal cancer: Recent studies shown that the IFN regulatory factor 4-binding protein (IBP) plays multiple biological roles in...; Chuanmin Hu Zhujun Zhang Peng Li Qingliang Wang Yu Zhou Tao Fu Shuhui Li Weijing Yi Xinjun Li Yang Zhang Mingzhen Yang Xiuwu Bian Ji Ming Wang Guoguang Ying An Chen (a Department of Clinical Biochemistry Laboratory Science,Third Military Medical University,Chongqing 400038,PR China

siRNA介导的IBP表达抑制对T细胞凋亡的影响被引量：6: 2007年; 目的研究IBP表达抑制后对T细胞凋亡产生的影响。方法构建IBP siRNA稳定表达及阴性对照载体,脂质体法转染Jurkat T细胞,G418筛选稳定转染细胞株,用anti-CD3和CD28 mAb刺激介导的TCR信号方式作用于稳定转染细胞后,以3H-TdR掺入实验检测细胞增殖,Annexin-v/PI双参数法经流式细胞仪检测细胞凋亡。结果TCR信号刺激下,阴性对照组细胞的3H-TdR掺入量在24 h时下降为未刺激对照组的67%,随时间延长其下降更显著,且24 h发生明显凋亡,凋亡率为21.96%;IBP siRNA表达载体转染细胞在不同时相点的增殖均不受影响,24 h凋亡率仅为2.12%,比阴性对照组细胞显著降低。结论IBP缺失能使TCR信号刺激下的细胞激活后凋亡受到抑制,提示IBP可能参与T细胞免疫自稳状态的调节。; 周玉李鹏李淑慧高利宏陈梅红杨明珍张阳胡川闽; 关键词：SIRNA 稳定转染细胞凋亡

Electrocatalytic oxidation and determination of dopamine at Fe3O4-polyaniline nanoparticles/glutamic acid chemically modified electrode: Magnetic and conducting FeO-polyaniline(FeO-PANI)nanoparticles have been prepared. FeO-PANI showed some attrac...; Wei-Jing Yi Guang-Bin Zhang Wen-Bin Liang Yan Li Shui-Hui Li Chuan-Min Hu Zheng-Ping Yu (a Department of Clinical Biochemistry,Laboratory Sciences,the Third Military Medical University,Chongqing,Gaotanyan Street 30,Shapingba District,Chongqing 400038,PR China; 关键词：GLU

一种新的T细胞相关分子IBP表达水平定量检测方法的建立被引量：1: 2009年; 目的建立一种定量检测IBP表达水平的方法,为研究IBP在免疫细胞分化以及在免疫性疾病当中的作用奠定基础。方法利用反转录PCR和PCR技术获得目的基因和内参基因片段,构建重组质粒,以重组质粒为标准品,建立实时PCR标准曲线;测定外周血白细胞IBP和β-actin表达水平。以β-actin为内参照,均一化检测结果。结果重组质粒的阳性克隆经PCR扩增,0.8%琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的基因片段插入载体内;建立起实时PCR标准曲线。检测20例正常人全血标本,得到比较稳定的检测结果。结论成功建立了用实时PCR定量检测IBPmRNA表达水平方法,为进一步研究IBP奠定了基础。; 张竹君李淑慧陈安胡川闽; 关键词：TIME PCR Β-ACTIN

Development of a novel method to measure macrophage migration inhibitory factor (MIF) in sera of patients with rheumatoid arthritis by combined electrochemical immunosensor: Macrophage migration inhibitory factor(MIF)has a multitude of biological activity and is associated with a num...; Shuhui Li Ronghua Zhang Peng Li weijing Yi Zhujun Zhang Sha Chen Shaobo Su Lijun Zhao and Chuanmin Hu (1 Department of Clinical Biochemistry,Laboratory Sciences,the Third Military Medical University,Chongqing,400038.PR China; 关键词：IGM

IRF-4结合蛋白——一个新的Th2极性分化相关分子被引量：2: 2006年; Th细胞的极性分化在免疫反应调控中具有重要作用,Th细胞极化失调所致Th1/Th2失衡与多种疾病的发生相关。对于细胞因子、抗原信号,转录因子等影响Th1/Th2分化倾向的相关调控因素的研究已比较深入,但分化的具体分子机制尚未完全阐明。IRF-4结合蛋白(IBP)是一个新发现的与Th活化及Th2极性分化相关的分子,它的发现为Th极化的分子机制的研究提供了新的线索。本文就IBP的发现及其在Th细胞极化中的作用做一综述。; 周玉胡川闽; 关键词：TH TH2

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国家自然科学基金(30471577)